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新城疫病毒HN基因构建的核酸疫苗抗肿瘤作用研究被引量：8: 1; 作者米志强金宁一 +5 位作者龚伟薛立娟孙大辉葛涛连海解丽华《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期93-96,共4页; 目的 :探讨HN基因在NDV抗肿瘤上发挥的作用。方法 :以pVAX1为表达载体构建了含NDVHN基因的pVHN核酸疫苗 ,以脂质体介导方法在体外转染OS732细胞 72h后 ,用 3,5 二羟基甲苯法测定OS732细胞膜唾液酸含量的变化。 6周龄BALB/c鼠左后肢皮... 展开更多; 关键词新城疫病毒HN基因核酸疫苗抗肿瘤作用研究; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒二价DNA疫苗的构建及实验免疫研究被引量：6: 2; 作者尹革芬金宁一 +4 位作者张洪勇郑敏李昌葛淑敏秦晓冰《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第5期19-22,共4页; 通过PCR方法从本室已构建的克隆载体pGEMT-P1-2A获得O型口蹄疫病毒主要保护性抗原VP1基因，以基因突变获得A型VP1基因。将这两种血清型的VP1基因串联后连接到真核表达载体PVAX1 PCMV启动子下游，构建成口蹄疫二价核酸疫苗pVAX1-OA。经We... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 VP1基因核酸疫苗 CTL活性抗体效价免疫指标检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

共表达FMDV P1-2A和3C重组鸡痘病毒疫苗与核酸疫苗的实验免疫研究被引量：4: 3; 作者张洪勇金宁一 +4 位作者葛淑敏尹革芬郑敏李子健江文正《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第8期20-23,共4页; 将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、... 展开更多; 关键词 FMDV 重组鸡痘病毒疫苗重组核酸疫苗免疫原性口蹄疫病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

共表达VP3与hIL-18基因真核重组质粒的构建及对人结肠癌细胞的影响被引量：1: 4; 作者金宁一连海 +5 位作者米志强李肖徐敬龙金洪涛解丽华李萍《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第9期43-46,共4页; 先将鸡贫血病毒VP3基因插入真核表达载体pVAX1的多克隆位点,再将pIRES1载体上的IRES启动子及新霉素基因一同切下插入pVAX1的VP3基因下游,然后切下新霉素基因,将hIL-18基因插入其中,构建成pVVP3IL-18,将pVVP3IL-18转染Hela细胞。间接免... 展开更多; 关键词鸡贫血病毒真核表达载体 VP3 hIL-18 IRES启动子 HELA细胞结肠癌细胞凋亡素真核重组质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达被引量：1: 5; 作者李子健金宁一 +3 位作者江文正张应玖张立树孙兆增《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期75-78,共4页; 目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌... 展开更多; 关键词艾滋病人免疫缺陷病毒Ⅱ型 HIV-2 HIV-2HCOgag蛋白毕赤酵母基因重组基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡贫血病毒VP3基因对荷C6胶质瘤Weister大鼠的治疗被引量：1: 6; 作者邱吉庆金宁一 +5 位作者连海罗毅男郭云宝米志强李宵孙迎春《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期25-27,共3页; 构建荷C6胶质瘤Weister大鼠的肿瘤模型，随机分组给予不同的处理给药，观察治疗期间及治疗后的肿瘤生长情况，通过病理组织学、超微结构分析，检测鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗在Weister大鼠体内的抗肿瘤作用。结果表明，pVVP3治疗组肿瘤... 展开更多; 关键词鸡贫血病毒凋亡素基因治疗 VP3基因凋亡素神经胶质瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用被引量：8: 7; 作者米志强金宁一 +4 位作者龚伟薛立娟连海解丽华李萍《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期704-708,共5页; 用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性... 展开更多; 关键词鸡新城疫病毒 HN基因鸡贫血病病毒VP3基因抗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新城疫病毒HN基因构建的核酸疫苗抗肿瘤作用研究被引量：8: 1; 作者米志强金宁一龚伟薛立娟孙大辉葛涛连海解丽华; 机构解放军军需大学解放军基因工程重点实验室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期93-96,共4页; 基金自然科学基金重大项目 ( 3 9893 2 90- 4 -3 ) 国家"973"项目 (G1990 1190 2 )资助; 文摘目的 :探讨HN基因在NDV抗肿瘤上发挥的作用。方法 :以pVAX1为表达载体构建了含NDVHN基因的pVHN核酸疫苗 ,以脂质体介导方法在体外转染OS732细胞 72h后 ,用 3,5 二羟基甲苯法测定OS732细胞膜唾液酸含量的变化。 6周龄BALB/c鼠左后肢皮下接种 2× 10 6个S180肿瘤细胞 ,分别于肿瘤接种后的第 7天 (肿瘤直径为 2～ 3mm)和第 17天瘤内注射 10 0 μg核酸重组体 ,同时设pVAX1对照组和单纯荷瘤对照组。荷瘤鼠经治疗后框窦采血 ,分离血清 ,测定血清唾液酸含量。取脾 ,采用FACS方法测定淋巴细胞亚群数量的变化。结果 :pVHN体外转染OS732细胞后 ,能显著降低细胞表面唾液酸含量 (P <0 .0 5 )。pVHN应用于荷瘤鼠显著降低血清中唾液酸含量 (P <0 .0 5 ) ,引起CD8+ T淋巴细胞亚群数量的增加 (P <0 0 5 )。结论 :单独HN基因在体外转染能够降低肿瘤细胞表面唾液酸含量 ,体内表达后引起T淋巴细胞亚群数量改变。; 关键词新城疫病毒HN基因核酸疫苗抗肿瘤作用研究; Keywords NDV HN gene nucleic vaccine antitumor; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学] R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒二价DNA疫苗的构建及实验免疫研究被引量：6: 2; 作者尹革芬金宁一张洪勇郑敏李昌葛淑敏秦晓冰; 机构解放军军需大学解放军基因工程重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第5期19-22,共4页; 文摘通过PCR方法从本室已构建的克隆载体pGEMT-P1-2A获得O型口蹄疫病毒主要保护性抗原VP1基因，以基因突变获得A型VP1基因。将这两种血清型的VP1基因串联后连接到真核表达载体PVAX1 PCMV启动子下游，构建成口蹄疫二价核酸疫苗pVAX1-OA。经Western blot和IFA检测，目的蛋白在HeLa细胞中获得正确表达。动物实验表明，免疫小鼠T淋巴细胞明显增殖，特异性CTL杀伤活性较对照组显著提高；血清抗体能分别与O型和A型抗原反应，抗体效价均高于空白对照组，但较灭活苗低。; 关键词口蹄疫病毒 VP1基因核酸疫苗 CTL活性抗体效价免疫指标检测; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共表达FMDV P1-2A和3C重组鸡痘病毒疫苗与核酸疫苗的实验免疫研究被引量：4: 3; 作者张洪勇金宁一葛淑敏尹革芬郑敏李子健江文正; 机构解放军军需大学解放军基因工程重点实验室长春; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第8期20-23,共4页; 文摘将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、IFA及Western blotting检测，成功获得能正确表达目的蛋白的重组鸡痘病毒株vU-TAL3CP1。并与FMDV重组核酸疫苗免疫小鼠实验表明，各实验免疫组均能诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫反应，其中以重组鸡痘病毒与核酸疫苗联合免疫效果好于其它实验各组。; 关键词 FMDV 重组鸡痘病毒疫苗重组核酸疫苗免疫原性口蹄疫病毒; 分类号 S858.31 [农业科学—临床兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共表达VP3与hIL-18基因真核重组质粒的构建及对人结肠癌细胞的影响被引量：1: 4; 作者金宁一连海米志强李肖徐敬龙金洪涛解丽华李萍; 机构解放军军需大学解放军基因工程重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第9期43-46,共4页; 基金 973规划(G1999011902)资助项目。; 文摘先将鸡贫血病毒VP3基因插入真核表达载体pVAX1的多克隆位点,再将pIRES1载体上的IRES启动子及新霉素基因一同切下插入pVAX1的VP3基因下游,然后切下新霉素基因,将hIL-18基因插入其中,构建成pVVP3IL-18,将pVVP3IL-18转染Hela细胞。间接免疫荧光表明,在细胞膜和细胞浆观察到了特异的黄绿色荧光,证明表达了hIL-18。pVVP3IL-18转染人结肠癌细胞HCT-116后,经AO/EB染色及电镜观察,可见大量细胞凋亡。说明真核重组质粒pVVP3IL-18可在HeLa细胞中表达,并可在体外诱导人结肠癌细胞HCT-116凋亡。; 关键词鸡贫血病毒真核表达载体 VP3 hIL-18 IRES启动子 HELA细胞结肠癌细胞凋亡素真核重组质粒; Keywords Apoptotin, Human interleukin 18, Colon cancer, Apoptosis; 分类号 R735.35 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达被引量：1: 5; 作者李子健金宁一江文正张应玖张立树孙兆增; 机构吉林大学第一医院解放军军需大学解放军基因工程重点实验室吉林大学生命科学学院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期75-78,共4页; 基金 ①本研究为国家"863"高技术计划项目(No.2001AA215031-3) 国家杰出青年基金(No.39825119)资助; 文摘目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实。结果:获得了HIV-2ROD gag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中的分泌表达,表达产物可被HIV-2抗血清识别,分子量约为57kD。结论:pPIC9-gag重组质粒在甲醇营养型酵母菌中可经甲醇诱导产生HIV-2ROD gag蛋白,该蛋白具有强免疫学活性。; 关键词艾滋病人免疫缺陷病毒Ⅱ型 HIV-2 HIV-2HCOgag蛋白毕赤酵母基因重组基因表达; Keywords HIV-2 gag Kchia pastoris Expression of foreign gene; 分类号 R512.91 [医药卫生—内科学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡贫血病毒VP3基因对荷C6胶质瘤Weister大鼠的治疗被引量：1: 6; 作者邱吉庆金宁一连海罗毅男郭云宝米志强李宵孙迎春; 机构吉林大学第一医院神经外科解放军军需大学解放军基因工程重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期25-27,共3页; 文摘构建荷C6胶质瘤Weister大鼠的肿瘤模型，随机分组给予不同的处理给药，观察治疗期间及治疗后的肿瘤生长情况，通过病理组织学、超微结构分析，检测鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗在Weister大鼠体内的抗肿瘤作用。结果表明，pVVP3治疗组肿瘤生长速度明显受到抑制，其抑瘤率达85．57％。病理组织学观察可见化疗对照组肝组织有点状坏死，而pVVP3治疗组肝组织未见明显病变。肿瘤组织超微结构观察在pVVP3治疗组可见典型的凋亡特征。说明鸡贫血病毒VP3基因核酸疫苗对Weister大鼠C6胶质瘤生长有抑制作用，可诱导肿瘤细胞凋亡，且对肝组织无明显损伤。; 关键词鸡贫血病毒凋亡素基因治疗 VP3基因凋亡素神经胶质瘤; 分类号 S857.4 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用被引量：8: 7; 作者米志强金宁一龚伟薛立娟连海解丽华李萍; 机构解放军军需大学解放军基因工程重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期704-708,共5页; 基金国家自然科学基金重大项目 (No .3 9893 2 90 4 3 ) 国家"973"项目(No .G1990 1190 2 )资助~~; 文摘用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性 .RT PCR、DNALadder、TUNNEL染色检测VP3基因的表达及表达产物诱导OS732细胞凋亡作用 .酶切鉴定证实成功地构建了两个核酸疫苗 ,并能在真核细胞内表达 .含HN的核酸疫苗pVHN表达后具有血凝活性并致肿瘤细胞表面唾液酸含量降低 (P <0 0 5 ) .pVVP3的转染能导致OS732细胞凋亡 ,凋亡率可达87% .试验结果表明。; 关键词鸡新城疫病毒 HN基因鸡贫血病病毒VP3基因抗肿瘤; Keywords Newcastle disease virus HN gene, chicken anemia virus VP3 gene, antitumor; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] S858.31 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新城疫病毒HN基因构建的核酸疫苗抗肿瘤作用研究	米志强金宁一龚伟薛立娟孙大辉葛涛连海解丽华	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2003	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	口蹄疫病毒二价DNA疫苗的构建及实验免疫研究	尹革芬金宁一张洪勇郑敏李昌葛淑敏秦晓冰	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	共表达FMDV P1-2A和3C重组鸡痘病毒疫苗与核酸疫苗的实验免疫研究	张洪勇金宁一葛淑敏尹革芬郑敏李子健江文正	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	共表达VP3与hIL-18基因真核重组质粒的构建及对人结肠癌细胞的影响	金宁一连海米志强李肖徐敬龙金洪涛解丽华李萍	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达	李子健金宁一江文正张应玖张立树孙兆增	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸡贫血病毒VP3基因对荷C6胶质瘤Weister大鼠的治疗	邱吉庆金宁一连海罗毅男郭云宝米志强李宵孙迎春	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	pVVP3和pVHN核酸疫苗的构建、表达及对肿瘤细胞的作用	米志强金宁一龚伟薛立娟连海解丽华李萍	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	8	在线阅读下载PDF 职称材料