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人免疫缺陷病毒II型gag基因在毕赤酵母中表达条件的研究被引量：4: 1; 作者李子健金宁一 +4 位作者江文正张立树赵健绮金洪涛王宏《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期135-137,共3页; 目的 :提高人免疫缺陷病毒 II型 ( HIV- 2 ROD) gag基因在毕赤酵母中的表达量。方法 :研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同的甲醇诱导浓度、诱导时间、溶解氧、摇瓶转速及不同 p H值对人 HIV- 2 gag表达的影响。表达产物进一步通过盐... 展开更多; 关键词 HIV-2 基因 GAG 毕赤酵母基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究被引量：1: 2; 作者王莉馨金宁一 +5 位作者王宏伟秦云龙罗坤葛涛江文正金洪涛《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期297-300,共4页; 目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行... 展开更多; 关键词 HIV-1 中国流行株gag基因 HIL-2 痘苗病毒表达 DNA疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

H_5N_1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析: 3; 作者王振国金宁一 +4 位作者马鸣潇金扩世张洪勇尹革芬葛淑敏《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期436-438,共3页; 用RT＿PCR法,以1株H5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA。将cDNA克隆于pMD18＿T载体,并对其进行测序。测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸。将其... 展开更多; 关键词 RT-PCR 禽流感病毒 NP基因分子进化分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达: 4; 作者解丽华金宁一 +4 位作者邵国喜米志强连海薛丽娟李萍《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期352-354,共3页; 目的:构建人白细胞介素18(IL - 18)与新城疫病毒(NDV) HN基因嵌合表达质粒。方法:选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒p VAX1IL - 18中IL - 18基因的尾部,同时替换掉IL - 18基因的终止子,构建表达IL - 18HN嵌合... 展开更多; 关键词新城疫病毒重组遗传白细胞介素18 嵌合表达质粒基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人免疫缺陷病毒II型gag基因在毕赤酵母中表达条件的研究被引量：4: 1; 作者李子健金宁一江文正张立树赵健绮金洪涛王宏; 机构解放军军需大学研究所解放军基因工程重点实验室吉林大学第一医院药剂科; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期135-137,共3页; 基金国家 8 6 3高技术计划项目 (2 0 0 1AA2 15 0 31) 国家杰出青年基金资助课题 (3982 5 119); 文摘目的 :提高人免疫缺陷病毒 II型 ( HIV- 2 ROD) gag基因在毕赤酵母中的表达量。方法 :研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同的甲醇诱导浓度、诱导时间、溶解氧、摇瓶转速及不同 p H值对人 HIV- 2 gag表达的影响。表达产物进一步通过盐析和 Sephadex G- 1 0 0分子筛层析柱层析分离纯化。结果 :最佳表达条件是 1 .0 %甲醇诱导 ,诱导时间 3d,大于 85 %的溶解氧 ,摇瓶转速2 5 0 r·min-1,p H6.0～ 6.5 ,目的蛋白表达量达到 2 1 mg· L-1。同时 ,经纯化后得到了纯度大于95 %的目的蛋白。结论 :获得了 HIV- 2 RODgag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中分泌表达的最佳表达条件。; 关键词 HIV-2 基因 GAG 毕赤酵母基因表达; Keywords HIV 2 Genes,gag Pichia pastoris Gene expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究被引量：1: 2; 作者王莉馨金宁一王宏伟秦云龙罗坤葛涛江文正金洪涛; 机构解放军军需大学研究所解放军基因工程重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期297-300,共4页; 基金国家杰出育年基金(39770661)资助; 文摘目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒，SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠，进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4+、CD8+ T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果：获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比，vJ38gag-IL-2，具有更好的免疫原性，重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次，以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论：重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。; 关键词 HIV-1 中国流行株gag基因 HIL-2 痘苗病毒表达 DNA疫苗; Keywords Keywords: HIV-1 gag hIL-2 Vaccinia virus Expression DNA vaccinr; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名H_5N_1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析: 3; 作者王振国金宁一马鸣潇金扩世张洪勇尹革芬葛淑敏; 机构解放军军需大学研究所解放军基因工程重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期436-438,共3页; 文摘用RT＿PCR法,以1株H5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA。将cDNA克隆于pMD18＿T载体,并对其进行测序。测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸。将其序列与6株A型流感病毒NP基因序列进行比较,各毒株之间NP基因核苷酸序列同源性为92 5%～95 9%,编码的氨基酸同源性为97 0%～98 4%。本研究通过分子进化分析揭示了各毒株间的亲源关系。; 关键词 RT-PCR 禽流感病毒 NP基因分子进化分析; Keywords Rt_PCR avian influenza virus NP gene phylogenetic analysis; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达: 4; 作者解丽华金宁一邵国喜米志强连海薛丽娟李萍; 机构吉林大学第二医院肿瘤内科解放军军需大学病毒研究所解放军基因工程重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期352-354,共3页; 基金国家 973项目资助课题 (G1990 1190 2 ); 文摘目的:构建人白细胞介素18(IL - 18)与新城疫病毒(NDV) HN基因嵌合表达质粒。方法:选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒p VAX1IL - 18中IL - 18基因的尾部,同时替换掉IL - 18基因的终止子,构建表达IL - 18HN嵌合基因的p VAX1IL - 18HN质粒,经酶切鉴定正确后,通过脂质体介导转染He L a细胞,应用Western blotting及血凝试验检测其表达情况。结果:酶切鉴定证实正确地构建了p VAX1IL - 18HN嵌合表达质粒,Western blotting和血凝试验检测结果表明,嵌合后的IL - 18和HN基因均能够表达,且表达的HN蛋白具有较高的血凝活性。结论:IL - 18和HN基因嵌合后不影响二者的表达,而且表达的HN蛋白具有血凝活性。; 关键词新城疫病毒重组遗传白细胞介素18 嵌合表达质粒基因表达; Keywords newcastle disease virus recombination,genetic interleukin-18 chimeric expression plasmid gene expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人免疫缺陷病毒II型gag基因在毕赤酵母中表达条件的研究	李子健金宁一江文正张立树赵健绮金洪涛王宏	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究	王莉馨金宁一王宏伟秦云龙罗坤葛涛江文正金洪涛	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	H_5N_1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析	王振国金宁一马鸣潇金扩世张洪勇尹革芬葛淑敏	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达	解丽华金宁一邵国喜米志强连海薛丽娟李萍	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料