新城疫病毒弱毒株分子生物学特性的研究 被引量：5

1

作者 金扩世 金宁一 +4 位作者 王兴龙 丁壮 郭志儒 王宏伟 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期193-195,共3页

于 1 996年从长春地区一养鸡场分离到一株新城疫病毒 (NDV长春株 ) ,经过病毒生物学特性的研究表明该NDV毒株为弱毒株。将NDV长春株纯化培养后 ,提取病毒RNA ,经RT_PCR扩增F基因 ,并测定出F基因的全部核苷酸序列为1 75 8bp ,编码有 5 5 ... 于 1 996年从长春地区一养鸡场分离到一株新城疫病毒 (NDV长春株 ) ,经过病毒生物学特性的研究表明该NDV毒株为弱毒株。将NDV长春株纯化培养后 ,提取病毒RNA ,经RT_PCR扩增F基因 ,并测定出F基因的全部核苷酸序列为1 75 8bp ,编码有 5 5 3个氨基酸残基。与国内外发表的部分NDV病毒的强毒株和弱毒株的相同序列进行比较 ,其核苷酸同源性在 88.2 %～ 96 .7%之间 ,氨基酸同源性在 90 .1 %～ 98.1 %之间 ,并与所有弱毒株F蛋白裂解位点区 (1 1 2～ 1 1 7)氨基酸序列Gly_Arg/Lys_Gln_Gly/Ser_Arg_Leu相同 。 展开更多

关键词 新城疫弱毒 分子生物学 弱毒株 F基因 序列分析

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人免疫缺陷病毒II型gag基因在毕赤酵母中表达条件的研究 被引量：4

2

作者 李子健 金宁一 +4 位作者 江文正 张立树 赵健绮 金洪涛 王宏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期135-137,共3页

目的 :提高人免疫缺陷病毒 II型 ( HIV- 2 ROD) gag基因在毕赤酵母中的表达量。方法 :研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同的甲醇诱导浓度、诱导时间、溶解氧、摇瓶转速及不同 p H值对人 HIV- 2 gag表达的影响。表达产物进一步通过盐... 目的 :提高人免疫缺陷病毒 II型 ( HIV- 2 ROD) gag基因在毕赤酵母中的表达量。方法 :研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同的甲醇诱导浓度、诱导时间、溶解氧、摇瓶转速及不同 p H值对人 HIV- 2 gag表达的影响。表达产物进一步通过盐析和 Sephadex G- 1 0 0分子筛层析柱层析分离纯化。结果 :最佳表达条件是 1 .0 %甲醇诱导 ,诱导时间 3d,大于 85 %的溶解氧 ,摇瓶转速2 5 0 r·min-1,p H6.0～ 6.5 ,目的蛋白表达量达到 2 1 mg· L-1。同时 ,经纯化后得到了纯度大于95 %的目的蛋白。结论 :获得了 HIV- 2 RODgag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中分泌表达的最佳表达条件。 展开更多

关键词 HIV-2 基因 GAG 毕赤酵母 基因表达

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鸡新城疫病毒抗肿瘤作用及其机制的研究进展 被引量：7

3

作者 古长庆 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期238-239,共2页

鸡新城疫病毒 (newcastlediseasevirus,NDV)感染机体可以诱导产生干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等细胞因子 ,这些细胞因子能够在患瘤机体内发挥抗肿瘤作用。NDV的附着蛋白 (hemagglutinin -neuramidase ,HN蛋白 )具有增加瘤细胞对... 鸡新城疫病毒 (newcastlediseasevirus,NDV)感染机体可以诱导产生干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等细胞因子 ,这些细胞因子能够在患瘤机体内发挥抗肿瘤作用。NDV的附着蛋白 (hemagglutinin -neuramidase ,HN蛋白 )具有增加瘤细胞对淋巴细胞的粘附力、刺激淋巴细胞的分化和改变肿瘤细胞的免疫原性等作用 ,同时NDV可以激活患瘤机体的免疫细胞 ,使免疫细胞发挥细胞毒性功能。NDV免疫机体后可以发挥这些抗肿瘤作用 ,提高机体的免疫力 ,促进机体的抗肿瘤反应 ,减少肿瘤的生长、转移和复发 ,增加肿瘤病人的存活率 。 展开更多

关键词 鸡新城疫病毒 细胞因子 肿瘤 生物治疗

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HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究 被引量：1

4

作者 王莉馨 金宁一 +5 位作者 王宏伟 秦云龙 罗坤 葛涛 江文正 金洪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期297-300,共4页

目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行... 目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒，SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠，进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4+、CD8+ T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果：获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比，vJ38gag-IL-2，具有更好的免疫原性，重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次，以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论：重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。 展开更多

关键词 HIV-1 中国流行株gag基因 HIL-2 痘苗病毒 表达 DNA疫苗

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新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究 被引量：7

5

作者 金扩世 金宁一 +4 位作者 王兴龙 丁壮 郭志儒 王宏伟 殷震 《动物科学与动物医学》 2000年第4期31-32,共2页

新城疫病毒长春株 (NDV CC株 )经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株 ,以NDV CC毒株制成弱毒疫苗 ,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式 ,分别免疫 7日龄雏鸡 ,免疫鸡未出现不良反应。免疫后 7d HI效价为 2 5以上 ,6 0 ... 新城疫病毒长春株 (NDV CC株 )经生物学及分子生物学特性研究证明为新城疫病毒弱毒株 ,以NDV CC毒株制成弱毒疫苗 ,采用饮水、滴鼻和肌肉注射免疫等方式 ,分别免疫 7日龄雏鸡 ,免疫鸡未出现不良反应。免疫后 7d HI效价为 2 5以上 ,6 0 d后均能维持较高的 HI值 ,免疫后 1 4 d用 NDV强毒攻击 ,其保护率可达到 1 0 0 % (1 0 /1 0 ) 展开更多

关键词 新城疫 弱毒疫苗 免疫试验 免疫保护率 鸡

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重组鸡痘病毒与核酸疫苗联合免疫提高机体免疫功能研究

6

作者 罗坤 金宁一 +6 位作者 吴丛梅 郭志儒 秦云龙 郭焱 夏志平 安汝国 殷震 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第1期37-40,共4页

目的 :探索联合免疫对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响。方法 :以表达中国流行株HIV 1核心蛋白Gag的重组鸡痘病毒vUTALG作初始免疫 ,以表达相同抗原的核酸疫苗质粒pcDNAG加强免疫 ,对被免疫鼠的细胞免疫和体液免疫功能进行初步测定。... 目的 :探索联合免疫对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响。方法 :以表达中国流行株HIV 1核心蛋白Gag的重组鸡痘病毒vUTALG作初始免疫 ,以表达相同抗原的核酸疫苗质粒pcDNAG加强免疫 ,对被免疫鼠的细胞免疫和体液免疫功能进行初步测定。结果 :以重组鸡痘病毒首次免疫的联合免疫组与单纯用重组病毒免疫组比较 ,CD4+ T细胞数升高 ,ConA和LPS诱导的T细胞增殖能力均明显增强 ,并能诱导HIV 1特异的血清抗体反应。结论 :以重组鸡痘病毒首次免疫的联合免疫能有效的提高T ,B细胞介导的细胞免疫和体液免疫水平。 展开更多

关键词 重组鸡痘病毒 核酸疫苗质粒 联合免疫 免疫功能 小鼠

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人类免疫缺陷病毒B亚型代表株候选疫苗的研究

7

作者 郭焱 金宁一 +2 位作者 郭巍 王尔孚 张蕾 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期447-448,共2页

关键词 艾滋病 疫苗 人类免疫缺陷病毒 白细胞介素2 核酸疫苗质粒 HIV

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人类促性腺激素释放激素受体在垂体外正常组织和癌组织的分布 被引量：20

8

作者 赵刚 龚守良 +1 位作者 岳瑛 朱平 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期445-447,共3页

促性腺激素释放激素 ( LHRH)受体在垂体外正常组织和癌组织的分布及两者性质的比较。

关键词 促性腺激素释放激素受体 癌组织 促性腺激素释放激素 垂体外组织 对比分析

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中国株HIV-1核心蛋白Gag核酸疫苗的构建与表达 被引量：5

9

作者 江文正 金宁一 +1 位作者 李子健 金洪涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期531-532,共2页

目的　构建含HIV 1中国流行株B亚型核心蛋白Gag基因的真核表达质粒 ,并在体外进行表达和鉴定。方法　将Gag基因插入到核酸疫苗载体质粒pVAX1中 ,构建真核表达质粒 pVAXGAG。用脂质体法 ,将重组质粒转染入Hela细胞后进行表达产物的检测... 目的　构建含HIV 1中国流行株B亚型核心蛋白Gag基因的真核表达质粒 ,并在体外进行表达和鉴定。方法　将Gag基因插入到核酸疫苗载体质粒pVAX1中 ,构建真核表达质粒 pVAXGAG。用脂质体法 ,将重组质粒转染入Hela细胞后进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示 ,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光。Westernblot和DotELISA分析显示 ,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的Gag蛋白。 结论构建的核酸疫苗可在体外进行表达 。 展开更多

关键词 HIV-1 核心蛋白 核酸疫苗 脂质体法

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全血法和分离淋巴细胞法对犬淋巴细胞转化对比试验 被引量：6

10

作者 金扩世 金宁一 夏志平 《动物医学进展》 CSCD 2004年第2期70-71,共2页

通过犬全血法和分离淋巴细胞法进行淋巴细胞转化对比试验 ,试验以培养 96h,Con A浓度为 2 0 μg/m L,L PS浓度为 2 5 μg/m L ,在培养结束前 18h加入 1.0μci的 3 H-胸腺嘧啶核苷测定淋转率。试验结果表明 ,两种方法差异不显著 ,但全血... 通过犬全血法和分离淋巴细胞法进行淋巴细胞转化对比试验 ,试验以培养 96h,Con A浓度为 2 0 μg/m L,L PS浓度为 2 5 μg/m L ,在培养结束前 18h加入 1.0μci的 3 H-胸腺嘧啶核苷测定淋转率。试验结果表明 ,两种方法差异不显著 ,但全血法更优于分离淋巴细胞法 ,且操作简便 。 展开更多

关键词 犬 淋巴细胞转化试验 全血法 分离淋巴细胞法 免疫功能 试验条件

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HIV-1_(CN)gp120与IL-6基因共表达质粒的构建及其免疫调节作用 被引量：3

11

作者 郭焱 金宁一 +4 位作者 张应玖 夏志平 王宏伟 郭志儒 殷震 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期774-776,共3页

目的　研究白细胞介素 6对人类免疫缺陷病毒 (HIV)gp1 2 0基因免疫小鼠后效果的调节作用。方法　构建表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因与IL 6基因的核酸疫苗质粒pGPIL 6 ,并检测其... 目的　研究白细胞介素 6对人类免疫缺陷病毒 (HIV)gp1 2 0基因免疫小鼠后效果的调节作用。方法　构建表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因与IL 6基因的核酸疫苗质粒pGPIL 6 ,并检测其在哺乳动物细胞中的表达。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠 ,检测gp1 2 0抗体的产生情况及ConA和LPS诱导的T细胞增殖能力。结果　以间接免疫荧光法 (IFA)检测到gp1 2 0在哺乳动物细胞中得到表达。pGPIL 6与pGP均可刺激小鼠产生抗gp1 2 0抗体 ,协同注射gp1 2 0和IL 6基因的小鼠产生的抗体滴度明显高于单独注射gp1 2 0的小鼠。pGPIL 6免疫鼠对ConA和LPS诱导的T细胞增殖能力明显高于单独注射gp1 2 0的小鼠。结论　协同应用IL 6基因可明显加强HIV 1gp1 2 0基因的免疫反应 ,为中国流行株HIV 1核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 白细胞介素-6 核酸疫苗质粒

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副粘病毒的受体 被引量：4

12

作者 古长庆 金宁一 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期394-396,共3页

副粘病毒感染细胞时 ,病毒首先是与靶细胞上的特异性受体结合 ,依靠膜融合进入细胞。副粘病毒与细胞结合并诱导细胞融合主要是由病毒囊膜的两个糖蛋白介导的。受体在病毒感染细胞过程中起很重要的作用。有的细胞不存在一种病毒的特异性... 副粘病毒感染细胞时 ,病毒首先是与靶细胞上的特异性受体结合 ,依靠膜融合进入细胞。副粘病毒与细胞结合并诱导细胞融合主要是由病毒囊膜的两个糖蛋白介导的。受体在病毒感染细胞过程中起很重要的作用。有的细胞不存在一种病毒的特异性受体 ,就对此种病毒有抵抗力。大多数副粘病毒共同使用唾液酸受体、无唾液酸受体、血型糖蛋白受体和糖脂受体。无唾液酸受体是仙台病毒等病毒的受体 ,主要存在肝细胞的表面 ,它的特异性和肝细胞的位置为肝病的治疗提供新的途径。人们根据仙台病毒特异性地与肝细胞无唾液酸受体结合并且诱导细胞融合 ,从而进入靶细胞中的作用机制 ,研究开发了一种新的治疗肝脏的基因载体转运系统。不仅探索一条转运药物的融合基因的途径 ,也探索一条治疗肝脏的新途径。深入研究副粘病毒的细胞受体 ,可以制作受体模拟分子、受体配体模拟分子等以阻断病毒感染 ,阻止病毒与受体的结合不失为一条防治新城疫。 展开更多

关键词 粘病毒 受体 膜副合 病毒

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免疫增强剂TMFN对犬外周血CD4/CD8比值的影响 被引量：2

13

作者 金扩世 夏志平 +2 位作者 金宁一 鲁会军 靳朝 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期96-97,共2页

采用检测犬外周血 CD4和 CD8比值变化的方法 ,观察犬注射免疫增强剂 TMFN和犬疫苗后 ,不同组之间的 CD4和 CD8比值 ,以证明该免疫增强剂对犬免疫系统的影响。结果表明 ,该免疫增强剂能够提高正常犬的细胞免疫水平 ,在犬注射疫苗的同时... 采用检测犬外周血 CD4和 CD8比值变化的方法 ,观察犬注射免疫增强剂 TMFN和犬疫苗后 ,不同组之间的 CD4和 CD8比值 ,以证明该免疫增强剂对犬免疫系统的影响。结果表明 ,该免疫增强剂能够提高正常犬的细胞免疫水平 ,在犬注射疫苗的同时应用该免疫增强剂 。 展开更多

关键词 免疫增强剂 TMFN 犬 外周血 CD4/CD8比值 免疫功能

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HIV—1gp120基因及其与IFN—α基因共表达产物的构建和 … 被引量：3

14

作者 郭焱 金宁一 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期415-416,共2页

目的 研究细胞因子ＩＦＮ－α在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法 以表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰ及共表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因与ＩＦＮ－α基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰＩＦＮ－... 目的 研究细胞因子ＩＦＮ－α在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法 以表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰ及共表达中国流行株ＨＩＶ－１ｇｐ１２０基因与ＩＦＮ－α基因的核酸疫苗质粒ｐＧＰＩＦＮ－α免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，用流式细胞仪测定１００００个免疫鼠脾淋巴细胞中ＣＤ４＾＋，ＣＤ８＾＋Ｔ细胞数及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值。结果 ｐＧ－ＰＩＦＮ－α与ｐＧＰ比较。 展开更多

关键词 HIV-1gp120 IFN-Α 免疫佐剂 基因表达 构建

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提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺 被引量：1

15

作者 王莉馨 刘雅娟 +2 位作者 林剑 范洪学 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期142-142,共1页

目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液... 目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。 展开更多

关键词 BFGF ATG SD序列 基因表达 纯化 碱性成纤维细胞因子

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绿脓杆菌外毒素A与人组蛋白H_4嵌合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建 被引量：1

16

作者 邓景致 欧阳红生 +4 位作者 涂长春 朱平 张国利 廖晓萍 薛崧 《黑龙江八一农垦大学学报》 2002年第3期60-63,共4页

设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA... 设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA-H4;融合基因经NcoⅠ及XhoⅠ酶切,以正确阅读框架插入相同酶切的pET-28A中,经酶切分析及PCR扩增检测,筛选到阳性克隆,其质粒测序结果表明成功地构建了毒性基因缺失的PEA与人组蛋白H4融合基因的原核表达载体,为进一步表达并获得大量的融合蛋白奠定了基础。 展开更多

关键词 基因克隆 原核表达载体 绿脓杆菌外毒素A 组蛋白H4 嵌合蛋白 真核细胞

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H_5N_1亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及分子进化分析

17

作者 王振国 金宁一 +4 位作者 马鸣潇 金扩世 张洪勇 尹革芬 葛淑敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期436-438,共3页

用RT＿PCR法,以1株H5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA。将cDNA克隆于pMD18＿T载体,并对其进行测序。测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸。将其... 用RT＿PCR法,以1株H5N1亚型禽流感病毒RNA为模板,扩增了NP全基因cDNA。将cDNA克隆于pMD18＿T载体,并对其进行测序。测序结果表明所克隆的1542个核苷酸的片段包含了核蛋白完整阅读框架,其中编码区为1497个核苷酸,编码498个氨基酸。将其序列与6株A型流感病毒NP基因序列进行比较,各毒株之间NP基因核苷酸序列同源性为92 5%～95 9%,编码的氨基酸同源性为97 0%～98 4%。本研究通过分子进化分析揭示了各毒株间的亲源关系。 展开更多

关键词 RT-PCR 禽流感病毒 NP基因 分子进化分析

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HIV-1 gag-gp120嵌合基因重组杆状病毒载体的构建

18

作者 张东威 金宁一 +6 位作者 王宏伟 张应玖 王莉馨 罗坤 李萍 于洪臣 殷震 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期114-116,共3页

目的 :构建含有 HIV- 1(中国株 ) gag- gp12 0嵌合基因的重组杆状病毒表达载体。方法 :利用基因重组技术将 B亚型中国株 HIV- 1的结构基因 gag与 gp12 0嵌合后再通过大肠杆菌 /杆状病毒系统构建重组杆状病毒载体。结果 :酶切电泳显示基... 目的 :构建含有 HIV- 1(中国株 ) gag- gp12 0嵌合基因的重组杆状病毒表达载体。方法 :利用基因重组技术将 B亚型中国株 HIV- 1的结构基因 gag与 gp12 0嵌合后再通过大肠杆菌 /杆状病毒系统构建重组杆状病毒载体。结果 :酶切电泳显示基因重组正确 ,电镜显示重组杆状病毒大量扩增。结论 :含有B亚型 HIV- 1(中国株 ) gag- gp12 0嵌合基因的重组杆状病毒表达载体构建成功 ,为进一步研究Gag- gp12 0嵌合蛋白的表达及其生物学活性奠定了基础。 展开更多

关键词 人I型免疫缺陷病毒 嵌合基因 载体 基因重组 杆状病毒

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HIV-1-gp120在重组杆状病毒系统中的表达

19

作者 张应玖 金宁一 +4 位作者 王宏伟 张东威 邵一鸣 殷霞 沈家骢 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期7-8,11,共3页

将中国株HIV 1B亚型 gp1 2 0全基因序列克隆到杆状病毒转座载体pFastBacI中多角体启动子下游 ,构建成重组转座载体 pFastBacI gp1 2 0 ,利用细菌 /杆状病毒 (BactoBac)表达系统筛选重组杆状病毒 ,在昆虫细胞Sf9中高效表达了HIV 1的外膜... 将中国株HIV 1B亚型 gp1 2 0全基因序列克隆到杆状病毒转座载体pFastBacI中多角体启动子下游 ,构建成重组转座载体 pFastBacI gp1 2 0 ,利用细菌 /杆状病毒 (BactoBac)表达系统筛选重组杆状病毒 ,在昆虫细胞Sf9中高效表达了HIV 1的外膜糖蛋白 gp1 2 0 ,SDS -PAGE和Westernblot分析结果一致 ,证明表达了 2种糖基化程度不同的 gp1 2 0。 展开更多

关键词 HIV-1 GP120 杆状病毒 昆虫细胞 重组表达

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新城疫病毒长春株5种结构蛋白基因序列分析

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作者 金扩世 陆承平 金宁一 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期111-113,共3页

根据已发表的新城疫病毒 (NDV)的核苷酸序列设计了 5对引物 ,采用RT PCR技术 ,分别扩增新城疫病毒长春株基因组中的F、HN、M、P及NP基因 ,并克隆和测定序列。与新城疫弱毒LaSota株和V4株进行同源性比较 ,并对NDV长春株、LaSota株及F48E9... 根据已发表的新城疫病毒 (NDV)的核苷酸序列设计了 5对引物 ,采用RT PCR技术 ,分别扩增新城疫病毒长春株基因组中的F、HN、M、P及NP基因 ,并克隆和测定序列。与新城疫弱毒LaSota株和V4株进行同源性比较 ,并对NDV长春株、LaSota株及F48E9株F蛋白分子结构的疏水性及抗原表位分析 ,表明NDV长春株具有新城疫病毒弱毒株的特性。 展开更多

关键词 新城疫病毒 长春株 蛋白基因 序列分析 动物病毒学

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