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HIV-1中国流行株gp120基因在痘苗病毒中的表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究
1
作者
王莉馨
金宁一
+4 位作者
罗坤
秦云龙
王宏伟
郭志儒
殷震
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2001年第2期8-11,共4页
将HIV 1中国流行株 gp12 0基因在痘苗病毒中进行表达 ,以期获得重组痘苗病毒 ,与核酸疫苗混合免疫 ,评价免疫效果 ,为艾滋病疫苗开发研制打下基础。将HIV 1中国流行株 gp12 0基因片段插入到 pJ38载体启动子下游 ,经同源重组和血凝素阴...
将HIV 1中国流行株 gp12 0基因在痘苗病毒中进行表达 ,以期获得重组痘苗病毒 ,与核酸疫苗混合免疫 ,评价免疫效果 ,为艾滋病疫苗开发研制打下基础。将HIV 1中国流行株 gp12 0基因片段插入到 pJ38载体启动子下游 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒 ,SDS PAGE、Westernblot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫BALB/c小鼠 ,进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4 +、CD8+T细胞数目及血清抗体等细胞免疫和体液免疫指标检测。结果获得的重组痘苗病毒vJ38gp12 0能够表达Gp12 0蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫 ,具有良好的免疫原性 ,其免疫效果以 2rVV DNA混合方式为最好。重组痘苗病毒vJ38gp12
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关键词
HIV-1
中国流行株gp120
痘苗病毒
DNA疫苗
实验免疫
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职称材料
人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达
2
作者
解丽华
金宁一
+4 位作者
邵国喜
米志强
连海
薛丽娟
李萍
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期352-354,共3页
目的:构建人白细胞介素18(IL - 18)与新城疫病毒(NDV) HN基因嵌合表达质粒。方法:选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒p VAX1IL - 18中IL - 18基因的尾部,同时替换掉IL - 18基因的终止子,构建表达IL - 18HN嵌合...
目的:构建人白细胞介素18(IL - 18)与新城疫病毒(NDV) HN基因嵌合表达质粒。方法:选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒p VAX1IL - 18中IL - 18基因的尾部,同时替换掉IL - 18基因的终止子,构建表达IL - 18HN嵌合基因的p VAX1IL - 18HN质粒,经酶切鉴定正确后,通过脂质体介导转染He L a细胞,应用Western blotting及血凝试验检测其表达情况。结果:酶切鉴定证实正确地构建了p VAX1IL - 18HN嵌合表达质粒,Western blotting和血凝试验检测结果表明,嵌合后的IL - 18和HN基因均能够表达,且表达的HN蛋白具有较高的血凝活性。结论:IL - 18和HN基因嵌合后不影响二者的表达,而且表达的HN蛋白具有血凝活性。
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关键词
新城疫病毒
重组
遗传
白细胞介素18
嵌合表达质粒
基因表达
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职称材料
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
被引量：
1
3
作者
王莉馨
刘雅娟
+2 位作者
林剑
范洪学
金宁一
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001年第2期142-142,共1页
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液...
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。
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关键词
BFGF
ATG
SD序列
基因表达
纯化
碱性成纤维细胞因子
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职称材料
题名
HIV-1中国流行株gp120基因在痘苗病毒中的表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究
1
作者
王莉馨
金宁一
罗坤
秦云龙
王宏伟
郭志儒
殷震
机构
解放军
军需
大学
病毒
学
研究所
出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2001年第2期8-11,共4页
基金
国家自然基金!(39770 6 6 )
国家杰出青年基金!(39970 6 6 1)资助项目
文摘
将HIV 1中国流行株 gp12 0基因在痘苗病毒中进行表达 ,以期获得重组痘苗病毒 ,与核酸疫苗混合免疫 ,评价免疫效果 ,为艾滋病疫苗开发研制打下基础。将HIV 1中国流行株 gp12 0基因片段插入到 pJ38载体启动子下游 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒 ,SDS PAGE、Westernblot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫BALB/c小鼠 ,进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4 +、CD8+T细胞数目及血清抗体等细胞免疫和体液免疫指标检测。结果获得的重组痘苗病毒vJ38gp12 0能够表达Gp12 0蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫 ,具有良好的免疫原性 ,其免疫效果以 2rVV DNA混合方式为最好。重组痘苗病毒vJ38gp12
关键词
HIV-1
中国流行株gp120
痘苗病毒
DNA疫苗
实验免疫
Keywords
HIV 1, gp120, Vaccinia virus, DNA vaccine
分类号
R512.910.3 [医药卫生—内科学]
R392.2 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达
2
作者
解丽华
金宁一
邵国喜
米志强
连海
薛丽娟
李萍
机构
吉林
大学
第二医院肿瘤内科
解放军军需大学病毒研究所
解放军
基因工程重点实验室
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期352-354,共3页
基金
国家 973项目资助课题 (G1990 1190 2 )
文摘
目的:构建人白细胞介素18(IL - 18)与新城疫病毒(NDV) HN基因嵌合表达质粒。方法:选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒p VAX1IL - 18中IL - 18基因的尾部,同时替换掉IL - 18基因的终止子,构建表达IL - 18HN嵌合基因的p VAX1IL - 18HN质粒,经酶切鉴定正确后,通过脂质体介导转染He L a细胞,应用Western blotting及血凝试验检测其表达情况。结果:酶切鉴定证实正确地构建了p VAX1IL - 18HN嵌合表达质粒,Western blotting和血凝试验检测结果表明,嵌合后的IL - 18和HN基因均能够表达,且表达的HN蛋白具有较高的血凝活性。结论:IL - 18和HN基因嵌合后不影响二者的表达,而且表达的HN蛋白具有血凝活性。
关键词
新城疫病毒
重组
遗传
白细胞介素18
嵌合表达质粒
基因表达
Keywords
newcastle disease virus
recombination,genetic
interleukin-18
chimeric expression plasmid
gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
被引量：
1
3
作者
王莉馨
刘雅娟
林剑
范洪学
金宁一
机构
解放军军需大学病毒研究所
吉林
大学
预防医学院
广州暨南
大学
生物工程
研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001年第2期142-142,共1页
基金
国家九五科技攻关项目 ( 96 C0 2 0 1 0 3)资助
文摘
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。
关键词
BFGF
ATG
SD序列
基因表达
纯化
碱性成纤维细胞因子
Keywords
bFGF
ATG
SD sequence
expression
purification
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIV-1中国流行株gp120基因在痘苗病毒中的表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究
王莉馨
金宁一
罗坤
秦云龙
王宏伟
郭志儒
殷震
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
2001
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达
解丽华
金宁一
邵国喜
米志强
连海
薛丽娟
李萍
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
王莉馨
刘雅娟
林剑
范洪学
金宁一
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001
1
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职称材料
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