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人工模拟加卤酶Ⅰ.半抗原合成,表征和生物活性测定 被引量:9
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作者 祁超 丁兰 +5 位作者 刘立岩 耿昊 张玉静 赵大庆 刘仔 倪嘉缵 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期533-535,共3页
rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were... rac-Tetra(m-nitrobenzene)porphyrin, H2TNO2PP, synthesized from o-nitro-benzaldehyde and pyrrole was reduced to H2TamPP, from which tetra(o-phenylacetyl benzene) porphyrin and especially its α,α,α,α-isomer were obtained. The α,α,α,α-isomer was used as hapten to immunize BALB/C mice. The latter gave antibody value of 320 as determined by ELISA method, indicating that the artificial hapten could induce the production of antibody without use of carrier. 展开更多
关键词 加卤酶 半抗原 卟啉衍生物 生物活性 合成
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用荧光光谱和紫外-可见差谱研究抗体-卟啉的相互作用 被引量:11
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作者 祁超 李伟国 +2 位作者 张玉静 刘立岩 赵大庆 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期1453-1456,共4页
meso-四 (α,α,α,α-O-苯乙酰苯 )卟啉与其单克隆抗体 1 F2结合后 ,产生显著的增色效应 ,反映了卟啉与抗体之间刚性紧密的结合 ,在抗体中的抗原结合部位存在芳香族氨基酸 .用同步荧光光谱结合荧光猝灭法得到抗体抗原结合部位的芳香族... meso-四 (α,α,α,α-O-苯乙酰苯 )卟啉与其单克隆抗体 1 F2结合后 ,产生显著的增色效应 ,反映了卟啉与抗体之间刚性紧密的结合 ,在抗体中的抗原结合部位存在芳香族氨基酸 .用同步荧光光谱结合荧光猝灭法得到抗体抗原结合部位的芳香族氨基酸主要为色氨酸和酪氨酸 ,但酪氨酸的残基数要少于色氨酸 .卟啉与抗体的结合比为 1∶ 1 ,解离常数 (2 .0 84± 0 .2 46)× 1 0 - 1 0 mol/L,可见卟啉与 Mc Ab1 F2有很高的亲和力 . 展开更多
关键词 相互作用 卟啉 抗体 紫外-可见差谱 荧光光谱 抗原 色氨酸 酷氨酸 亲和力
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稀土离子诱导钙调蛋白构象变化后的单克隆抗体制备 被引量:5
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作者 李伟国 赵大庆 +2 位作者 祁超 杜丽 刘仔 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期526-529,共4页
采用单克隆抗体技术研究了三价稀土离子与钙调蛋白作用后对其与靶分子识别能力的影响。牛脑钙调蛋白经2.4-二硝基氟苯修饰后再结合三价的铕离子,然后免疫Balb/c 小鼠,经过3次免疫后在小鼠血清中检测到相应的抗体,抗体效价为1... 采用单克隆抗体技术研究了三价稀土离子与钙调蛋白作用后对其与靶分子识别能力的影响。牛脑钙调蛋白经2.4-二硝基氟苯修饰后再结合三价的铕离子,然后免疫Balb/c 小鼠,经过3次免疫后在小鼠血清中检测到相应的抗体,抗体效价为1:12 000;用杂交瘤细胞技术制备出一株抗钙调蛋白的单克隆抗体细胞株2C3;酶联免疫吸附法(ELISA)测定结果证实钙调蛋白结合稀土离子前后对该抗体的识别能力存在显著差异,表明该抗体可以用于进一步研究金属离子对钙调蛋白构象变化及其对靶分子识别的影响. 展开更多
关键词 钙调蛋白 稀土离子 单克隆抗体 构象 分子识别 三级结构 免疫化学 制备
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人工模拟加卤酶II.酶学性质 被引量:3
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作者 祁超 丁兰 +2 位作者 张玉静 刘仔 赵大庆 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期560-562,共3页
The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porph... The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porphyrin and showed a haloperoxidase activity. The affinities of the antibody for antigen and Mn porphyrin were 4 98×10 -5 mol/L and 7 63×10 -5 mol/L, respectively. When the antibody-Mn porphyrin complex was used to catalyze the halogenation reaction, the Michaelis constant and reactive rate constant κ cat for H 2O 2 were 5 127 0×10 -3 mol/L and 0 483 4 s -1, respectively. The enzyme exchange number κ cat/K m=94 285 1 mol/(L·s). 展开更多
关键词 全抗原 加卤酶 meso-四(α α α α-O-苯乙酰苯)卟啉 酶学性质 抗体酶 人工模拟酶
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变形链球菌乳酸脱氢酶基因及同源区的克隆和序列分析 被引量:1
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作者 周春华 黄洋 +2 位作者 张颖丽 李博 欧阳红生 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第1期13-15,共3页
目的 :克隆变形链球菌乳酸脱氢酶基因 (ldh)及其两侧同源区基因片段。方法 :应用PCR技术扩增乳酸脱氢酶及其两端同源区序列片段 ,插入克隆载体pMD18-T中 ,转化大肠杆菌DH5α ,Amp+ 抗性挑选阳性克隆 ,经酶切及PCR鉴定后进行序列测定。结... 目的 :克隆变形链球菌乳酸脱氢酶基因 (ldh)及其两侧同源区基因片段。方法 :应用PCR技术扩增乳酸脱氢酶及其两端同源区序列片段 ,插入克隆载体pMD18-T中 ,转化大肠杆菌DH5α ,Amp+ 抗性挑选阳性克隆 ,经酶切及PCR鉴定后进行序列测定。结果 :PCR扩增产物特异 ;抗性筛选的 4株菌落均为阳性克隆 ;用DNASIS将序列测定的结果与基因Bank中报道的序列对比分析 ,同源性为 99.1%。结论 :根据同源性分析的结果 。 展开更多
关键词 变形链球菌 乳酸脱氢酶 基因 同源区 克隆 序列分析 龋病
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稀土离子对钙调蛋白与单克隆抗体分子识别的影响
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作者 李伟国 祁超 +2 位作者 杜丽 刘立岩 赵大庆 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1346-1350,共5页
分别采用酶联免疫吸附 (ELISA)法和荧光标记技术比较了 Ca2 +,La3 +,Eu3 +和 Yb3 +离子对钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3之间分子识别的影响 .结果表明 ,金属离子与钙调蛋白作用后会诱导其发生不同的构象变化 ,并进一步影响到钙调蛋白与单... 分别采用酶联免疫吸附 (ELISA)法和荧光标记技术比较了 Ca2 +,La3 +,Eu3 +和 Yb3 +离子对钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3之间分子识别的影响 .结果表明 ,金属离子与钙调蛋白作用后会诱导其发生不同的构象变化 ,并进一步影响到钙调蛋白与单克隆抗体 2 C3分子之间的结合强度 .当钙调蛋白分别与 La3 +,Eu3 +,Yb3 +作用后 ,它与单抗 2 C3分子之间的解离常数为 (2 6 .8± 2 .5 ) ,(2 1 .8± 3.4 )和 (6 4 .8± 5 .1 ) nmol/ L,而结合 Ca2 +前后的钙调蛋白与单抗分子的解离常数分别为 (1 77.2± 2 .8)和 (1 5 7± 4 .2 ) nmol/ L.这一结果表明 ,稀土离子诱导钙调蛋白发生的构象变化明显不同于钙离子的作用 ,这种差异可能是稀土与钙离子对钙调蛋白调控作用表现出差别的原因 . 展开更多
关键词 稀土离子 钙调蛋白 单克隆抗体 分子识别 分子量 抗原 酶联免疫吸附 荧光滴定法
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正常及肿瘤染色质的荧光寿命法、精确量热法和荧光能量转换
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作者 祁超 赵剑非 +2 位作者 李伟国 杜丽 刘立岩 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1135-1138,共4页
通过DNA染色剂 染色质配合过程的荧光寿命、精确量热和荧光能量转换的测定 ,研究了正常染色质 (NC)和肿瘤染色质 (TC)的结构。结果表明 ,NC中溴化乙锭插入DNA的成分比TC增加了 4 86 % ;溴化乙锭与TC中DNA的配合焓为 - 15 38kJ/mol,NC... 通过DNA染色剂 染色质配合过程的荧光寿命、精确量热和荧光能量转换的测定 ,研究了正常染色质 (NC)和肿瘤染色质 (TC)的结构。结果表明 ,NC中溴化乙锭插入DNA的成分比TC增加了 4 86 % ;溴化乙锭与TC中DNA的配合焓为 - 15 38kJ/mol,NC中DNA的配合焓为 - 13 2 5kJ/mol;TC中丹磺酰氯和吖啶橙之间的荧光能量转换效率比NC中的低 ,而平均供体 受体距离比NC的大 ,说明TC刚性结构较少、与溴化乙锭结合的可能性较大及基因活性较强。 展开更多
关键词 量热学 染色质 能量转换 荧光寿命
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