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题名凋亡蛋白融合基因在大肠杆菌中的表达及抗体制备
被引量：4
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作者
李士泽
张忠芳
张艳宇
连继勤
张玉静
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机构
黑龙江八一农垦大学
北华大学医学院
解放军军需大学生化教研室
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出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期262-265,共4页
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文摘
在获得凋亡蛋白融合基因重组质粒pMD18_T_EGF_PⅡ_Apoptin的基础上 ,成功地构建了重组表达质粒pET_2 8a_EGF_PⅡ_Apoptin ,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL2 1(DE3)感受态细胞中 ,经IPTG诱导表达 ,进行表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS_PAGE)检测 ,结果表明 ,表达蛋白带位于 33kD处 ,凋亡蛋白融合基因获得高效表达 ,薄层扫描分析表明表达蛋白占菌体蛋白的 4 0 %。表达蛋白经透析袋电洗脱法纯化后 ,对獭兔进行常规免疫 ,应用ELISA检测到较高的多克隆抗体效价 ,表明此蛋白具有良好的抗原性。Westernblot结果显示 ,利用纯化包涵体制备的兔抗血清可以很好地和所表达的蛋白带特异性结合。
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关键词
凋亡蛋白
融合基因
原核表达
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Keywords
apoptin
fusion gene
prokaryotic expression
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分类号
S852.612
[农业科学—基础兽医学]
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题名人喉癌细胞端粒酶催化亚基cDNA片段的扩增与克隆
被引量：2
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作者
马鹤雯
张玉静
阮承迈
陈守义
张立树
马永红
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机构
解放军军需大学生化教研室
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出处
《白求恩医科大学学报》
CSCD
北大核心
2001年第3期331-333,共3页
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基金
国家自然科学基金资助项目 !(3980 0 10 6 )
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文摘
目的 :测定人喉鳞状上皮癌 hep- 2细胞的端粒酶活性水平并获得 hep- 2细胞中 h TERT c DNA片段的克隆。方法 :采用 TRAP- ELISA法测定酶活性水平 ,RT- PCR技术扩增获得目的片段。利用酶切法、PCR法和序列分析法对所获克隆进行检测。结果 :hep- 2细胞具有较高的端粒酶活性水平 ,获得含h TERT c DNA片段的克隆。结论 :利用 RT- PCR法能够从具有较高端粒酶活性水平的 hep- 2细胞中扩增获得 h TERT c
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关键词
端粒酶
端粒酶催化亚基
反义聚合酶链式反应
喉癌
鳞状上皮癌
cDNA
基因扩增
克隆
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Keywords
telomerase
hTERT
RT PCR
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分类号
R739.65
[医药卫生—肿瘤]
Q785
[生物学—分子生物学]
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题名端粒生物学与细胞衰老
被引量：3
- 3
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作者
马永红
乔军
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机构
解放军军需大学生化教研室
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2000年第4期54-56,共3页
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关键词
端粒生物学
细胞衰老
端粒长度
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分类号
Q255
[生物学—细胞生物学]
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