番茄转录调控因子基因Pti5植物表达载体的构建及其转化烟草的研究 被引量：2

1

作者 张艳华 王罡 +1 位作者 季静 杜娟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期563-566,共4页

本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的Pti5 VP16基因的植物双元表达载体pBI121UCH1。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将Pti5 VP16基因导入烟草SRI中,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和Southern印迹分析,表明抗性植株中整合了Pti5 VP1... 本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的Pti5 VP16基因的植物双元表达载体pBI121UCH1。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将Pti5 VP16基因导入烟草SRI中,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和Southern印迹分析,表明抗性植株中整合了Pti5 VP16基因,经抗病性鉴定转基因烟草植株的抗病性明显提高。 展开更多

关键词 Pti5-VPl6基因 转化 烟草 番茄转录调控因子基因 植物表达载体

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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 被引量：44

2

作者 张艳贞 王罡 +4 位作者 胡汉桥 魏松红 季静 王军军 李昌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-39,共5页

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。 展开更多

关键词 玉米 自交系 转基因 农杆菌 预培养 共培养温度 PCR Bt杀虫蛋白基因

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大豆基因型对根癌农杆菌菌株敏感性的研究 被引量：23

3

作者 王罡 王萍 +2 位作者 蔺宇 张领兵 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期297-300,共4页

以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌... 以栽培大豆 [Glycinemax (L .)Mer]吉林 30、吉林 43、绥农 8、黑农 35和东农 42等的下胚轴为外植体 ,用EHA10 5和LBA44 0 42个根癌农杆菌菌株 (分别含有 pGBI12 1S4ABC和pGBI4A2B质粒 )研究大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性 ,以及根癌农杆菌对大豆的侵染能力。结果表明 ,大豆基因型对根癌农杆菌的敏感性存在显著差异 ,以吉林 43最敏感。根癌农杆菌菌株对大豆下胚轴侵染能力不同 ,含有 pGBI12 1S4ABC质粒的LBA44 0 4侵染能力较强 ,但差异未达显著水平。 展开更多

关键词 大豆 基因型 根癌农杆菌 菌株敏感性

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大豆转基因体系的研究进展 被引量：14

4

作者 王萍 王罡 +1 位作者 季静 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期969-976,共8页

从大豆的转基因方法和受体系统两个方面概述大豆转基因体系的最新研究进展 ,并讨论了大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径。作者认为 ,以根癌农杆菌介导大豆子叶节和基因枪轰击大豆未成熟子叶是较有效的大豆遗传转化系统。目前 ,在... 从大豆的转基因方法和受体系统两个方面概述大豆转基因体系的最新研究进展 ,并讨论了大豆遗传转化的主要障碍及可能的解决途径。作者认为 ,以根癌农杆菌介导大豆子叶节和基因枪轰击大豆未成熟子叶是较有效的大豆遗传转化系统。目前 ,在大豆遗传转化研究中存在着大豆组织培养体系有待于进一步完善、遗传转化率较低、重复性差、大豆受体基因型单一等问题 ,建立新的、高效和稳定的大豆组织培养体系 ,提高生产上栽培大豆品种的组织培养能力 ,改遗传转化现有的单一基因为多基因 。 展开更多

关键词 大豆 转基因方法 受体系统

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小麦基因转化研究进展 被引量：1

5

作者 魏松红 张艳贞 +1 位作者 曹远银 王罡 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第4期301-304,共4页

对小麦基因转化方法、转化效率以及影响转化的因素进行了总结 ,并对中国小麦基因转化的发展提出了展望。

关键词 研究进展 小麦 基因转化 农杆菌 激光微束 基因枪 花粉管通道法

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春小麦穗发芽抗性鉴定及机理研究 被引量：31

6

作者 胡汉桥 王罡 +2 位作者 张艳贞 张领兵 杜娟 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2001年第3期13-17,共5页

对国内外 5 7个春小麦品种 (系 )开花后不同时期进行穗发芽抗性和α-淀粉酶活性的测定 ,用改进的凝胶扩散法测定小麦种子α-淀粉酶活性。结果表明 ,不同春小麦品种的抗穗发芽特性及α-淀粉酶活性具有明显差别 ,来自东北地区的大部分主... 对国内外 5 7个春小麦品种 (系 )开花后不同时期进行穗发芽抗性和α-淀粉酶活性的测定 ,用改进的凝胶扩散法测定小麦种子α-淀粉酶活性。结果表明 ,不同春小麦品种的抗穗发芽特性及α-淀粉酶活性具有明显差别 ,来自东北地区的大部分主栽品种的穗发芽抗性中等。总体上 ,红粒品种的穗发芽抗性比普通白粒品种强 ,在白粒品种中也存在抗性极强的品种。不同穗型对发芽率的结果影响不大 ,小麦品种的穗发芽抗性可以用开花后 35～ 40 d的籽粒发芽率为指标。不同品种的α-淀粉酶活性和降落值存在显著差异 ,穗发芽率与种子中α-淀粉酶活性呈显著正相关 ,与降落值呈显著负相关。开花 2 5～ 40 d期间 ,穗发芽总体上呈上升趋势 ,α-淀粉酶有下降趋势 。 展开更多

关键词 春小麦 穗发芽 Α-淀粉酶 降落值 抗性鉴定 酶活性 发芽机理

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玉米遗传转化系统的研究进展 被引量：11

7

作者 杜娟 王罡 +2 位作者 王萍 张艳华 张艳贞 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期69-72,共4页

本文介绍了近年来玉米遗传转化系统的建立、基因导入手段、方法等方面的研究进展。

关键词 玉米 遗传转化 基因导入

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乙肝表面抗原小蛋白S基因导入番茄的遗传转化体系的建立 被引量：4

8

作者 于源华 何秀霞 +3 位作者 郭中满 陆一鸣 李彦舫 果洪宇 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期72-75,共4页

　以丽春番茄无菌苗的子叶为外植体,以农杆菌菌株EHA105(包含质粒pBin438S)为载体,将乙肝表面抗原小蛋白S基因导入番茄组织中.基本培养基采用MS+6-BA1 0mg/L+IAA0 2mg/L,在共培养时加入乙酰香酮100μmol/L作为诱导剂,经过组织培养得到... 　以丽春番茄无菌苗的子叶为外植体,以农杆菌菌株EHA105(包含质粒pBin438S)为载体,将乙肝表面抗原小蛋白S基因导入番茄组织中.基本培养基采用MS+6-BA1 0mg/L+IAA0 2mg/L,在共培养时加入乙酰香酮100μmol/L作为诱导剂,经过组织培养得到转基因植株.对转化植株基因组进行的分子学PCR检测表明,外源基因有可能已整合到番茄基因组中.该转基因遗传体系的建立为利用转基因植物生产乙肝口服疫苗奠定了基础. 展开更多

关键词 丽春番茄 乙肝表面抗原小蛋白S基因 转基因

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农杆菌介导的玉米遗传转化研究进展、问题与分析 被引量：7

9

作者 张艳贞 王罡 季静 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第1期109-113,共5页

综述了农杆菌介导的玉米遗传转化的研究历程和现状 ,并对技术问题和未来发展趋势进行了分析和讨论。

关键词 玉米 遗传转化 农杆菌

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ASI蛋白的特性及其应用研究进展

10

作者 胡汉桥 原亚萍 王罡 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2000年第4期81-85,共5页

ASI是抑制小麦 α-淀粉酶活性及改善小麦品质的一种重要蛋白 ,目前已将编码 ASI蛋白的基因定位于麦类作物第二同源染色体的长臂上。 ASI蛋白具有高度的多态性。大麦中 ASI蛋白对小麦α-淀粉酶的活性抑制作用较强 ,在小麦中导入大麦 ASI... ASI是抑制小麦 α-淀粉酶活性及改善小麦品质的一种重要蛋白 ,目前已将编码 ASI蛋白的基因定位于麦类作物第二同源染色体的长臂上。 ASI蛋白具有高度的多态性。大麦中 ASI蛋白对小麦α-淀粉酶的活性抑制作用较强 ,在小麦中导入大麦 ASI蛋白基因能够延缓小麦穗发芽。抗 ASI蛋白的单克隆抗体具有特异性 ,依赖抗小麦 ASI蛋白的 ELISA是测定 ASI蛋白浓度的一种有效方法。本文对 α-淀粉酶抑制蛋白的特性及应用进行了综述和展望。 展开更多

关键词 ASI 多态性 基因定位 穗发芽 小麦

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玉米自交系愈伤组织的诱导、RAPD分析及扫描电镜观察 被引量：11

11

作者 杜娟 常国权 +1 位作者 季静 王罡 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期282-285,共4页

以玉米不同自交系的幼胚为材料 ,用诱导培养基进行培养 ,以获得愈伤组织。结果发现所有自交系幼胚均可诱导出白色或黄白色的愈伤组织 ,但其再生能力差异显著 ,这主要取决于基因型和培养基种类。自交系 792 2、 340幼胚的再生频率高达 85... 以玉米不同自交系的幼胚为材料 ,用诱导培养基进行培养 ,以获得愈伤组织。结果发现所有自交系幼胚均可诱导出白色或黄白色的愈伤组织 ,但其再生能力差异显著 ,这主要取决于基因型和培养基种类。自交系 792 2、 340幼胚的再生频率高达 85 .5 %和 78%。植株再生途径也有所不同 ,890 2、 Mo17、 4 112和 84 6以器官发生途径为主 ,340、 792 2、92 1、 85 3和 835以体胚发生途径为主。经长期继代的愈伤组织失去再生能力。通过 RAPD方法发现不同愈伤组织的基因组之间存在差异。通过扫描电镜观察发现玉米体胚发生有两种情况 :一是直接诱导产生胚性愈伤组织和胚状体 ; 展开更多

关键词 玉米 自交系 组织培养 再生植株 RAPD分析 扫描电镜观察 愈伤组织

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大豆未成熟子叶体细胞胚胎发生及其相关因子的分析 被引量：14

12

作者 王萍 吴颖 +1 位作者 杨武杰 王罡 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期29-32,共4页

以东北三省 10个大豆主栽品种的未成熟子叶为材料 ,采用MS附加 2 ,4 -D(2 0mg/L)培养基诱导体细胞胚胎发生 ,并观察分析大豆种子性状与出胚率的关系。结果表明 :大豆未成熟子叶长度与出胚率在一定范围内呈负相关 ;

关键词 大豆 未成熟子叶 体细胞 胚胎发生 相关分析 品种

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类胡萝卜素概述 被引量：25

13

作者 任永霞 王罡 +2 位作者 郭郁频 王萍 季静 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第3期485-488,共4页

类胡萝卜素是广泛存在于自然界中的一类色素,和人类健康密切相关。本文就类胡萝卜素的重要生物学功能、生物合成途径及影响其合成的相关合成酶基因的研究进展作一概要综述。

关键词 类胡萝卜素 生物学功能 生物合成 合成酶基因

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农杆菌介导的优良玉米自交系遗传转化体系的建立 被引量：7

14

作者 张艳贞 魏松红 +2 位作者 胡汉桥 王军军 王罡 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第3期195-199,共5页

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,... 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S .bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,经PPT抗性筛选后分化再生植株。PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中 ,转化率为1.68 %～4.44%。本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化 ,结果表明 :比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5;预培养有利于幼胚转化 ,预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜 ; 展开更多

关键词 农杆菌介导 玉米 自交系 遗传转化体系 转基因 苏云金芽孢杆菌 预培养 共培养

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农杆菌介导大豆未成熟子叶的遗传转化 被引量：6

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作者 王萍 王罡 +4 位作者 季静 周智明 郭威 拉巴 吴颖 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期86-90,共5页

用农杆菌LBA4 40 4 (pGBI1 2 1S4ABC)转化 5个大豆品种的未成熟子叶 ,经卡那霉素筛选得到抗性植株 ,进一步用PCR检测 ,获得 1 0株PCR阳性植株。同时发现 ,不同大豆品种农杆菌转化的效率是不同的 ,吉林 4 3较易于转化 ;共培养时间是影响... 用农杆菌LBA4 40 4 (pGBI1 2 1S4ABC)转化 5个大豆品种的未成熟子叶 ,经卡那霉素筛选得到抗性植株 ,进一步用PCR检测 ,获得 1 0株PCR阳性植株。同时发现 ,不同大豆品种农杆菌转化的效率是不同的 ,吉林 4 3较易于转化 ;共培养时间是影响转化效率的主要因子。 展开更多

关键词 农杆菌 大豆 子叶 遗传转化 品种 PCR检测

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