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猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究
被引量:
5
1
作者
刘思国
涂长春
+3 位作者
余兴龙
张茂林
刘伯华
吴健敏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期530-535,共6页
利用基因搭桥技术,在KlenowDNA聚合酶作用下,分别合成猪瘟病毒E2蛋白的3个抗原表位基因,并与原核表达载体pGEX-3X进行连接、转化和筛选鉴定,构建了3个重组质粒pGEX-C、pGEX-D和pGEX-E。在IPTG的诱导下,实现了可溶性蛋白的融合表达(GST-C...
利用基因搭桥技术,在KlenowDNA聚合酶作用下,分别合成猪瘟病毒E2蛋白的3个抗原表位基因,并与原核表达载体pGEX-3X进行连接、转化和筛选鉴定,构建了3个重组质粒pGEX-C、pGEX-D和pGEX-E。在IPTG的诱导下,实现了可溶性蛋白的融合表达(GST-C、GST-D、GST-E),以GST亲和层析柱对融合蛋白进行纯化。应用ELISA和Western-blot检测证实:E抗原表位基因表达的融合蛋白GST-E具有免疫学活性,而C和D的抗原表位基因虽然都表达了融合蛋白GST-C和GST-D,但未检测到免疫学活性。免疫攻毒保护试验表明:融合蛋白GST-E具有一定的免疫保护功能,为多表位疫苗的研究奠定了基础。
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关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
抗原表位
基因表达
融合表达
免疫学活性
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职称材料
题名
猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究
被引量:
5
1
作者
刘思国
涂长春
余兴龙
张茂林
刘伯华
吴健敏
机构
解放军军需大学军事兽医研究所病毒室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期530-535,共6页
基金
国家自然科学基金重大项目资助课题(39893290-1)
文摘
利用基因搭桥技术,在KlenowDNA聚合酶作用下,分别合成猪瘟病毒E2蛋白的3个抗原表位基因,并与原核表达载体pGEX-3X进行连接、转化和筛选鉴定,构建了3个重组质粒pGEX-C、pGEX-D和pGEX-E。在IPTG的诱导下,实现了可溶性蛋白的融合表达(GST-C、GST-D、GST-E),以GST亲和层析柱对融合蛋白进行纯化。应用ELISA和Western-blot检测证实:E抗原表位基因表达的融合蛋白GST-E具有免疫学活性,而C和D的抗原表位基因虽然都表达了融合蛋白GST-C和GST-D,但未检测到免疫学活性。免疫攻毒保护试验表明:融合蛋白GST-E具有一定的免疫保护功能,为多表位疫苗的研究奠定了基础。
关键词
猪瘟病毒
E2蛋白
抗原表位
基因表达
融合表达
免疫学活性
Keywords
CSFV
E2 protein
single-epitope fusion protein
immunological activity
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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出处
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被引量
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1
猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究
刘思国
涂长春
余兴龙
张茂林
刘伯华
吴健敏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
5
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