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抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体的制备及活性分析
被引量：
1
1
作者
张金龙
任军
+6 位作者
于婷
宋小红
付广成
刘树玲
张章
李冰
李建民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期1299-1302,1306,共5页
目的在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法将具有保护活性的鼠源单克隆抗体(mAb)的轻、重链可变区基因,分别与人κ型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建轻重链嵌合抗体基因...
目的在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法将具有保护活性的鼠源单克隆抗体(mAb)的轻、重链可变区基因,分别与人κ型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建轻重链嵌合抗体基因,克隆到T载体上进行序列测定确证。然后分别构建含有嵌合轻、重链基因的表达载体pcDNA3.1-L和pcDNA3.1-H。构建完成的表达载体电转化CHO-S细胞,G418筛选获得稳定表达细胞株。扩大培养、收集上清用MabSelect Sure亲和层析填料纯化。纯化后的抗体进行SDS-PAGE、ELISA、Western blot分析以及小鼠体内保护活性评价。结果 PCR鉴定及测序结果表明pcDNA3.1-H和pcDNA3.1-L构建完成,序列正确;Dot blot结果表明获得表达量高的稳转株细胞;SDSPAGE及Western blot法证明抗体纯化获得成功,ELISA结果表明该抗体具有结合与F1抗原的活性;小鼠体内攻击实验表明其保护活性与鼠mAb大致相同。结论成功在CHO-S细胞中表达了具有中和活性的抗F1人-鼠嵌合抗体。
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关键词
鼠疫
F1
嵌合抗体
中国仓鼠卵巢细胞
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题名
抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体的制备及活性分析
被引量：
1
1
作者
张金龙
任军
于婷
宋小红
付广成
刘树玲
张章
李冰
李建民
机构
解放军军事医学科学院生物工程研究所疫苗与抗体工程研究室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期1299-1302,1306,共5页
基金
国家自然科学基金(81000710)
"重大新药创制"科技重大专项(2013ZX09304103)
文摘
目的在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体,并对其活性进行分析。方法将具有保护活性的鼠源单克隆抗体(mAb)的轻、重链可变区基因,分别与人κ型轻链恒定区、IgG1重链恒定区基因融合后构建轻重链嵌合抗体基因,克隆到T载体上进行序列测定确证。然后分别构建含有嵌合轻、重链基因的表达载体pcDNA3.1-L和pcDNA3.1-H。构建完成的表达载体电转化CHO-S细胞,G418筛选获得稳定表达细胞株。扩大培养、收集上清用MabSelect Sure亲和层析填料纯化。纯化后的抗体进行SDS-PAGE、ELISA、Western blot分析以及小鼠体内保护活性评价。结果 PCR鉴定及测序结果表明pcDNA3.1-H和pcDNA3.1-L构建完成,序列正确;Dot blot结果表明获得表达量高的稳转株细胞;SDSPAGE及Western blot法证明抗体纯化获得成功,ELISA结果表明该抗体具有结合与F1抗原的活性;小鼠体内攻击实验表明其保护活性与鼠mAb大致相同。结论成功在CHO-S细胞中表达了具有中和活性的抗F1人-鼠嵌合抗体。
关键词
鼠疫
F1
嵌合抗体
中国仓鼠卵巢细胞
Keywords
Yersinia pestis； F1； chimeric antibody； CHO cells
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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1
抗鼠疫耶尔森菌荚膜抗原F1嵌合抗体的制备及活性分析
张金龙
任军
于婷
宋小红
付广成
刘树玲
张章
李冰
李建民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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