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小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究 被引量:6
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作者 成军 柯亨宁 +4 位作者 刘妍 斯崇文 王勤环 洪卫国 钟彦伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期252-254,共3页
克隆小鼠白细胞介素 18(IL 18)编码区的cDNA ,并实现在真核细胞中的表达。方法 :用小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA核苷酸序列 ,设计、合成基因序列特异性引物 ,应用逆转录多聚酶链反应RT PCR ,以植物血凝 (PHA)和细菌脂多糖 (LPS)刺... 克隆小鼠白细胞介素 18(IL 18)编码区的cDNA ,并实现在真核细胞中的表达。方法 :用小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA核苷酸序列 ,设计、合成基因序列特异性引物 ,应用逆转录多聚酶链反应RT PCR ,以植物血凝 (PHA)和细菌脂多糖 (LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板 ,扩增获得全长mIL 18,转染小鼠成纤维细胞系SVT2 ,并进行IL 18生物学活性的检测。结果 :经测序证实获得的小鼠IL 18的cDNA序列与文献报道的mIL 18的cDNA序列完全一致。构建的小鼠IL 18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后 ,获得具有生物学活性mIL 18的分泌表达。结论 :克隆了小鼠IL 18的cDNA ,并实现了在真核细胞中的表达。 展开更多
关键词 白细胞介素18 CDNA 基因克隆化 基因表达 RFPCR
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大鼠肝再生增强因子基因组DNA的克隆化与序列分析 被引量:6
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作者 董菁 成军 +4 位作者 刘友昭 王刚 施双双 钟彦伟 王勤环 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期36-37,共2页
根据大鼠肝再生增强因子 (Augmenterofliverregeneration ,ALR)cDNA序列设计特异性引物 ,采用多聚酶链反应 (PCR)法自Wistar大鼠基因组DNA中扩增出大鼠ALR基因组DNA ,全长为 15 0 8nbp ,结构为 3个外显子和 2个内含子 ,外显子长度分别为... 根据大鼠肝再生增强因子 (Augmenterofliverregeneration ,ALR)cDNA序列设计特异性引物 ,采用多聚酶链反应 (PCR)法自Wistar大鼠基因组DNA中扩增出大鼠ALR基因组DNA ,全长为 15 0 8nbp ,结构为 3个外显子和 2个内含子 ,外显子长度分别为 18bp、197bp和 16 3bp ,各编码 6个、6 4个和 5 5个氨基酸残基 ,长度与小鼠、人类ALR的外显子一致。 展开更多
关键词 大鼠 肝再生增强因子 基因组 DNA 克隆化 序列分析 多聚酶链反应 外显子 内含子
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杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析 被引量:6
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作者 成军 夏小兵 +4 位作者 王刚 刘妍 钟彦伟 王琳 杨继珍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期37-39,共3页
目的 克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法 体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。... 目的 克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法 体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫 (Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果 以杜氏利什曼原虫的基因组为模板 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株PP2C基因序列长度为 1317bp ,开放读码框架由 12 2 1bp组成 ,编码产物为 40 6个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为 95 % (387/ 40 6 )。结论 本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因 。 展开更多
关键词 杜氏利什曼原虫 蛋白磷酸酶2C 基因疫苗 T细胞抗原 基因克隆化 序列分析
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墨西哥利什曼原虫无鞭毛体蛋白的基因克隆化与序列分析 被引量:9
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作者 成军 钟彦伟 +3 位作者 刘妍 董菁 杨继珍 陈菊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期39-41,共3页
目的克隆墨西哥利什曼原虫(L.mex)WR972株的无鞭毛体蛋白(amastin)的编码基因,并对其同源核苷酸序列进行分析。方法根据已克隆的亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因序列,设计并合成无鞭毛体蛋白基因特异性引物,以墨西哥利... 目的克隆墨西哥利什曼原虫(L.mex)WR972株的无鞭毛体蛋白(amastin)的编码基因,并对其同源核苷酸序列进行分析。方法根据已克隆的亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因序列,设计并合成无鞭毛体蛋白基因特异性引物,以墨西哥利什曼原虫WR972株的基因组DNA作为模板,进行多聚酶链反应(PCR)扩增。将扩增的DNA片段克隆到pCR2.1T载体中,进行测序,并对同源的核苷酸序列分析、比较。结果从体外培养的墨西哥利什曼原虫WR972株提取基因组DNA,以无鞭毛体蛋白基因特异性引物进行PCR扩增获得550bp的DNA片段。克隆到pCE2.1T载体片段进行的序列测定结果表明,获得了墨西哥利什曼原虫的无鞭毛体蛋白编码基因片段,与亚马逊利什曼原虫的无鞭毛体蛋白基因之间具有高度的同源性。结论实现了墨西哥利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的克隆化,为进一步研究其表达及作为疫苗研究的候选基因奠定了基础。 展开更多
关键词 利什曼原虫 无鞭毛体蛋白 基因克隆化
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白细胞介素—12和白细胞介素—18质粒对HBcAg DNA疫苗诱导小鼠(H—2^d)体液免疫应答的影响 被引量:8
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作者 吴欣 黄祖瑚 +3 位作者 成军 吴兴柳 董菁 陆北川 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期284-287,共4页
目的:观察编码鼠白细胞介素(IL)-12和IL-18的真核表达载体犤pcDNA3.1/IL-12(以下简称IL-12质粒)和pcDNA3.1/IL-18(以下简称IL-18质粒)犦对HBcAgDNA疫苗(pJW4303/HBc)诱导Balb/c(H-2d)小鼠免疫应答的影响。方法:肌肉注射接种IL-12质粒、I... 目的:观察编码鼠白细胞介素(IL)-12和IL-18的真核表达载体犤pcDNA3.1/IL-12(以下简称IL-12质粒)和pcDNA3.1/IL-18(以下简称IL-18质粒)犦对HBcAgDNA疫苗(pJW4303/HBc)诱导Balb/c(H-2d)小鼠免疫应答的影响。方法:肌肉注射接种IL-12质粒、IL-18质粒和HBcAgDNA疫苗,ELISA法检测小鼠血清抗HBcIgG亚类(IgG1、IgG2a)水平。结果:免疫6周后,联合注射IL-12、IL-18和IL-12+IL-18组小鼠血清的抗HBc终点滴度均明显高于单纯注射HBcAgDNA疫苗组小鼠(P<0.05),抗HBcIgG亚类以IgG2a占优。结论:IL-12、IL-18以及IL-12+IL-18联合HBcAgDNA疫苗注射能够提高小鼠血清中抗HBc水平。 展开更多
关键词 乙型肝炎核心抗原 DNA疫苗 白细胞介素12 白细胞介素18 小鼠
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肝再生增强因子的作用机制 被引量:3
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作者 成军 李莉 +1 位作者 张玲霞 陈菊梅 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期146-148,共3页
关键词 肝脏再生 肝再生增强因子 作用机制 ALR 生物学功能 线粒体 干扰素Γ
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