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结核杆菌DNA探针板杂交方法及其应用研究 被引量:1
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作者 吴雪琼 庄玉琼 +1 位作者 张晓刚 李国利 《中国防痨杂志》 CAS 1996年第4期177-180,共4页
我们建立了一种在酶标板上进行DNA:DNA杂交的方法,该方法与ELISA类似,简单、易操作、可半定量,便于临床实验室推广应用。对其杂交条件及影响因素进行了详细的探讨。通过该方法,地高辛标记的结核分支杆菌全染色体DNA... 我们建立了一种在酶标板上进行DNA:DNA杂交的方法,该方法与ELISA类似,简单、易操作、可半定量,便于临床实验室推广应用。对其杂交条件及影响因素进行了详细的探讨。通过该方法,地高辛标记的结核分支杆菌全染色体DNA探针和12种分支杆菌、7种非分支杆菌个染色体DNA的杂交百分率有显著差别,除卡介苗、堪萨斯分支杆菌杂交百分率超过30%,其余受试菌株均低于10%。结果表明在酶标板上进行核酸杂交是完全可行的,利用已知细菌DNA定量包被板,与未知的带标记的细菌DNA杂交,可达到菌种鉴定的目的。 展开更多
关键词 结核杆菌 DNA探针
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结核分支杆菌抗原研究的若干进展 被引量:1
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作者 李晓明 《中国防痨杂志》 CAS 1993年第1期44-46,共3页
对结核杆菌抗原研究的目的主要有三个方面:诊断、预防和治疗。而无论进行哪方面的研究,获得纯化抗原则是重要的一步。尽管近年来在结核菌病原学检查方面,利用DNA探针、PCR技术、色谱技术和BACTEC460检测系统等取得很大进展,但利用纯化... 对结核杆菌抗原研究的目的主要有三个方面:诊断、预防和治疗。而无论进行哪方面的研究,获得纯化抗原则是重要的一步。尽管近年来在结核菌病原学检查方面,利用DNA探针、PCR技术、色谱技术和BACTEC460检测系统等取得很大进展,但利用纯化结核菌抗原进行血清学检测仍将是结核病诊断的重要方面。结核病仍是世界范围内的公共卫生问题,估计每年有300万人死于结核病。BCG是目前所能得到的唯一菌苗,但在多次大规模的实验中显示其不稳定及保护作用不显著。 展开更多
关键词 结核杆菌 抗原 细菌
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16S-23SrDNA间隔区序列PCR扩增及探针杂交用于偶然分支杆菌暴发感染的研究 被引量:3
3
作者 张灵霞 庄玉辉 +6 位作者 池英藩 邱志强 王玮 刘坦业 池细弟 高世华 林蓉金 《中国防痨杂志》 CAS 2000年第4期206-208,共3页
目的 从基因水平上确认福建省南平市注射后偶然分支杆菌暴发感染的致病菌 ,并建立PCR结合DNA探针杂交快速鉴定偶然分支杆菌的方案。方法 根据偶然分支杆菌 16S 2 3SrDNA间隔区序列 ,设计合成一段寡核苷酸探针 ,采用PCR扩增、RFLP和DN... 目的 从基因水平上确认福建省南平市注射后偶然分支杆菌暴发感染的致病菌 ,并建立PCR结合DNA探针杂交快速鉴定偶然分支杆菌的方案。方法 根据偶然分支杆菌 16S 2 3SrDNA间隔区序列 ,设计合成一段寡核苷酸探针 ,采用PCR扩增、RFLP和DNA斑点杂交技术 ,对 2 9株偶然分支杆菌临床分离株进行鉴定。结果  2 9株偶然分支杆菌临床分离株均被PCR扩增出一条约 4 70bp的DNA条带 ,DNA探针杂交也出现特异的杂交斑点。结论  16S 2 3SrDNA间隔区序列PCR扩增及DNA探针杂交在基因水平上确认引起此次注射后暴发感染的致病菌为偶然分支杆菌 ,该方法具有灵敏、特异的特点。 展开更多
关键词 偶然分支杆菌 聚合酶链反应 DNA探针
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结核杆菌pcHSP65真核表达载体的构建及其DNA免疫实验 被引量:6
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作者 居巍 刘君炎 +1 位作者 庄玉辉 叶林柏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期12-15,20,共5页
目的 :构建以结核分枝杆菌热休克蛋白 65kD基因为基础的核酸疫苗。方法 :采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因中 ,扩增出HSP65的编码基因 ,经限制性核酸内切酶消化后 ,插入真核表达载体pcDNA3 .1 (- )的相应酶切位点 ,并将此重组质... 目的 :构建以结核分枝杆菌热休克蛋白 65kD基因为基础的核酸疫苗。方法 :采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因中 ,扩增出HSP65的编码基因 ,经限制性核酸内切酶消化后 ,插入真核表达载体pcDNA3 .1 (- )的相应酶切位点 ,并将此重组质粒免疫动物。结果 :重组质粒的插入基因经序列测定证实为结核分枝杆菌HSP65。DNA免疫小鼠体内产生特异性抗体 ,能抵抗结核杆菌的感染。结论 :以HSP65编码基因为基础的真核表达载体构建成功 ,并能引起特异性动物免疫反应 。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 HSP65 真核表达载体
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色谱技术在分支杆菌分类鉴定及诊断中的应用
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作者 张寅 庄玉辉 《中国防痨杂志》 CAS 1993年第2期95-96,共2页
色谱技术近年来在医药学领域的广泛应用,尤其是在临床微生物检验方面所发挥的作用己引起各方面的重视。以气相色谱(GC)为主的色谱技术不仅是分支杆菌属分类工作必不可少的手段,而且在分支杆菌的菌型鉴定、结核性脑膜炎的快速诊断及结核... 色谱技术近年来在医药学领域的广泛应用,尤其是在临床微生物检验方面所发挥的作用己引起各方面的重视。以气相色谱(GC)为主的色谱技术不仅是分支杆菌属分类工作必不可少的手段,而且在分支杆菌的菌型鉴定、结核性脑膜炎的快速诊断及结核杆菌的药敏试验等方面均具有临床实用价值。 展开更多
关键词 气相色谱 分支杆菌
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