目的探讨E3泛素连接酶32(Trim32)调控血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用机制。方法选择C57雄性野生型小鼠40只,其中10只小鼠从胸主动脉获得VSMC后,分为空白组、对照组、转染组、模型组、对照1组、转染1组和激动剂组(β-catenin激动...目的探讨E3泛素连接酶32(Trim32)调控血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用机制。方法选择C57雄性野生型小鼠40只,其中10只小鼠从胸主动脉获得VSMC后,分为空白组、对照组、转染组、模型组、对照1组、转染1组和激动剂组(β-catenin激动剂同时处理),后4组用重组人血小板衍生生长因子30 mg/L干预24 h,再按分组分别转染阴性干扰siControl和siTrim32,用PCR和Western blot检测各组Trim32、β-catenin mRNA和蛋白表达。观察各组细胞增殖和迁移情况。另30只小鼠左颈动脉损伤处理,取右、左颈动脉分为假手术组、假手术对照组、假手术转染组、损伤组、损伤对照组和损伤转染组,每组10只,按分组处理后,检测Trim32表达和血管内膜增生情况。结果与空白组比较,模型组Trim32 mRNA和蛋白表达升高(1.89±0.30 vs 0.99±0.06,1.82±0.30 vs 1.02±0.05,P<0.01)。与对照组比较,转染组细胞增殖、阳性细胞、β-catenin蛋白表达降低,对照1组各项明显升高(P<0.05,P<0.01),与转染1组比较,对照1组和激动剂组阳性细胞升高(P<0.01)。与假手术组比较,损伤组Trim32 mRNA和蛋白明显升高(P<0.01)。与损伤对照组比较,假手术对照组和损伤转染组内膜/中膜面积比值降低(P<0.01),损伤转染组内膜/中膜面积比值较假手术转染组升高(2.11±0.64 vs 0.37±0.04,P<0.05)。结论Trim32可能通过β-catenin途径促进VSMC增殖及迁移。展开更多
文摘目的探讨E3泛素连接酶32(Trim32)调控血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用机制。方法选择C57雄性野生型小鼠40只,其中10只小鼠从胸主动脉获得VSMC后,分为空白组、对照组、转染组、模型组、对照1组、转染1组和激动剂组(β-catenin激动剂同时处理),后4组用重组人血小板衍生生长因子30 mg/L干预24 h,再按分组分别转染阴性干扰siControl和siTrim32,用PCR和Western blot检测各组Trim32、β-catenin mRNA和蛋白表达。观察各组细胞增殖和迁移情况。另30只小鼠左颈动脉损伤处理,取右、左颈动脉分为假手术组、假手术对照组、假手术转染组、损伤组、损伤对照组和损伤转染组,每组10只,按分组处理后,检测Trim32表达和血管内膜增生情况。结果与空白组比较,模型组Trim32 mRNA和蛋白表达升高(1.89±0.30 vs 0.99±0.06,1.82±0.30 vs 1.02±0.05,P<0.01)。与对照组比较,转染组细胞增殖、阳性细胞、β-catenin蛋白表达降低,对照1组各项明显升高(P<0.05,P<0.01),与转染1组比较,对照1组和激动剂组阳性细胞升高(P<0.01)。与假手术组比较,损伤组Trim32 mRNA和蛋白明显升高(P<0.01)。与损伤对照组比较,假手术对照组和损伤转染组内膜/中膜面积比值降低(P<0.01),损伤转染组内膜/中膜面积比值较假手术转染组升高(2.11±0.64 vs 0.37±0.04,P<0.05)。结论Trim32可能通过β-catenin途径促进VSMC增殖及迁移。
