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敲低长链非编码RNA H19(lncRNA H19)促进人结肠细胞自噬抑制脂多糖诱导的凋亡
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作者 陈瑞 张燕飞 +6 位作者 王军华 陶明华 冉剑涛 杨杰 王孜 潘丽 韩起 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期538-543,共6页
目的 探讨lncRNA H19在溃疡性结肠炎(UC)患者中的表达水平及其在UC中的作用。方法 收集西藏军区总医院25名UC患者和25名健康体检者的结肠黏膜标本及血清标本,采用荧光定量PCR检测lncRNA H19表达水平,并对血清标本进行受试者工作特征(ROC... 目的 探讨lncRNA H19在溃疡性结肠炎(UC)患者中的表达水平及其在UC中的作用。方法 收集西藏军区总医院25名UC患者和25名健康体检者的结肠黏膜标本及血清标本,采用荧光定量PCR检测lncRNA H19表达水平,并对血清标本进行受试者工作特征(ROC)曲线分析。采用脂多糖(LPS)处理建立体外HT29结肠细胞炎性模型,并采用荧光定量PCR检测lncRNA H19在结肠细胞的表达。通过慢病毒技术构建lncRNA H19低表达的HT29细胞株,噻唑蓝(MTT)法检测HT29细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡和自噬蛋白表达情况。采用自噬激动剂雷帕霉素处理后,MTT法观察对HT29细胞存活的影响。结果 lncRNA H19在UC患者结肠黏膜组织和血清中高表达,ROC曲线下面积为0.786。LPS刺激后,HT29细胞lncRNA H19表达显著升高,并与刺激时间正相关。敲低lncRNA H19可促进HT29细胞存活并抑制细胞凋亡,促进细胞自噬水平增加;雷帕霉素处理后,细胞存活率明显升高。结论 敲低lncRNA H19促进结肠细胞自噬抑制LPS诱导的结肠细胞凋亡并促进其存活。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎(UC) lncRNA H19 自噬 凋亡
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敲低己糖激酶2(HK2)抑制乳腺癌细胞增殖并降低其对氟尿嘧啶的耐药 被引量:6
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作者 王军华 陶明华 +4 位作者 王滕 王孜 肖静 丁巳娟 陈瑞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期722-727,共6页
目的研究敲低己糖激酶2(HK2)对乳腺癌细胞增殖、耐药的影响及其机制。方法通过短发夹RNA(shRNA)质粒转染技术构建稳定转染的MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR及Western blot法检测HK2 mRNA和蛋白水平,噻唑蓝(MTT)法观察HK2对乳腺癌细... 目的研究敲低己糖激酶2(HK2)对乳腺癌细胞增殖、耐药的影响及其机制。方法通过短发夹RNA(shRNA)质粒转染技术构建稳定转染的MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR及Western blot法检测HK2 mRNA和蛋白水平,噻唑蓝(MTT)法观察HK2对乳腺癌细胞增殖及对5氟脲嘧啶(5-FU)耐药的影响,乳酸试剂盒和细胞外酸化率(ECAR)检测HK2对乳腺癌细胞糖酵解的影响。结果获得稳定低表达HK2的乳腺癌细胞株,HK2 mRNA及蛋白水平均明显降低。敲低HK2后明显抑制乳腺癌细胞的增殖并增强5-FU对乳腺癌细胞的杀伤作用,下调HK2后能够明显抑制乳腺癌细胞乳酸分泌和下调糖酵解基线。结论敲低HK2抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖并降低其对5-FU的耐药性。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 己糖激酶2(HK2) 短发夹RNA(shRNA) 5氟脲嘧啶(5-FU) 糖酵解
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