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活性氧在红缘拟层孔菌杀伤白血病细胞中的作用研究
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作者 成晓霞 王子见 +1 位作者 何凤琴 成瀛 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-76,共9页
红缘拟层孔菌抗肿瘤作用受到广泛关注,但其弱极性化合物对白血病细胞的增殖抑制及作用机制尚缺乏实验证据。采用MTT法评价红缘拟层孔菌不同极性组分抗肿瘤活性,结果显示氯仿组分(FPKc)可显著抑制U937细胞的增殖;进而结合流式细胞术分析F... 红缘拟层孔菌抗肿瘤作用受到广泛关注,但其弱极性化合物对白血病细胞的增殖抑制及作用机制尚缺乏实验证据。采用MTT法评价红缘拟层孔菌不同极性组分抗肿瘤活性,结果显示氯仿组分(FPKc)可显著抑制U937细胞的增殖;进而结合流式细胞术分析FPKc杀伤白血病细胞的作用机制,发现其能够显著提升胞内活性氧含量,同时伴随细胞质膜电位下降、胞内钙离子浓度上升、线粒体膜电位崩解、细胞凋亡率增加,而活性氧抑制剂则能明显缓解细胞凋亡的发生,提高细胞存活率。因此,FPKc可能调控活性氧的过量生成促进U937细胞的死亡。 展开更多
关键词 红缘拟层孔菌 人急性单核白血病U937细胞 活性氧 细胞凋亡
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沙棘果油对过氧化氢诱导氧化损伤的保护作用 被引量:5
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作者 郑鹏 王波 王前 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1349-1356,共8页
沙棘(Hippophae rhamnoides)是一种具有药用价值的植物,沙棘果油具有抗氧化、抗炎症及抗肿瘤等多种药理作用。为了探讨沙棘果油对H 2 O 2造成氧化性损伤的细胞生长的影响及其抗氧化性,该研究选择H 2 O 2对RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过... 沙棘(Hippophae rhamnoides)是一种具有药用价值的植物,沙棘果油具有抗氧化、抗炎症及抗肿瘤等多种药理作用。为了探讨沙棘果油对H 2 O 2造成氧化性损伤的细胞生长的影响及其抗氧化性,该研究选择H 2 O 2对RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验检测沙棘果油体外抗氧化能力,用[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]MTT法和流式细胞仪检测超氧化物阴离子荧光探针(DHE)信号,分别检测不同浓度沙棘果油对H 2 O 2损伤细胞的存活率和超氧化物阴离子水平。结果表明:(1)在DPPH自由基清除实验中,当沙棘果油浓度小于4.9%时,沙棘果油的抗氧化能力大于维生素C。(2)通过MTT法发现,浓度为3.125%的沙棘果油对H 2 O 2损伤细胞的存活率显著升高(P<0.01)。(3)从DHE检测发现,在同一检测时间点,随着沙棘果油浓度增加,DHE阳性细胞比例显著下降(P<0.01);在不同检测时间点,随着沙棘果油浓度增加,DHE阳性细胞比例显著升高(P<0.01)。沙棘果油对过氧化氢诱导的RAW264.7细胞氧化损伤模型有一定修复作用,可能与细胞内超氧化物阴离子水平受到抑制有关,它具有抗氧化性损伤的潜能。 展开更多
关键词 沙棘果油 抗氧化性 MTT法 DHE 过氧化氢损伤模型
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蜂毒前溶血肽原基因的改造及其原核表达 被引量:1
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作者 郭新军 《江苏农业科学》 2020年第16期87-90,共4页
为进一步探讨利用基因工程技术生产蜂毒肽的方法,根据大肠杆菌密码子偏好性、基因GC含量、合成蛋白加工需求等对蜂毒前溶血肽原基因序列进行改造,并利用人工化学合成方法完成改造后全基因的合成。构建蜂毒前溶血肽原与GST融合表达重组质... 为进一步探讨利用基因工程技术生产蜂毒肽的方法,根据大肠杆菌密码子偏好性、基因GC含量、合成蛋白加工需求等对蜂毒前溶血肽原基因序列进行改造,并利用人工化学合成方法完成改造后全基因的合成。构建蜂毒前溶血肽原与GST融合表达重组质粒pGEX-4T-1/PPMel,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后分别在20、37℃条件下经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并利用SDS-PAGE和Western Blot对产物进行检测。结果表明,表达体系成功表达了目的融合蛋白,在20℃条件下可获得可溶性表达产物,为进一步分离纯化目的蛋白及获得蜂毒肽提供了基础。 展开更多
关键词 蜂毒前溶血肽原 蜂毒肽 原核表达 融合蛋白
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