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稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系的建立及其意义 被引量:7
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作者 姬文晨 蒋婉婷 +4 位作者 马兴 李萌 邱裕生 李嘉 高玮蔓 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期393-398,共6页
目的建立稳定过表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经营养因子(NT-3)的脂肪干细胞系并探讨其意义。方法采用胶原酶消化联合差速贴壁法获取大鼠脂肪干细胞,向成骨方向诱导2周、4周后,行碱性磷酸酶染色和茜素红染色。采用Lenti-BDNF-GFP重... 目的建立稳定过表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经营养因子(NT-3)的脂肪干细胞系并探讨其意义。方法采用胶原酶消化联合差速贴壁法获取大鼠脂肪干细胞,向成骨方向诱导2周、4周后,行碱性磷酸酶染色和茜素红染色。采用Lenti-BDNF-GFP重组慢病毒液和Lenti-NT-3-RFP重组慢病毒液转染第3代脂肪干细胞,确定最佳感染复数值,按照最佳感染复数值感染脂肪干细胞,建立稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系。结果成功分离和培养的大鼠脂肪干细胞具有多向分化潜能,向成骨方向诱导后,碱性磷酸酶和茜素红染色呈阳性。Lenti-BDNF-GFP重组慢病毒液和Lenti-NT-3-RFP重组慢病毒液转染脂肪干细胞的最佳感染复数值为100,感染时间72 h,共转染组BDNF和NT-3在基因水平和蛋白水平均呈稳定高表达。结论成功建立稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系,这对脊髓损伤的治疗有重要意义,可以解决脂肪干细胞移植治疗脊髓损伤过程中神经因子分泌数量少和半衰期短等问题,为进一步研究脊髓损伤的修复机制提供了实验基础。 展开更多
关键词 BDNF NT-3 脂肪干细胞 脊髓损伤
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Wnt/β-catenin信号通路在脂肪干细胞向神经元分化过程中的作用
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作者 姬文晨 蒋婉婷 +1 位作者 冯娇 李萌 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期839-843,850,共6页
目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在脂肪干细胞向神经元分化过程中的作用。方法第3代脂肪干细胞分为3组:诱导组采用成神经诱导液;抑制组在成神经诱导液的基础上加入DDK-1;对照组采用普通培养液;分别培养10d,利用Real-time PCR和Western b... 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在脂肪干细胞向神经元分化过程中的作用。方法第3代脂肪干细胞分为3组:诱导组采用成神经诱导液;抑制组在成神经诱导液的基础上加入DDK-1;对照组采用普通培养液;分别培养10d,利用Real-time PCR和Western bolt检测各组NSE、β-catenin和GSK-3β的表达。结果诱导组NSE和β-catenin呈高表达,GSK-3β呈低表达;抑制组β-catenin低表达,GSK-3β高表达,NSE的表达虽然显著低于诱导组,但是高于对照组。结论脂肪干细胞向神经元分化的过程与激活Wnt信号通路有关,但Wnt信号通路不是调控ADSCs分化的唯一通路,分化过程可能受不同信号通路的共同调控。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 脂肪干细胞 神经元 分化
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