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高脂促进脂肪酸去饱和酶1基因启动子区DNA甲基化并下调其表达
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作者 肖倩倩 金元超 丁虎 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期145-151,共7页
目的探究高脂是否通过促进脂肪酸去饱和酶1(Fads1)基因启动子区甲基化抑制其表达。方法通过高脂饮食喂养大鼠构建高三酰甘油血症模型,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠体内Fads1表达水平;采用BSP克隆测序... 目的探究高脂是否通过促进脂肪酸去饱和酶1(Fads1)基因启动子区甲基化抑制其表达。方法通过高脂饮食喂养大鼠构建高三酰甘油血症模型,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠体内Fads1表达水平;采用BSP克隆测序法(bisulfite sequencing PCR)评估Fads1启动子区甲基化水平,并分析其与大鼠血浆三酰甘油含量之间的关系;体外培养大鼠肝细胞系BRL-3A,利用医用脂肪乳和5-氮杂胞苷(5-Aza,DNA甲基转移酶抑制剂)干预细胞,检测并分析Fads1启动子区甲基化水平与Fads1表达的相关性;构建Fads1启动子区报告基因质粒,利用M.SssI(CpG甲基转移酶)干预细胞后,检测Fads1启动子区转录活性。结果相较于对照组,高脂饮食组的大鼠血浆及脂肪乳干预组的BRL-3A细胞中三酰甘油含量显著升高,Fads1表达水平明显降低。Fads1启动子区CpG岛DNA甲基化水平在高脂饮食组大鼠肝脏组织中显著升高,与其血浆三酰甘油含量呈正相关。相比于对照组,5-Aza能上调BRL-3A细胞中Fads1 mRNA水平,而M.SssI可以使Fads1启动子区转录活性显著降低。结论高脂可促进Fads1启动子区甲基化修饰,显著抑制大鼠肝脏Fads1的表达。该研究揭示了Fads1基因表达的表观遗传调控模式。 展开更多
关键词 DNA甲基化 脂肪酸去饱和酶1 高三酰甘油血症
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