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营养缺乏对人肺癌细胞自噬的诱导作用 被引量:6
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作者 郭倩倩 刘志燕 +6 位作者 姜丽丽 胡婷华 李东繁 刘莹 刘梦洁 梁璇 南克俊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期627-630,共4页
目的观察营养缺乏对人非小细胞肺癌A549及95D细胞自噬活性的影响,建立A549及95D细胞的自噬模型。方法以EBSS缓冲液代替1640完全培养基,饥饿诱导处于对数生长期的A549及95D细胞0、1、2、3、4、5 h后,采用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法... 目的观察营养缺乏对人非小细胞肺癌A549及95D细胞自噬活性的影响,建立A549及95D细胞的自噬模型。方法以EBSS缓冲液代替1640完全培养基,饥饿诱导处于对数生长期的A549及95D细胞0、1、2、3、4、5 h后,采用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测细胞内自噬泡的形成,并采用Western blot方法检测自噬特异性基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和自噬相关基因Beclin1的蛋白表达水平。结果饥饿处理A549及95D细胞后,胞内MDC荧光颗粒逐渐增多,饥饿4 h达峰值;Beclin1的表达及LC3-II与LC3-I蛋白表达量的比值(LC3-II/LC3-I)随着饥饿时间的延长逐渐增加,分别在饥饿3 h和4 h达峰值。结论营养缺乏可以诱导增强A549及95D细胞的自噬活性,在饥饿4 h时细胞自噬水平达峰值;成功构建了营养缺乏诱导的人肺癌细胞自噬模型,为深入研究自噬在非小细胞肺癌发生发展过程中的作用及其机制奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 营养缺乏 自噬 LC3 BECLIN1
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尿激酶对胸膜成纤维细胞分泌转化生长因子-β1的影响 被引量:5
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作者 邵景韫 戚好文 +1 位作者 李建 刘安 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期569-571,共3页
目的探讨胸膜成纤维细胞(FB)分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)的作用及尿激酶(UK)对其分泌作用的影响。方法取健康雄性SD大鼠胸膜,培养、纯化并鉴定FB。设对照组和实验组。对照组分为2个亚组:对照0组由不含胸膜FB的24个样本组成,加入无血... 目的探讨胸膜成纤维细胞(FB)分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)的作用及尿激酶(UK)对其分泌作用的影响。方法取健康雄性SD大鼠胸膜,培养、纯化并鉴定FB。设对照组和实验组。对照组分为2个亚组:对照0组由不含胸膜FB的24个样本组成,加入无血清的RPMI 1640培养液;对照1组由24个胸膜FB样本组成,加入无血清的RPMI 1640培养液,培养24 h后,用酶联免疫吸附法测定上清液中TGF-β1的含量。实验组分为4个亚组,共24个样本,分别加入5 000(A组)1、0 000(B组)、20 000(C组)和30 000 IU/mL(D组)的UK,培养24 h后取上清液,测定TGF-β1的含量。结果胸膜FB分泌TGF-β1的量为(3035.655±394.975)ng/L;A、B、C、D组(5 000-30 000 IU/mLUK)对TGF-β1均有抑制作用,A组与B、C、D组之间比较有显著性差异(P<0.01),但B、C、D组之间比较无显著性差异(P>0.05)。对照0组未检测出TGF-β1。结论胸膜FB能分泌TGF-β1,UK能抑制其分泌。 展开更多
关键词 胸膜成纤维细胞 转化生长因子-Β1 尿激酶
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