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题名人胎盘谷胱甘肽S-转移酶的纯化和性质
被引量：5
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作者
李春海
张凯
谭子兴
陈毓兰
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机构
军事医学科学院基础医学研究所
西安医科大学代培研究生
军事医学科学院放射医学研究所
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出处
《生物化学杂志》
CSCD
1991年第2期135-141,共7页
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文摘
将人胎盘组织粗匀浆经105000×g超速离心后,用S-已基谷胱甘肽-琼脂糖-6B亲和层析一步纯化法获得电泳纯的人胎盘GST(简称GST-π)。其比活性较粗匀浆高194.7倍,回收率为50％。再经DE_(52)交换柱进一步纯化,用KCl浓度梯度洗脱后为单一锐峰,等电聚集电泳呈一条带,等电点(pI)为4.60。GST-π经TSKgel-G3000SW柱高效液相层析,也为单一对称锐峰,测得其分子量为45.2kD;在SDS-PAGE电泳也为单一区带,测得其亚基单位的分子量为22.5kD。GST-π氨基酸组成分析可检出十六种氨基酸,其中以谷氨酸、亮氨酸、丙氨酸、天冬氨酸及甘氨酸含量较高。 GST-π酶动力学研究证明GST-π以GST和CDNB为底物时km值分别为0.16mmol/L和0.55mmol/L,经测定表明,GST-π的最适作用pH值为7.5,在pH6.5—9的范围内较为稳定,体外GST-π在温度超过25℃对容易失活。以GST-π为抗原,得到兔抗人GST-π抗血清,其效价为1:32,与人肝GSTs不发生免疫交叉反应。
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关键词
胎盘
谷胱甘肽
S-转移酶
GSTS
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Keywords
Glutathione S- Transferase from Human Placenta (GST-π)
Affinity Chromatography
Amino Acid Composition
HPLC
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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