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TAT-BACEsp-GFP三融合基因慢病毒载体的构建与鉴定 被引量:1
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作者 王洪权 胡海涛 +3 位作者 靳辉 张海英 崔媛媛 董炜疆 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期7-10,共4页
目的构建穿膜肽基因和BACE底物肽融合基因与绿荧光融合基因慢病毒载体,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗奠定基础。方法利用非对称互补引物/模板法制备两端含有酶切位点的TAT-BACEsp融合基因的cDNA,使之克隆到带GFP慢病毒表达载体质... 目的构建穿膜肽基因和BACE底物肽融合基因与绿荧光融合基因慢病毒载体,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗奠定基础。方法利用非对称互补引物/模板法制备两端含有酶切位点的TAT-BACEsp融合基因的cDNA,使之克隆到带GFP慢病毒表达载体质粒FUGW中,经限制性酶切和测序鉴定重组载体。结果限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实获得的TAT-BACEsp产物与设计的完全吻合;TAT-BACEsp准确克隆入FUGW的多克隆位点。结论成功构建了TAT-BACEsp与GFP融合基因慢病毒载体,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗提供了适合的稳定转染的载体。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Β-分泌酶 穿膜肽 融合基因 慢病毒载体
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β-分泌酶底物肽对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用
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作者 崔媛媛 师社会 +1 位作者 胡海涛 董炜疆 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期299-301,共3页
目的探讨β-分泌酶底物肽(BACEsp)对阿尔茨海默病(AD)细胞模型保护作用的机制。方法用携带BAC-Esp基因的重组病毒pLXSN-BACEsp(pBV),作用经淀粉样前体蛋白(APP)转染SK-N-SH细胞建立的AD细胞模型。MTT法检测细胞的活性,免疫细胞化学方法... 目的探讨β-分泌酶底物肽(BACEsp)对阿尔茨海默病(AD)细胞模型保护作用的机制。方法用携带BAC-Esp基因的重组病毒pLXSN-BACEsp(pBV),作用经淀粉样前体蛋白(APP)转染SK-N-SH细胞建立的AD细胞模型。MTT法检测细胞的活性,免疫细胞化学方法观察BACEsp作用前、后细胞内APP表达量的变化。结果pBV预处理组细胞的活性、胞内APP的表达量显著高于AD模型组和pBV后处理组。结论BACEsp对由APP所造成的AD细胞模型的神经毒性具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β-分泌酶底物肽 AD细胞模型
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