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诱导多功能干细胞在青光眼治疗中的应用研究进展 被引量：6
1
作者 王霞 刘瀛 +1 位作者 刘旭 何媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第12期1185-1188,共4页
青光眼是一组以视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病,青光眼和其他视神经疾病导致的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)损伤和死亡是引起不可逆的视觉丢失或致盲的一个主要原因。诱导多功能干细胞衍生来的RGCs能够为青光... 青光眼是一组以视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病,青光眼和其他视神经疾病导致的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)损伤和死亡是引起不可逆的视觉丢失或致盲的一个主要原因。诱导多功能干细胞衍生来的RGCs能够为青光眼提供一种新的细胞治疗法。并且,这些细胞能够在人类RGCs的研究进展、基因调控、神经生物学研究中开拓一个新的视野。本文就诱导多功能干细胞衍生的不同类型细胞在青光眼细胞替代治疗等方面的最新研究和应用进展作一综述,以探讨其临床应用前景。 展开更多
关键词 青光眼 视网膜神经节细胞 干细胞 诱导多功能干细胞
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Cyclophilin D在氧化应激下人视网膜色素上皮细胞中的表达 被引量：2
2
作者 何媛 张纯涛 +3 位作者 刘瀛 王霞 刘旭 任媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第6期501-505,共5页
目的检测氧化应激下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Cyclophilin D的表达,初步探索RPE细胞氧化损伤保护新靶点。方法培养细胞系ARPE19及人原代RPE细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光... 目的检测氧化应激下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞内Cyclophilin D的表达,初步探索RPE细胞氧化损伤保护新靶点。方法培养细胞系ARPE19及人原代RPE细胞,相差显微镜下观察细胞形态,应用激光共聚焦显微镜免疫荧光法鉴定细胞。不同浓度H_2O_2(0μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、500μmol·L^(-1)、1 mmol·L^(-1))处理细胞24 h后,应用RT-PCR检测Cyclophilin D在细胞内的表达。随后预先在部分细胞中加入3μmol·L^(-1)环孢素A(cyclosporin A,Cs A)处理30 min后再加入不同浓度H_2O_2(80μmol·L^(-1)、160μmol·L^(-1)、320μmo·L^(-1))2 h,即Cs A+H_2O_2组,应用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)法检测细胞致死率,并与H_2O_2组的LDH释放量相比较。结果培养的ARPE19和人原代RPE细胞均表达RPE细胞特异性抗体RPE65。100μmol·L^(-1)H_2O_2处理细胞24 h后Cyclophilin D表达量明显升高,当H_2O_2浓度增加到500μmol·L^(-1)时,Cyclophilin D表达量降低,1 mmol·L^(-1)H_2O_2处理时,Cyclophilin D表达水平未见增加。在各H_2O_2组组间,LDH的释放量随着H_2O_2浓度的升高而增加;与H_2O_2组相比,Cs A+H_2O_2组LDH的释放水平明显降低(P<0.05)。结论氧化应激下RPE细胞内Cyclophilin D的表达升高,该蛋白表达的增加可能进一步导致氧化应激下细胞的死亡,Cs A可能成为RPE细胞保护的新策略。 展开更多
关键词 氧化应激 CYCLOPHILIN D 视网膜色素上皮细胞 环孢素A
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巩膜上静脉烙闭法建立大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响 被引量：2
3
作者 韩双羽 赵靖康 +5 位作者 刘慧峰 任媛 蒋琳燕 王霞 刘旭 何媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第7期620-624,共5页
目的观察巩膜上静脉烙闭法建立的大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响,为青光眼视神经损伤及保护机制提供研究基础。方法选取不同体质量SD大鼠40只,分为A组(150~200 g)、B组(>200~250 g)、C组(>250~300 g)、D组(>300~350 g)... 目的观察巩膜上静脉烙闭法建立的大鼠高眼压模型对视网膜微观结构的影响,为青光眼视神经损伤及保护机制提供研究基础。方法选取不同体质量SD大鼠40只,分为A组(150~200 g)、B组(>200~250 g)、C组(>250~300 g)、D组(>300~350 g),每组各10只,分别测量3 d白天及夜间基线眼压。随机选取SD大鼠(雌雄随机,250~300 g)40只,术前测量3 d基线眼压,以右眼为实验眼,烙闭实验眼3~4支巩膜上静脉,以左眼为对照眼,于术后即刻、1~7 d、14 d、21 d、28 d分别测量实验眼和对照眼眼压。于术前及术后28 d分别用光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)仪测量视网膜厚度。于术后28 d处死大鼠,行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色,计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)并测量视网膜厚度。结果不同体质量大鼠昼夜眼压比较差异均有统计学意义(均为P<0.001)。A组大鼠眼压较其他3组眼压低(均为P<0.05)。巩膜上静脉烙闭术后即刻实验眼眼压达到峰值,较对照眼高122%(P<0.001),之后缓慢下降,到术后14 d、21 d实验眼眼压较对照眼分别升高约41%、20%(均为P<0.001),到术后28 d实验眼与对照眼眼压差异无统计学意义(P>0.05)。OCT提示内层视网膜变薄(均为P<0.001)。HE染色切片结果提示RGCs数量减少,内、中、外层视网膜均变薄(均为P<0.05),且以内层变化最明显(P<0.001)。结论大鼠基线眼压昼夜存在差异,白天眼压较夜间眼压低,低体质量(150~200 g)大鼠眼压偏低。烙闭大鼠巩膜上静脉能维持3周的眼压升高,且能使视网膜变薄、RGCs数量减少,故巩膜上静脉烙闭法是建立大鼠高眼压模型的有效方法。 展开更多
关键词 动物模型 高眼压 巩膜上静脉 视网膜
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近视与糖尿病视网膜微血管病变和神经损伤相关性的研究进展 被引量：2
4
作者 龚小羽 石蕊 +4 位作者 刘丹丹 何媛 张坚 卢瑶 杨洁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第10期828-832,838,共6页
糖尿病视网膜病变(DR)是世界范围内工作年龄人群致盲的主要原因之一。高血糖诱发视网膜微环境改变,引起组织缺血缺氧及氧化应激,导致微血管损伤和神经变性是DR发生的主要机制。随着眼轴增长,近视度数增加,视网膜血管分支减少、血流密度... 糖尿病视网膜病变(DR)是世界范围内工作年龄人群致盲的主要原因之一。高血糖诱发视网膜微环境改变,引起组织缺血缺氧及氧化应激,导致微血管损伤和神经变性是DR发生的主要机制。随着眼轴增长,近视度数增加,视网膜血管分支减少、血流密度降低、视网膜萎缩变薄,组织缺血加重可能促进DR的进展。目前,近视相关的眼部生物学参数与DR微血管病变和神经损伤的关系仍不明确。为进一步对DR的防治提供临床指导,本文对近视相关的眼部生物学参数,如眼轴长度、前房深度、角膜曲率、轴率比等与DR微血管病变和神经损伤的关系进行全面综述。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 近视 眼轴 光学相干断层扫描血管成像
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前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型的观察 被引量：1
5
作者 赵靖康 韩双羽 +4 位作者 刘慧峰 任媛 王霞 刘旭 何媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第5期406-410,共5页
目的前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,观察卡波姆升眼压效果及对大鼠眼前节和视网膜的影响。方法随机选取30只SD大鼠,注射前3 d早晚测量基线眼压。右眼定为实验眼,左眼定为对照眼,右眼放出房水后将30μL的5 g·L^(-1)卡波姆混悬... 目的前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,观察卡波姆升眼压效果及对大鼠眼前节和视网膜的影响。方法随机选取30只SD大鼠,注射前3 d早晚测量基线眼压。右眼定为实验眼,左眼定为对照眼,右眼放出房水后将30μL的5 g·L^(-1)卡波姆混悬液注入前房,每日早10时、晚22时在大鼠清醒状态下测量眼压。每周进行双眼眼前节照相并对比。4周末处死26只大鼠(另4只持续观察眼压变化至注射后9周)并取双眼眼球行HE染色,观察实验眼与对照眼视网膜形态,对比视网膜厚度及房角形态。结果注射前,实验眼白天和夜间眼压分别为(11.10±0.90)mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)和(11.92±1.07)mmHg,对照眼分别为(11.22±1.07)mmHg和(11.76±1.08)mmHg;实验眼与对照眼相比,白天、夜间眼压差异均无统计学意义(均为P>0.05);白天与夜间眼压相比,实验眼、对照眼差异均有统计学意义(均为P<0.05)。卡波姆在前房中呈现出弥散型和沉积型两种存在方式,弥散型和沉积型大鼠1周内眼压分别为(17.83±3.54)mmHg和(13.00±1.55)mmHg,两者相比差异具有统计学意义(P<0.05)。注射后第1天至第19天,实验眼与对照眼白天眼压相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05);注射后第1天至第27天,实验眼与对照眼夜间眼压相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。实验眼视网膜形态发生改变,注射后4周视网膜厚度为(254.70±21.80)μm,与对照眼的(346.73±24.63)μm相比,差异有统计学意义(P=0.00)。实验眼前房充满卡波姆及虹膜的混合成分,紧贴角膜内皮并延伸至房角,堵塞小梁网结构,正常虹膜形态消失;对照眼房角形态正常。结论前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,可维持高眼压4周以上,昼夜眼压差异较为明显,夜间眼压较白天更高,4周后视网膜出现高眼压损伤后的表现。 展开更多
关键词 动物模型 高眼压 卡波姆 青光眼 大鼠
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不同年龄段人视网膜色素上皮细胞氧化应激过程中一氧化氮的水平分析
6
作者 吉智 刘旭 +2 位作者 王霞 何媛 闫菊娥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第1期45-48,共4页
目的探讨不同年龄段人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激过程中一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放水平以及色素上皮衍生因子(pigment epithelium-deriverd factor,PEDF)对不同年龄段人RPE细胞中NO释放的影响... 目的探讨不同年龄段人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激过程中一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放水平以及色素上皮衍生因子(pigment epithelium-deriverd factor,PEDF)对不同年龄段人RPE细胞中NO释放的影响。方法将原代RPE细胞(分别来源于9～20岁,50～55岁,60～70岁,> 70岁人群)用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,分为四组进行实验,分别为不加任何物质干预的阴性对照组,单独加300μmol·L^(-1) H_2O_2氧化损伤组,单独加250μg·L-1PEDF处理保护组以及同时加入250μg·L^(-1)PEDF+300μmol·L^(-1)H_2O_2的损伤保护组,处理12 h,随后用NO检测试剂盒对各组细胞NO水平进行检测。结果倒置相差显微镜观察培养的人原代RPE细胞内可见清晰透明的圆形细胞核以及双核,胞浆内含丰富黑色素颗粒。H_2O_2氧化损伤组各年龄段细胞相邻细胞发生粘连,细胞皱缩加重,死亡及悬浮细胞增多。PEDF处理保护组较H_2O_2氧化损伤组中的细胞胞质更加饱满,死亡细胞数量显著减少。随着年龄的增长,未作任何处理的50～55岁、60～70岁、> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是9～20岁年龄段的1. 37倍、1. 25倍、1. 62倍,差异均无统计学意义(均为P> 0. 05)。随着年龄的增加,H_2O_2氧化损伤组9～20岁、50～55岁、60～70岁,> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是阴性对照组的1. 35倍、1. 15倍、0. 98倍及1. 05倍,差异均无统计学意义(均为P> 0. 05),而PEDF处理保护组能够保护氧化损伤条件下不同年龄段人RPE细胞,但PEDF处理保护组9～20岁、50～55岁、60～70岁、> 70岁RPE细胞内NO的释放水平分别是阴性对照组的1. 17倍、1. 10倍、1. 04倍及0. 96倍,NO的释放量差异均无统计学意义(均为P> 0. 05)。结论在不同年龄段人RPE细胞中NO的两种完全相反作用可能处于一个动态平衡中,故NO释放水平无明显变化。PEDF对RPE细胞的保护作用不通过NO途径。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 一氧化氮 过氧化氢 色素上皮衍生因子
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线粒体靶向肽SS31及RIP抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)对H2O2诱导的氧化应激损伤ARPE-19细胞的保护作用
7
作者 许雲 陈泽君 +3 位作者 权卓娅 张瑞雪 何蓓蕾 何媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第7期607-611,共5页
目的探讨线粒体靶向肽SS31及RIP抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)对H2O2诱导的氧化应激损伤ARPE-19细胞的保护作用。方法选择400μmol·L-1 H2O2构建氧化应激损伤模型;根据MTT结果筛选出1μmol·L-1 SS31、40μmol·L-1 Nec-1作... 目的探讨线粒体靶向肽SS31及RIP抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)对H2O2诱导的氧化应激损伤ARPE-19细胞的保护作用。方法选择400μmol·L-1 H2O2构建氧化应激损伤模型;根据MTT结果筛选出1μmol·L-1 SS31、40μmol·L-1 Nec-1作为实验最佳浓度。将培养的细胞分为对照组、SS31+Nec-1组、H2O2组、SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组。利用MTT测定细胞存活率,双氯荧光素染色测定细胞活性氧自由基(ROS)水平,JC-1染色测定线粒体膜电位,AnnexinV/PI双染检测细胞PI阳性率,Western blot法检测RIP3蛋白表达水平。结果与对照组相比,H2O2组细胞存活率明显降低(P<0.05)。SS31+H2O2组、Nec-1+H2O2组细胞存活率高于H2O2组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。荧光显微镜下双氯荧光素染色结果显示,与H2O2组相比,SS31+H2O2组、Nec-1+H2O2组绿色荧光明显减弱,细胞内ROS含量明显减少。流式细胞仪结果显示与对照组相比,H2O2组线粒体膜电位降低的细胞比例升高,差异有统计学意义(P<0.05);与H2O2组相比,SS31+H2O2组、Nec-1+H2O2组线粒体膜电位降低的细胞比例降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。AnnexinV/PI双染色结果显示与对照组相比,H2O2组PI阳性率增加;与H2O2组相比,SS31+H2O2组、Nec-1+H2O2组PI阳性率均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组相比,H2O2组RIP3蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与H2O2组相比,SS31+H2O2组、Nec-1+H2O2组RIP3蛋白表达上调作用显著减弱,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论SS31及Nec-1对H2O2诱导的ARPE-19细胞氧化应激损伤具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 线粒体靶向肽SS31 氧化应激 ARPE-19细胞 程序性坏死
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程序性坏死与视网膜疾病相关性的研究进展
8
作者 许雲 何媛 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第3期284-289,共6页
程序性坏死是由分子受体相互作用蛋白激酶1、分子受体相互作用蛋白激酶3和混合系激酶区域蛋白介导的一种不同于凋亡及传统坏死的细胞程序性死亡方式,可由肿瘤坏死因子受体或模式识别受体调控启动。越来越多的研究发现,程序性坏死在视网... 程序性坏死是由分子受体相互作用蛋白激酶1、分子受体相互作用蛋白激酶3和混合系激酶区域蛋白介导的一种不同于凋亡及传统坏死的细胞程序性死亡方式,可由肿瘤坏死因子受体或模式识别受体调控启动。越来越多的研究发现,程序性坏死在视网膜疾病发生和发展中起关键作用。本文将对程序性坏死的分子机制及程序性坏死与视网膜疾病相关性的研究进展进行综述,以帮助寻找治疗视网膜疾病的新靶点。 展开更多
关键词 程序性坏死 视网膜疾病 视网膜色素变性
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