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阴茎体部筋膜解剖对先天性隐匿阴茎手术的临床意义
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作者 张鸿毅 冯改丰 +5 位作者 周海彬 孙萌航 王晨月 李华锋 崔洁 金磊 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期617-621,共5页
目的 解剖观察尸体阴茎筋膜结构,探索先天性隐匿阴茎病因,为预防术后阴茎回缩、包皮长期淋巴水肿及恢复阴茎正常外观提供理论依据。方法 解剖10例成年男性尸体阴茎,观察阴茎体部各层筋膜结构特点。将解剖发现应用于先天性隐匿阴茎手术,... 目的 解剖观察尸体阴茎筋膜结构,探索先天性隐匿阴茎病因,为预防术后阴茎回缩、包皮长期淋巴水肿及恢复阴茎正常外观提供理论依据。方法 解剖10例成年男性尸体阴茎,观察阴茎体部各层筋膜结构特点。将解剖发现应用于先天性隐匿阴茎手术,观察记录60例患者术中及术后随访情况。结果 阴茎浅筋膜具有浅、深两个亚层,浅筋膜浅层富含血管、神经及淋巴组织,保持其完整可有效避免术后包皮长期淋巴水肿;阴茎浅筋膜深层是乏血供膜状组织,与浅筋膜浅层及深筋膜间均有大量融合纤维,其作用是将浅筋膜浅层锚定于深筋膜。手术切除该层组织后,患者阴茎正常伸出,术后随访无阴茎回缩病例。阴茎深筋膜将阴茎背动脉、背深静脉及阴茎背神经固定于白膜,术中损伤可能导致严重并发症。阴茎-阴阜/阴囊皮肤交界线和耻骨下/阴囊中隔脂肪平面是重建阴茎耻骨角及阴茎阴囊角解剖标记。结论阴茎体部各层筋膜解剖结构及功能各不相同。熟悉解剖结构对预防术后阴茎回缩、包皮长期淋巴水肿,恢复阴茎正常外观有重要意义。 展开更多
关键词 隐匿阴茎 阴茎筋膜 应用解剖 亚层
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miR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制
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作者 李华锋 张鸿毅 +3 位作者 肖克兵 杨辉 李子峰 赵刚刚 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1311-1318,共8页
目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实... 目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达,Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染mi R-15b-5p mimic和OE-NC质粒后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达,Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达,LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p与FOXO1之间的靶向关系。结果倒置显微镜下观察显示,对照组细胞数量较多,细胞大多呈典型鹅卵石形态,铺路石状生长;H/R组大部分细胞收缩变圆,贴壁细胞数量明显减少。与对照组比较,H/R组miR-15b-5p表达水平明显降低,FOXO1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3'-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活力,降低细胞凋亡,抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比,H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞存活率降低,细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。 展开更多
关键词 miR-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞 缺氧/复氧 自噬
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敲低富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)促进激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡 被引量:4
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作者 张鸿毅 肖克兵 +2 位作者 赵刚刚 李华锋 崔洁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期419-424,共6页
目的研究富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)对激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡的影响。方法Western blot法检测前列腺癌DU145细胞和LNCaP细胞LRPPRC和雄激素受体(AR)蛋白水平;在DU145细胞中瞬转LRPPRC小干涉RNA(siLRPPRC);反转录... 目的研究富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)对激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡的影响。方法Western blot法检测前列腺癌DU145细胞和LNCaP细胞LRPPRC和雄激素受体(AR)蛋白水平;在DU145细胞中瞬转LRPPRC小干涉RNA(siLRPPRC);反转录PCR检测转染细胞LRPPRC mRNA水平;Western blot法检测LRPPRC蛋白水平;噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;Hoechst33258法和流式细胞术检测细胞凋亡率;荧光素酶法检测细胞ATP水平;Western blot法检测Bcl2、BAX和胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白水平。结果 LRPPRC在DU145细胞和LNCaP细胞均高表达,但DU145细胞不表达AR。敲低DU145细胞LRPPRC水平后,细胞存活率显著降低、细胞凋亡增加、 ATP水平下降、活化的caspase-3蛋白水平增高、Bcl2蛋白水平降低。结论敲低激素抵抗性前列腺癌DU145细胞LRPPRC促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC) 激素抵抗 线粒体 细胞凋亡
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LRPPRC对前列腺癌细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 张鸿毅 高继学 +4 位作者 汪峰 李义 贺晓龙 张培波 崔洁 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第7期847-851,共5页
目的:分析富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)和抗凋亡蛋白Bcl-2在前列腺癌组织的表达及LRPPRC对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法:应用免疫组化法检测198例前列腺癌组织中LRPPRC和Bcl-2的表达;分析LRPPRC和Bcl-2表达的相关性;分... 目的:分析富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)和抗凋亡蛋白Bcl-2在前列腺癌组织的表达及LRPPRC对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法:应用免疫组化法检测198例前列腺癌组织中LRPPRC和Bcl-2的表达;分析LRPPRC和Bcl-2表达的相关性;分析LRPPRC和Bcl-2表达与预后的关系;应用si RNA LRPPRC转染前列腺癌细胞下调LRPPRC水平,观察对细胞增殖、凋亡和Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响。结果:前列腺癌和前列腺增生组织LRPPRC的表达率分别为61.6%(122/198)和18.0%(18/100)(P<0.001);Bcl-2的表达率分别为49.5%(98/198)和45.0%(45/100)(P=0.539)。LRPPRC和Bcl-2的表达有显著正相关性(r=0.179,P=0.012)。LRPPRC和Bcl-2同时高表达的患者无疾病进展生存和总生存期均显著降低(P<0.001)。下调LRPPRC表达可抑制前列腺癌细胞增殖,促进前列腺癌细胞凋亡,降低Bcl-2蛋白的表达,使caspase-3活化增多,对Bax表达无显著影响。结论:前列腺癌组织LRPPRC表达显著增高;LRPPRC与抑制凋亡有关;LRPPRC在前列腺癌中的作用机制与抗凋亡蛋白Bcl-2有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 LRPPRC BCL-2 凋亡
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LRPPRC siRNA对前列腺癌细胞比卡鲁胺敏感性的影响 被引量:3
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作者 张鸿毅 赵刚刚 +2 位作者 李华锋 肖克兵 崔洁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第20期3341-3344,3350,共5页
目的研究富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)对前列腺癌细胞比卡鲁胺敏感性的影响及机制。方法在LNCaP和DU145细胞中瞬转siRNA LRPPRC,48 h后比卡鲁胺干预,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-blot法检测细... 目的研究富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)对前列腺癌细胞比卡鲁胺敏感性的影响及机制。方法在LNCaP和DU145细胞中瞬转siRNA LRPPRC,48 h后比卡鲁胺干预,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-blot法检测细胞Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果下调LRPPRC显著增强比卡鲁胺对LNCaP细胞的增殖抑制作用,促进凋亡,增强casepase-3活化水平;比卡鲁胺增强LNCaP细胞Bcl-2蛋白表达,下调LRPPRC降低Bcl-2蛋白表达。结论抑制激素依赖性前列腺癌细胞LRPPRC表达增强比卡鲁胺的敏感性,作用机制可能与降低抗凋亡蛋白Bcl-2有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 LRPPRC 比卡鲁胺 凋亡
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甲基化酶WTAP通过调控FOXO1的表达参与肾缺血再灌注损伤 被引量:1
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作者 赵刚刚 李华锋 +4 位作者 张鸿毅 肖克兵 杨辉 李子峰 傅崇德 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2035-2042,共8页
目的探讨m^(6)A甲基化酶WTAP在小鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤中的表达情况及对肾小管上皮细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法C57BL/6小鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R组,8只/组,建立急性缺血肾损伤模型;全自动生化分析仪... 目的探讨m^(6)A甲基化酶WTAP在小鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤中的表达情况及对肾小管上皮细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法C57BL/6小鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R组,8只/组,建立急性缺血肾损伤模型;全自动生化分析仪检测血中尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平评估肾功能;HE染色检测肾组织病理和形态改变;IHC检测肾组织中WTAP和FOXO1蛋白的表达;人肾小管上皮细胞(HK-2)分为Control、H/R、si-NC、si-WTAP、si-NC+H/R、si-WTAP+H/R组;Westernblot检测蛋白表达;qRT-PCR检测mRNA水平;CCK8检测细胞活性;TUNEL染色法检测细胞凋亡;试剂盒分别检测LDH的释放水平和Caspase-3活性;SRAMP(http://www.cuilab.cn/sramp/)网站预测FOXO1的m^(6)A修饰位点;RIP实验检测WTAP与FOXO1 mRNA的相互作用;MeRIP-qPCR检测m^(6)A修饰FOXO1的水平。结果与sham组相比,I/R组Scr、BUN水平显著升高(P<0.001),WTAPmRNA和蛋白水平都显著升高(P<0.001)。与正常HK-2细胞相比,H/R组细胞活性显著下降(P<0.01),LDH的释放水平显著升高(P<0.001),WTAP的mRNA和蛋白水平都显著升高(P<0.001)。抑制WTAP表达,上述细胞损伤减弱,FOXO1的mRNA和蛋白水平都显著下降(P<0.01)。WTAP与FOXO1 mRNA结合,抑制WTAP表达能够显著降低FOXO1 m^(6)A水平(P<0.001)。结论WTAP在体内外肾缺血再灌注损伤模型中表达均上调;体外抑制WTAP能够抵抗H/R诱导的凋亡损伤,这可能与其介导的FOXO1m^(6)A调控有关。 展开更多
关键词 WTAP m^(6)A FOXO1 肾缺血再灌注损伤 细胞凋亡
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