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槲皮素对宫颈癌HeLa细胞凋亡、迁移的影响 被引量:6
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作者 唐阳芳 陈蕊 张少华 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第7期609-615,共7页
目的探讨槲皮素对人宫颈癌HeLa细胞凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的机制。方法以不同浓度槲皮素(0,20,40,80μmol/L)处理生长状态良好的HeLa细胞48 h,用流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS... 目的探讨槲皮素对人宫颈癌HeLa细胞凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的机制。方法以不同浓度槲皮素(0,20,40,80μmol/L)处理生长状态良好的HeLa细胞48 h,用流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量,ELISA法检测细胞丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力。结果0,20,40,80μmol/L槲皮素组细胞凋亡率依次分别为(4.61±0.76)%,(9.47±0.54)%,(14.78±0.93)%,(23.34±1.96)%;四组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0,20,40,80μmol/L槲皮素组细胞迁移数依次分别为(104.67±5.03)个,(94.00±3.46)个,(75.00±9.54)个,(55.67±4.62)个;四组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0,20,40,80μmol/L槲皮素组ROS表达量依次分别为65402.00±886.87,76497.00±9648.64,95774.66±3440.82,106135.00±3724.35;四组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0,20,40,80μmol/L槲皮素组MDA含量依次分别为(1.85±0.06)nmol/mg,(2.52±0.22)nmol/mg,(3.50±0.24)nmol/mg,(4.19±0.43)nmol/mg;四组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0,20,40,80μmol/L槲皮素组T-SOD活力依次分别为(75.28±0.39)U/mg,(62.84±3.76)U/mg,(52.61±1.51)U/mg,(35.52±3.72)U/mg;四组之间两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论不同浓度槲皮素均可诱导HeLa细胞凋亡,抑制细胞迁移,增加细胞ROS及MDA含量,抑制T-SOD活力,且以上效应随着槲皮素浓度的增加而增强。槲皮素能发挥促HeLa细胞凋亡、抑制迁移的作用,可能与其增强细胞的氧化应激有关。 展开更多
关键词 槲皮素 宫颈癌 HELA细胞 细胞凋亡 细胞迁移 氧化应激
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c-FLIP蛋白与卵巢癌细胞对TRAIL耐药抵抗的关系 被引量:1
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作者 张少华 杨筱凤 +3 位作者 吴胜军 马淑云 刘凯歌 成碧萍 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期380-384,共5页
目的探索卵巢癌细胞对TRAIL诱导凋亡耐药抵抗的机制。方法分别选择12.5、25、50、100ng/mL的人重组TRAIL蛋白作用于卵巢癌细胞3AO和CAOV3,在18、24、48、72h时间点收集细胞,MTT法检测细胞的生长抑制率;原位末端标记法(TUNEL)观察凋亡细... 目的探索卵巢癌细胞对TRAIL诱导凋亡耐药抵抗的机制。方法分别选择12.5、25、50、100ng/mL的人重组TRAIL蛋白作用于卵巢癌细胞3AO和CAOV3,在18、24、48、72h时间点收集细胞,MTT法检测细胞的生长抑制率;原位末端标记法(TUNEL)观察凋亡细胞;流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白c-FLIP蛋白表达的水平。结果 TRAIL抑制了3AO和CAOV3细胞的生长增殖,24h3AO、CAOV3细胞的生长抑制率分别为28%、10%,并且TRAIL增多可诱导细胞凋亡,24h的3AO细胞凋亡率(8.5%)明显高于CAOV3(5.5%)。CAOV3细胞中c-FLIP蛋白的表达水平高于3AO细胞。结论 c-FLIP蛋白是卵巢癌细胞对TRAIL耐药抵抗的一种重要调控蛋白。 展开更多
关键词 TRAIL 卵巢癌细胞 细胞凋亡 c—FLIP蛋白 耐药抵抗
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TRAIL联合顺铂对卵巢癌细胞株CAOV3增殖抑制的实验研究 被引量:1
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作者 张少华 杨筱凤 +2 位作者 王莉 成碧萍 刘凯歌 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第5期350-353,441,共5页
目的研究TRAIL联合顺铂对卵巢癌细胞株CAOV3生长增殖和诱导凋亡的作用。方法倒置显微镜下观察对照组(不加干预)和实验组(TRAIL组、顺铂组、TRAIL和顺铂联合组)细胞的形态变化;MTT法检测各组CAOV3细胞生长增殖,计算细胞的生长增殖率;流... 目的研究TRAIL联合顺铂对卵巢癌细胞株CAOV3生长增殖和诱导凋亡的作用。方法倒置显微镜下观察对照组(不加干预)和实验组(TRAIL组、顺铂组、TRAIL和顺铂联合组)细胞的形态变化;MTT法检测各组CAOV3细胞生长增殖,计算细胞的生长增殖率;流式细胞仪(FCM)检测各组细胞凋亡率。结果实验各组对卵巢癌CAOV3细胞均有一定程度的增殖抑制和诱导凋亡作用,倒置显微镜下实验组细胞有形态的改变,TRAIL组作用CAOV3细胞24 h凋亡率是5.6%,顺铂组CAOV3细胞凋亡率是10.4%,TRAIL和顺铂联合组凋亡率是29.2%。两药联用组凋亡率显著高于单独用药组(P<0.05)。结论卵巢癌CAOV3细胞对TRAIL不敏感,顺铂能显著增加CAOV3细胞对TRAIL的敏感性。两药联合应用有协同作用。 展开更多
关键词 TRAIL 顺铂 卵巢肿瘤 细胞凋亡
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FADD基因对宫颈癌细胞凋亡和侵袭及NF-κB信号通路的影响
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作者 康媛 唐阳芳 +6 位作者 高雪 程柳 刘玉 马素叶 张玮 王金声 李佩 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第9期1183-1191,共9页
目的探讨Fas相关死亡结构域(FADD)基因对宫颈癌细胞凋亡和侵袭及NF-κB信号通路的影响。方法qRT-PCR检测60例宫颈鳞癌患者的癌组织及配对癌旁组织,人宫颈鳞癌细胞系SiHa及人宫颈上皮永生化细胞系H8中FADD mRNA水平。将SiHa细胞分为对照... 目的探讨Fas相关死亡结构域(FADD)基因对宫颈癌细胞凋亡和侵袭及NF-κB信号通路的影响。方法qRT-PCR检测60例宫颈鳞癌患者的癌组织及配对癌旁组织,人宫颈鳞癌细胞系SiHa及人宫颈上皮永生化细胞系H8中FADD mRNA水平。将SiHa细胞分为对照组、NC-sh组、FADD-sh组、NC-OE组和FADD-OE组。对照组SiHa细胞正常培养,不进行转染;NC-sh组、FADD-sh组、NC-OE组和FADD-OE组SiHa细胞分别使用Lipofectamine 2000试剂转染shRNA慢病毒阴性对照(NC-sh)、FADD shRNA慢病毒(FADD-sh)、过表达慢病毒阴性对照(NC-OE)和FADD过表达慢病毒(FADD-OE)。通过MTT法和集落形成实验检测细胞增殖。通过AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡。通过Transwell检测细胞侵袭。通过qRT-PCR检测FADD mRNA水平。通过Western blot检测cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、核因子(NF)-κB p65和p-NF-κB p65的表达水平。结果与配对癌旁组织相比,宫颈鳞癌组织中FADD mRNA水平降低(t=29.333,P<0.001)。与H8细胞相比,SiHa细胞中FADD mRNA水平降低(t=27.219,P<0.001)。与Ⅰ-Ⅱ期相比,Ⅲ-Ⅳ期患者癌组织中FADD mRNA水平降低(t=7.727,P<0.001)。与淋巴结未转移患者相比,淋巴结转移患者癌组织中FADD mRNA水平降低(t=7.618,P<0.001)。与NC-sh组比较,FADD-sh组细胞的FADD mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05),相对细胞活力和集落数量升高(P<0.05),细胞凋亡率、cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-8蛋白相对表达量降低(P<0.05),侵袭细胞数量、MMP2和MMP9蛋白相对表达量升高(P<0.05),NF-κB p65相对磷酸化水平升高(P<0.05)。与NC-OE组比较,FADD-OE组细胞的FADD mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05),相对细胞活力和集落数量降低(P<0.05),细胞凋亡率、cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-8蛋白相对表达量升高(P<0.05),侵袭细胞数量、MMP2和MMP9蛋白相对表达量降低(P<0.05),NF-κB p65相对磷酸化水平降低(P<0.05)。对照组、NC-sh组和NC-OE组上述指标均差异无统计学意义(P>0.05)。结论FADD在宫颈癌中下调,并且与TNM分期和淋巴结转移有关,宫颈癌中FADD的表达缺失可能通过激活NF-κB信号通路抑制癌细胞的凋亡并促进侵袭。 展开更多
关键词 宫颈癌 Fas相关死亡结构域 凋亡 侵袭 核因子-ΚB
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NEAT1对宫颈癌发生的影响及机制
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作者 唐阳芳 张少华 陈国平 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第10期1331-1337,共7页
目的探讨长链非编码RNA核内富集转录物1(NEAT1)对人宫颈癌细胞(HeLa)增殖、凋亡、侵袭和转移的影响,并探讨其与miR-34a-5p的关系。方法采用实时定量PCR检测NEAT1、miR-34a-5p在HeLa和EEC细胞中的表达。筛选siRNA-NEAT1干扰序列,将HeLa... 目的探讨长链非编码RNA核内富集转录物1(NEAT1)对人宫颈癌细胞(HeLa)增殖、凋亡、侵袭和转移的影响,并探讨其与miR-34a-5p的关系。方法采用实时定量PCR检测NEAT1、miR-34a-5p在HeLa和EEC细胞中的表达。筛选siRNA-NEAT1干扰序列,将HeLa细胞分为阴性对照组及siRNA-NEAT1转染组,采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell法及划痕实验检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡。最后利用双荧光素酶报告基因试验验证NEAT1与miR-34a-5p的靶向关系。结果与EEC细胞相比,HeLa细胞中NEAT1 mRNA表达增强(P<0.05),miR-34a-5p mRNA表达降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,siRNA-NEAT1转染组HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显降低(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。与NEAT1-WT+miR-NC组相比,NEAT1-WT+miR-34a-5p mimics组的荧光素酶表达降低(P<0.05);而与NEAT1-MUT+miR-NC组相比,NEAT1-MUT+miR-34a-5p mimics组的荧光素酶表达不变(P>0.05)。结论NEAT1靶向miR-34a-5p参与调控HeLa细胞功能,提示NEAT1通过调控miR-34a-5p参与宫颈癌的发生。 展开更多
关键词 长链非编码RNA核内富集转录物1 宫颈癌 miR-34a-5p HELA细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭
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FOXO3a对子宫内膜癌细胞生物学行为的调控作用和机制 被引量:1
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作者 李帆 唐阳芳 吴利英 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第8期1029-1037,共9页
目的 探究FOXO3a对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期生物学行为的调控作用和分子机制。方法 选择2019年3月至2021年12月陕西省人民医院妇科收治的子宫内膜癌确诊患者45例,收集患者的子宫内膜癌组织及与病灶邻近(距离>3 cm)的正常... 目的 探究FOXO3a对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期生物学行为的调控作用和分子机制。方法 选择2019年3月至2021年12月陕西省人民医院妇科收治的子宫内膜癌确诊患者45例,收集患者的子宫内膜癌组织及与病灶邻近(距离>3 cm)的正常子宫内膜组织,采用qRT-PCR检测FOXO3a基因的表达水平,采用免疫组织化学染色法和Western blot检测FOXO3a蛋白表达水平。正常培养人子宫内膜癌细胞系HEC-1B和人子宫内膜上皮细胞HEECs,采用qRT-PCR检测HEC-1B和HEECs细胞中FOXO3a的mRNA表达水平,采用Western blot检测FOXO3a蛋白表达水平。将HEC-1B细胞分为5组:对照组、si-NC组、si-FOXO3a组、pcDNA-NC组和pcDNA-FOXO3a组。采用Western blot检测Bim、FasL、TRAIL、p27、p21、c-myc、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达水平;采用MTT法和平板克隆形成实验检测细胞增殖水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布。结果 与正常子宫内膜组织比较,子宫内膜癌组织中FOXO3a的mRNA和蛋白表达水平均较低(P<0.01)。与HEECs细胞比较,HEC-1B细胞中FOXO3a的mRNA和蛋白表达水平均较低(P<0.01)。与对照组和si-NC组比较,si-FOXO3a组HEC-1B细胞增殖水平和细胞克隆数均升高(P<0.05),细胞处于G1期和G2/M期的比例均降低(P<0.05),S期细胞数量升高(P<0.05),细胞凋亡水平降低(P<0.05)。与对照组和pcDNA-NC组比较,pcDNA-FOXO3a组HEC-1B细胞增殖水平和细胞克隆数均降低(P<0.05),细胞处于G1期的比例升高(P<0.05),S期细胞数量降低(P<0.05),细胞凋亡水平升高(P<0.05)。与对照组和si-NC组比较,si-FOXO3a组HEC-1B细胞中Bim、FasL、TRAIL、p27和p21蛋白相对表达量均降低(P<0.05),c-myc、p-PI3K和p-AKT蛋白相对表达量均升高(P<0.05)。与对照组和pcDNA-NC组比较,pcDNA-FOXO3a组Bim、FasL、TRAIL、p27和p21蛋白相对表达量均升高(P<0.05),c-myc、p-PI3K和p-AKT蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。结论 FOXO3a通过负向调控抑制PI3K/AKT信号通路的激活,进而阻滞细胞周期、促进细胞凋亡和抑制细胞增殖,在子宫内膜癌HEC-1B细胞中发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 FOXO3A 子宫内膜癌 增殖 凋亡 细胞周期 PI3K/AKT信号通路
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