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叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展
被引量：
7
1
作者
巩智刚
周海鹏
+2 位作者
徐芳
韩晓玲
王玉华
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期288-294,共7页
农杆菌介导的核基因转化技术已普遍应用于作物改良和分子育种方面,而其不可避免的转基因沉默现象和生物安全问题是科研工作者和广大民众关注的焦点,进而成为基因工程技术广泛应用的主要限制因素。叶绿体遗传转化技术因具有核转化不可比...
农杆菌介导的核基因转化技术已普遍应用于作物改良和分子育种方面,而其不可避免的转基因沉默现象和生物安全问题是科研工作者和广大民众关注的焦点,进而成为基因工程技术广泛应用的主要限制因素。叶绿体遗传转化技术因具有核转化不可比拟的独特优势,成为植物基因工程发展的新方向和科研工作者研究的热点之一,通过该技术有望培育出真正生物安全的转基因作物新品种。本文围绕叶绿体转化的原理、方法、筛选标记及其应用等方面进行阐述,着重介绍其在作物改良方面研究的最新进展,并对存在问题及应用前景进行了展望。
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关键词
叶绿体转化
基因工程
作物改良
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职称材料
根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得
被引量：
4
2
作者
王玉华
韩晓玲
+1 位作者
郝建国
贾敬芬
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期766-772,共7页
为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"...
为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"的农杆菌遗传转化体系。结果表明,"早红"草莓适宜的转化条件是:外植体的最适预培养时间为2～3d,农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD6000.3～0.5,最适侵染时间为15min,最适共培养时间为3d。在此基础上,通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N-乙酰转移酶(AANAT)和羟吲哚-O-甲基转移酶(HIOMT)基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组,并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析,结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中。RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达。
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关键词
农杆菌
褪黑素
草莓
遗传转化
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职称材料
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
3
作者
王玉华
韩晓玲
+1 位作者
黄丛林
贾敬芬
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期11-17,共7页
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以...
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以叶绿体基因强启动子prrn驱动选择标记基因aadA及报告基因gfp构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3,′然后将表达盒克隆进菊苣叶绿体同源片段中,获得菊苣叶绿体定点整合表达载体pJAG,酶切分析证明所构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立菊苣的叶绿体转化体系奠定基础,为进一步通过叶绿体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣叶绿体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
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关键词
菊苣
叶绿体同源片段
多顺反子
定点整合表达载体
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职称材料
题名
叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展
被引量：
7
1
作者
巩智刚
周海鹏
徐芳
韩晓玲
王玉华
机构
西北大学生命
科学
学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室
西安力邦制药有限公司医药科学研究所
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期288-294,共7页
基金
国家自然科学基金(30900914)
陕西省教育厅专项(09JK777)
+1 种基金
陕西省教育厅重点实验室项目(11JS084)
西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金
文摘
农杆菌介导的核基因转化技术已普遍应用于作物改良和分子育种方面,而其不可避免的转基因沉默现象和生物安全问题是科研工作者和广大民众关注的焦点,进而成为基因工程技术广泛应用的主要限制因素。叶绿体遗传转化技术因具有核转化不可比拟的独特优势,成为植物基因工程发展的新方向和科研工作者研究的热点之一,通过该技术有望培育出真正生物安全的转基因作物新品种。本文围绕叶绿体转化的原理、方法、筛选标记及其应用等方面进行阐述,着重介绍其在作物改良方面研究的最新进展,并对存在问题及应用前景进行了展望。
关键词
叶绿体转化
基因工程
作物改良
Keywords
chloroplast transformation
crop improvement
genetic engineering
分类号
S336 [农业科学—作物遗传育种]
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得
被引量：
4
2
作者
王玉华
韩晓玲
郝建国
贾敬芬
机构
陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室
西安力邦制药有限公司医药科学研究所
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期766-772,共7页
基金
国家自然科学基金(30671082)
陕西省自然科学基金(2006C102)
西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金
文摘
为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"的农杆菌遗传转化体系。结果表明,"早红"草莓适宜的转化条件是:外植体的最适预培养时间为2～3d,农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD6000.3～0.5,最适侵染时间为15min,最适共培养时间为3d。在此基础上,通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N-乙酰转移酶(AANAT)和羟吲哚-O-甲基转移酶(HIOMT)基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组,并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析,结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中。RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达。
关键词
农杆菌
褪黑素
草莓
遗传转化
Keywords
Agrobacterium tumefaciens
melatonin
strawberry
genetic transformation
分类号
S668.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
3
作者
王玉华
韩晓玲
黄丛林
贾敬芬
机构
西北大学生命
科学
学院
北京市农林
科学
院北京农业生物技术
研究
中心
西安力邦制药有限公司医药科学研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期11-17,共7页
基金
国家自然科学基金(30900914)
陕西省教育厅专项(09JK777)
西北大学西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室开放基金
文摘
利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计合成引物,从菊苣叶绿体基因组中扩增包括rps7-rps12-trnV-16S rDNA基因在内的一段序列(GenBank登录号为GQ199478),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以叶绿体基因强启动子prrn驱动选择标记基因aadA及报告基因gfp构建多顺反子表达盒prrn-aadA-gfp-psbA-3,′然后将表达盒克隆进菊苣叶绿体同源片段中,获得菊苣叶绿体定点整合表达载体pJAG,酶切分析证明所构建的载体符合预期设计。该载体的构建为建立菊苣的叶绿体转化体系奠定基础,为进一步通过叶绿体基因工程手段将更多感兴趣的基因导入菊苣进行遗传改良,或以菊苣叶绿体作生物反应器生产动物口服疫苗等搭建技术平台。
关键词
菊苣
叶绿体同源片段
多顺反子
定点整合表达载体
Keywords
Chicory Chloroplast homologous fragments Multicistron Site-specific integration expression vector
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展
巩智刚
周海鹏
徐芳
韩晓玲
王玉华
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得
王玉华
韩晓玲
郝建国
贾敬芬
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
菊苣叶绿体同源片段的克隆及多顺反子定点整合表达载体的构建
王玉华
韩晓玲
黄丛林
贾敬芬
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010
0
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已选择
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