目的探讨miR-21在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义,以及如何通过调节程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)的表达影响786-O肾透明细胞癌细胞系的增殖和凋亡。方法通过分析The Cancer Genome Atlas(TCGA)肾透明细胞癌...目的探讨miR-21在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义,以及如何通过调节程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)的表达影响786-O肾透明细胞癌细胞系的增殖和凋亡。方法通过分析The Cancer Genome Atlas(TCGA)肾透明细胞癌数据库,比较癌组织及正常癌旁组织中miR-21的表达水平;分析miR-21表达水平在不同临床病理分期肾癌组织中的差异;采用Kaplan-Meier法和对数秩和检验(Log-rank test)研究miR-21表达水平和患者生存之间的关系;通过转染miR-21抑制性核苷酸(AS-miR-21)下调miR-21表达水平,采用MTT和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot测量PDCD4mRNA和蛋白质表达水平变化,采用双荧光素报告系统检测miR-21对PDCD4的直接调节。结果肾透明细胞癌组织中miR-21的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.000 1)。miR-21在Ⅲ期和Ⅳ期肾癌组织中表达水平显著高于Ⅰ期(P均<0.000 1),miR-21表达水平与临床病理分期呈正相关(r=0.262,P<0.000 1)。miR-21表达水平与T分期(r=0.250,P<0.000 1)与淋巴结转移阳性(N1)以及远处转移均呈正相关(P均<0.001)。生存分析显示miR-21高表达患者中位生存时间显著短于miR-21低表达者中位生存时间(Log-rank,P<0.001)。下调miR-21后,786-O细胞的增殖能力较对照显著降低(P<0.05),凋亡显著增加(P=0.005),PDCD4mRNA(P=0.002)和蛋白质表达水平显著增高。双荧光素报告实验显示在转染AS-miR-21的细胞内PDCD4相对荧光强度较对照细胞显著升高(P=0.003)。结论 miR-21在肾透明细胞癌组织中表达升高,与患者临床病理分期呈正相关,和患者生存呈负相关;miR-21可能通过调节PDCD4表达水平,参与调节肾透明细胞癌细胞的增殖和凋亡。展开更多
目的探讨脾切除小鼠肝脏和外周血免疫细胞的动态变化。方法32只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脾切除1周组、脾切除2周组、脾切除4周组,每组8只。于术后第1周、2周、4周检测小鼠肝脏质量和肝指数,用流式细胞术检测外周血和肝脏免疫细胞(...目的探讨脾切除小鼠肝脏和外周血免疫细胞的动态变化。方法32只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脾切除1周组、脾切除2周组、脾切除4周组,每组8只。于术后第1周、2周、4周检测小鼠肝脏质量和肝指数,用流式细胞术检测外周血和肝脏免疫细胞(CD3-CD19+B细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD11b+Ly6C hi单核细胞、CD11b+Ly6C med单核细胞、CD11b+Ly6G+粒细胞、CD11c+MHCⅡ+DC细胞、CD11b int F4/80 hi枯否细胞、CD11b hi F4/80 int巨噬细胞、CD11b hi F4/80 int Ly6C hi巨噬细胞、CD11b hi F4/80 int Ly6C low巨噬细胞)的比例。结果与假手术组相比,脾切除1周、2周、4周组小鼠肝脏质量与肝指数均无显著差异(P>0.05);脾切除1周组肝脏CD11b+Ly6G+粒细胞显著升高(t=-2.339,P<0.01);脾切除4周组肝脏CD3+CD8+T细胞显著升高(t=-5.092,P<0.01);脾切除1周、2周、4周组肝脏CD3+CD4+/CD3+CD8+均显著降低(t=2.785,2.45,-3.549,均P<0.05);脾切除1周组外周血CD11b+Ly6C hi单核细胞(t=-3.321,P<0.05)、CD11b+Ly6G+粒细胞(t=-2.845,P<0.05)显著升高;其余细胞均无显著变化。结论脾切除术后肝脏和外周血免疫细胞比例发生变化,提示脾脏在维持肝脏区域免疫稳态中具有重要作用。展开更多
文摘目的探讨脾切除小鼠肝脏和外周血免疫细胞的动态变化。方法32只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脾切除1周组、脾切除2周组、脾切除4周组,每组8只。于术后第1周、2周、4周检测小鼠肝脏质量和肝指数,用流式细胞术检测外周血和肝脏免疫细胞(CD3-CD19+B细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD11b+Ly6C hi单核细胞、CD11b+Ly6C med单核细胞、CD11b+Ly6G+粒细胞、CD11c+MHCⅡ+DC细胞、CD11b int F4/80 hi枯否细胞、CD11b hi F4/80 int巨噬细胞、CD11b hi F4/80 int Ly6C hi巨噬细胞、CD11b hi F4/80 int Ly6C low巨噬细胞)的比例。结果与假手术组相比,脾切除1周、2周、4周组小鼠肝脏质量与肝指数均无显著差异(P>0.05);脾切除1周组肝脏CD11b+Ly6G+粒细胞显著升高(t=-2.339,P<0.01);脾切除4周组肝脏CD3+CD8+T细胞显著升高(t=-5.092,P<0.01);脾切除1周、2周、4周组肝脏CD3+CD4+/CD3+CD8+均显著降低(t=2.785,2.45,-3.549,均P<0.05);脾切除1周组外周血CD11b+Ly6C hi单核细胞(t=-3.321,P<0.05)、CD11b+Ly6G+粒细胞(t=-2.845,P<0.05)显著升高;其余细胞均无显著变化。结论脾切除术后肝脏和外周血免疫细胞比例发生变化,提示脾脏在维持肝脏区域免疫稳态中具有重要作用。
