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人参皂苷20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化促进卵巢癌细胞中抑癌基因VHL的表达
被引量:
6
1
作者
王莉洁
韩曦
+5 位作者
郑霞
周园园
侯惠莲
陈葳
李旭
赵乐
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期100-106,共7页
目的明确人参皂苷20(S)-Rg3促进卵巢癌细胞抑癌基因von Hippel-Lindau(VHL)表达的机制。方法Real-time PCR和Western blotting检测20(S)-Rg3处理前后卵巢癌细胞SKOV3中的VHL、DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的mRNA和蛋白水平。Real...
目的明确人参皂苷20(S)-Rg3促进卵巢癌细胞抑癌基因von Hippel-Lindau(VHL)表达的机制。方法Real-time PCR和Western blotting检测20(S)-Rg3处理前后卵巢癌细胞SKOV3中的VHL、DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的mRNA和蛋白水平。Real-time PCR检测甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理卵巢癌细胞SKOV3前后VHL的mRNA水平变化。甲基化特异性PCR(MSP)检测20(S)-Rg3单纯处理组和20(S)-Rg3处理且过表达DNMT3A组的VHL基因启动子区的甲基化水平,并检测VHL的mRNA和蛋白表达水平。免疫组化检测课题组前期获得的20(S)-Rg3处理组及对照组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL和DNMT3A的蛋白表达。结果20(S)-Rg3处理后,卵巢癌细胞SKOV3中VHL的mRNA水平升高到阴性对照细胞的2倍以上,蛋白水平亦上调(P<0.05);DNMT3A的mRNA水平和蛋白水平均下降(P<0.05),DNMT3B的mRNA水平略有升高但蛋白水平无明显变化(P>0.05),DNMT1的mRNA和蛋白水平均无变化(P>0.05)。2μmol/L和5μmol/L的5-Aza-CdR处理后,SKOV3细胞的VHL mRNA水平升高到阴性对照细胞的3倍以上(P<0.05)。20(S)-Rg3使VHL基因启动子区的甲基化水平降低(P<0.05),在20(S)-Rg3处理的同时过表达DNMT3A,则VHL基因启动子甲基化水平再次升高,同时VHLmRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。免疫组织显示,相对于对照组,20(S)-Rg处理组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL的表达上调、DNMT3A的表达下调。结论20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化而促进卵巢癌细胞中VHL的表达。
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关键词
卵巢癌
人参皂苷
VHL
甲基化
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题名
人参皂苷20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化促进卵巢癌细胞中抑癌基因VHL的表达
被引量:
6
1
作者
王莉洁
韩曦
郑霞
周园园
侯惠莲
陈葳
李旭
赵乐
机构
西安交通大学
第一
附属
医院
转化
医学
中心
兰州
大学
第二
医院
妇科
陕西省
人民
医院
妇产科
浙江
大学
医学
院
附属
第二
医院
妇产科
西安交通大学
第一
附属
医院
妇产科
西安交通大学
第一
附属
医院
病理科
西安交通大学
第一
附属
医院
检验科
西安交通大学第一附属医院陕西省肿瘤精准医学重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期100-106,共7页
基金
国家自然科学基金(81702576)
陕西省自然科学基础研究计划项目(2020JM-376)。
文摘
目的明确人参皂苷20(S)-Rg3促进卵巢癌细胞抑癌基因von Hippel-Lindau(VHL)表达的机制。方法Real-time PCR和Western blotting检测20(S)-Rg3处理前后卵巢癌细胞SKOV3中的VHL、DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的mRNA和蛋白水平。Real-time PCR检测甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理卵巢癌细胞SKOV3前后VHL的mRNA水平变化。甲基化特异性PCR(MSP)检测20(S)-Rg3单纯处理组和20(S)-Rg3处理且过表达DNMT3A组的VHL基因启动子区的甲基化水平,并检测VHL的mRNA和蛋白表达水平。免疫组化检测课题组前期获得的20(S)-Rg3处理组及对照组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL和DNMT3A的蛋白表达。结果20(S)-Rg3处理后,卵巢癌细胞SKOV3中VHL的mRNA水平升高到阴性对照细胞的2倍以上,蛋白水平亦上调(P<0.05);DNMT3A的mRNA水平和蛋白水平均下降(P<0.05),DNMT3B的mRNA水平略有升高但蛋白水平无明显变化(P>0.05),DNMT1的mRNA和蛋白水平均无变化(P>0.05)。2μmol/L和5μmol/L的5-Aza-CdR处理后,SKOV3细胞的VHL mRNA水平升高到阴性对照细胞的3倍以上(P<0.05)。20(S)-Rg3使VHL基因启动子区的甲基化水平降低(P<0.05),在20(S)-Rg3处理的同时过表达DNMT3A,则VHL基因启动子甲基化水平再次升高,同时VHLmRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。免疫组织显示,相对于对照组,20(S)-Rg处理组的裸鼠皮下移植瘤组织中VHL的表达上调、DNMT3A的表达下调。结论20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化而促进卵巢癌细胞中VHL的表达。
关键词
卵巢癌
人参皂苷
VHL
甲基化
Keywords
ovarian cancer
ginsenoside
von Hippel-Lindau
methylation
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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出处
发文年
被引量
操作
1
人参皂苷20(S)-Rg3通过抑制DNMT3A介导的启动子甲基化促进卵巢癌细胞中抑癌基因VHL的表达
王莉洁
韩曦
郑霞
周园园
侯惠莲
陈葳
李旭
赵乐
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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