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医学学术型研究生培养的实践与探讨 被引量:9
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作者 曹浩哲 郑鹏生 《西北医学教育》 2016年第5期718-721,共4页
研究生教育作为教育体系的最高层次,承担着培养创新型人才的重任。为了保证创新型人才培养的教育质量,基于多年的积累及教学探索,我们强调医学学术型研究生培养应注重六大方面,即着力培养其国际视野、创新能力、科学思维、实验技能、表... 研究生教育作为教育体系的最高层次,承担着培养创新型人才的重任。为了保证创新型人才培养的教育质量,基于多年的积累及教学探索,我们强调医学学术型研究生培养应注重六大方面,即着力培养其国际视野、创新能力、科学思维、实验技能、表达水平和科学精神。以此培养具备综合科学素质的研究生,以适应当前国际化的竞争和国家对创新型人才的需要。 展开更多
关键词 研究生培养 医学人才 创新型人才
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PRDM4通过PI3K/AKT信号通路抑制宫颈癌细胞的侵袭和转移 被引量:4
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作者 杨文婷 徐瑞 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第9期1055-1062,共8页
目的研究PR-domain蛋白转录因子家族成员PRDM4在宫颈癌发生发展中的作用和临床意义。方法采用免疫组化法检测30例正常宫颈组织和30例宫颈癌组织中PRDM4的表达。在宫颈癌细胞系Si Ha和He La中外源性过表达和干扰PRDM4,采用Transwell小室... 目的研究PR-domain蛋白转录因子家族成员PRDM4在宫颈癌发生发展中的作用和临床意义。方法采用免疫组化法检测30例正常宫颈组织和30例宫颈癌组织中PRDM4的表达。在宫颈癌细胞系Si Ha和He La中外源性过表达和干扰PRDM4,采用Transwell小室实验检测其对宫颈癌细胞Si Ha和He La侵袭转移能力的影响。采用转录本测序结合基因富集方法分析PRDM4过表达Si Ha细胞和对照细胞的差异信号通路和基因表达,并通过real-time PCR进行验证。PI3K/AKT激动剂胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)处理PRDM4过表达的Si Ha和He La细胞后,检测细胞的侵袭转移能力。结果 PRDM4在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织,并且与宫颈癌患者的临床分期和淋巴结转移呈负相关(P<0.05);外源性的过表达/干扰PRDM4能够显著抑制宫颈癌细胞Si Ha和增强He La的体外侵袭和转移能力。转录本测序结合基因富集结果显示PRDM4过表达Si Ha细胞中PI3K/AKT信号通路及下游基因的表达受到抑制。利用PI3K/AKT激动剂显著促进了PRDM4过表达所导致的细胞侵袭和转移抑制作用。结论 PRDM4在宫颈癌中的表达下调,与患者的临床分期及预后相关,机制研究显示PRDM4通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制宫颈癌细胞的侵袭转移能力。 展开更多
关键词 PRDM4 宫颈癌 PI3K/AKT信号通路 转移侵袭
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shRNA干扰LGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响
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作者 陈庆 赵金燕 +1 位作者 卢晓宁 郑鹏生 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期206-209,共4页
目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰LGR5表达,构建LGR5干扰(shLGR5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shLGR5... 目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰LGR5表达,构建LGR5干扰(shLGR5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shLGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响;采用Western blot检测LGR5、β-catenin在HeLa细胞中的表达。结果成功构建了LGR5干扰的HeLa细胞系;与shCon组相比,shLGR5组细胞生长速度及克隆形成率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);shLGR5组与shCon组HeLa细胞对顺铂的耐药性差异亦具有统计学意义(P<0.01);且干扰LGR5抑制HeLa细胞中β-catenin蛋白的表达。结论 LGR5基因在HeLa细胞增殖及耐药性中有重要作用,且与Wnt/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 LGR5 细胞增殖 β-catenin 耐药性 HELA细胞 Western BLOT SHRNA
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CD49f维持宫颈癌干细胞特性的作用研究 被引量:1
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作者 冯倩 赵海鸥 +1 位作者 马红梅 杨文婷 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第10期1051-1058,共8页
目的研究整合素家族蛋白成员整合素α6,即CD49f在维持宫颈癌干细胞特性中的作用。方法采用生物信息学分析肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中CD49f转录本水平在宫颈癌... 目的研究整合素家族蛋白成员整合素α6,即CD49f在维持宫颈癌干细胞特性中的作用。方法采用生物信息学分析肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中CD49f转录本水平在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异。在宫颈癌细胞系HeLa,SiHa,C33A,HT-3和CaSki中,采用免疫细胞化学方法检测CD49f蛋白的表达。采用流式细胞计数仪检测和分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞并进行MTT实验检测细胞活力。检测两群细胞对化疗药顺铂和5-氟尿嘧啶的敏感性。体外肿瘤球形成实验和体外分化培养检测两群细胞的自我更新能力和分化能力的差异。结果数据库结果显示CD49f转录本水平在宫颈癌组织中的表达高于正常宫颈组织(P<0.05)。CD49f蛋白在宫颈癌5个细胞系中均有不同程度的表达且定位于细胞膜。流式细胞计数仪分选获得CD49f^high和CD49f^low的两群细胞,MTT结果显示两群细胞的体外增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),而肿瘤干细胞特性包括较强的肿瘤球形成能力、多项分化能力和对传统化疗药物的抵抗性,在CD49f^high的宫颈癌细胞中显著高于CD49f^low的细胞群,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD49f在宫颈癌组织中表达增高,能够显著促进宫颈癌干细胞的自我更新能力、抑制分化和化疗药敏感性等特性,提示其可能作为宫颈癌干细胞诱发的复发转移和不良预后的生物标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 肿瘤干细胞 CD49f
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外源性过表达SALL4B对SiHa细胞增殖及凋亡的影响
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作者 陈梅 郑鹏生 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第12期1295-1300,共6页
目的探讨SALL4B对SiHa细胞增殖和凋亡的影响及其可能分子机制。方法采用分子克隆技术构建SALL4B过表达质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo-SALL4B,分别将空质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo和SALL4B过表达质粒转染至SiHa细胞,通过G418筛选稳定过表达SA... 目的探讨SALL4B对SiHa细胞增殖和凋亡的影响及其可能分子机制。方法采用分子克隆技术构建SALL4B过表达质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo-SALL4B,分别将空质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo和SALL4B过表达质粒转染至SiHa细胞,通过G418筛选稳定过表达SALL4B的SiHa细胞株。转染空质粒的SiHa细胞命名为SiHa-GFP组,转染SALL4B过表达质粒的SiHa细胞命名为SiHa-SALL4B组。采用细胞计数和CCK-8实验观察SALL4B对SiHa细胞增殖能力的影响。应用流式细胞仪分析SiHa细胞中SALL4B对细胞周期和细胞凋亡的影响。应用Western blot检测在SiHa-SALL4B及SiHa-GFP细胞中β-catenin蛋白的表达情况。结果成功构建了SALL4B过表达的SiHa细胞株。与SiHa-GFP组相比,SiHa-SALL4B组细胞增殖能力和细胞活力均显著提高(P<0.05)。SiHa-SALL4B组细胞处于G0/G1期的细胞比例明显低于SiHa-GFP组(59.13%±3.59%vs 65.31%±2.88%,P<0.05),而处于S期的细胞比例明显高于SiHa-GFP组(31.15%±5.78%vs 23.07%±4.96%,P<0.01)。SiHa-SALL4B组凋亡细胞的比例显著低于SiHa-GFP组(8.06%±1.37%vs 13.77%±1.72%,P<0.01)。与SiHa-GFP组比较,SiHa-SALL4B组细胞中β-catenin蛋白的表达水平显著上调(P<0.01)。结论SALL4B基因在SiHa细胞的增殖和凋亡中发挥重要作用,该作用可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 SALL4B SIHA细胞 细胞增殖 细胞凋亡 Β-连环蛋白
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Msi1过表达对宫颈癌细胞增殖及干性维持的影响及其机制
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作者 刘宪 张燕茹 +2 位作者 陈茜 冯倩 崔南 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第11期1403-1410,共8页
目的探讨Msi1通过Wnt/β-catenin通路促进宫颈癌细胞增殖及干细胞样特性的作用机制。方法取制备成功的Msi1稳定过表达的SiHa、HeLa细胞株及相应的对照细胞株,其中Msi1稳定过表达的SiHa细胞及其对照细胞分别命名为SiHa-Msi1组、SiHa-EGFP... 目的探讨Msi1通过Wnt/β-catenin通路促进宫颈癌细胞增殖及干细胞样特性的作用机制。方法取制备成功的Msi1稳定过表达的SiHa、HeLa细胞株及相应的对照细胞株,其中Msi1稳定过表达的SiHa细胞及其对照细胞分别命名为SiHa-Msi1组、SiHa-EGFP组,Msi1稳定过表达的HeLa细胞及其对照细胞分别命名为HeLa-Msi1组、HeLa-EGFP组。采用裸鼠成瘤检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及其相应对照组体内肿瘤形成能力;细胞计数、软琼脂克隆形成实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的体外增殖能力;肿瘤细胞成球及连续成球实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的肿瘤干细胞样特性;在SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞中,采用报告基因分析(TOP-Flash/FOP-Flash)检测Wnt/β-catenin通路活性的变化,采用real-time PCR检测干细胞相关因子Klf4、Sox2、Oct4、Aldh的表达,采用Western blot检测Wnt信号通路中的β-catenin、SOX2蛋白的表达。结果与相应对照组相比,SiHa-Msi1组和HeLa-Msi1组体内形成肿瘤体积和质量显著增加(P<0.05),体外细胞增殖数量、软琼脂形成的单克隆数量均显著增加(P<0.05),肿瘤细胞连续成球后成球数目及直径均显著增加(P<0.05);SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组Wnt通路活性显著增加(P<0.05),干细胞相关因子Sox2、Oct4、Aldh的RNA表达水平显著上调(P<0.05),Wnt通路中的β-catenin和SOX2蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论Msi1过表达促进了宫颈癌细胞增殖并维持其干细胞样特性,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,上调SOX2在宫颈癌细胞中的表达,从而发挥了促进宫颈癌进展的作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 Msi1 肿瘤增殖 肿瘤干细胞样特性 WNT/Β-CATENIN通路
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ELF3在宫颈癌组织中的表达及对HeLa细胞增殖的影响
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作者 路彤 李姗 郑鹏生 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第8期941-949,共9页
目的探讨ELF3在宫颈癌组织中的表达及其对HeLa细胞增殖能力的影响。方法通过数据库资料挖掘、免疫组化染色(IHC)、Western blot及qRT-PCR分析ELF3在正常宫颈及宫颈癌组织中的表达情况,同时分析ELF3的表达量与患者预后的关系。采用分子... 目的探讨ELF3在宫颈癌组织中的表达及其对HeLa细胞增殖能力的影响。方法通过数据库资料挖掘、免疫组化染色(IHC)、Western blot及qRT-PCR分析ELF3在正常宫颈及宫颈癌组织中的表达情况,同时分析ELF3的表达量与患者预后的关系。采用分子克隆技术构建ELF3过表达质粒pIRES2-AcGFP1-Neo-ELF3。将ELF3过表达质粒与空质粒(pIRES2-AcGFP-Neo)分别转染至HeLa细胞中,并借助G418筛选转染成功的HeLa细胞。将转染了ELF3过表达质粒和空质粒的HeLa细胞分别命名为HeLa-ELF3组和HeLa-GFP组。采用细胞计数和CCK-8法检测ELF3对HeLa细胞增殖能力的影响。采用流式细胞术分析ELF3对HeLa细胞周期的影响。利用GEPIA数据平台初步分析ELF3与细胞周期相关基因CDK2、MCM2、CREPT表达水平的相关性。结果与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中ELF3 mRNA及蛋白的表达量均显著上调(P<0.05)。并且,ELF3 mRNA表达水平与患者的无复发生存期(RFS)正相关(P=0.019)。成功构建了稳定过表达ELF3的HeLa细胞株。与HeLa-GFP组相比,HeLa-ELF3组细胞增殖能力和细胞活力均显著提高(P<0.05)。HeLa-ELF3组处于G0/G1期的细胞比例低于HeLa-GFP组(P<0.05),而处于S期及G2/M期的细胞比例显著高于HeLa-GFP组(P<0.05)。此外,ELF3与细胞周期相关分子CDK2、MCM2及CREPT分子的表达量正相关(r>0,P<0.05)。结论ELF3在宫颈癌组织中高表达,其表达量与宫颈癌患者的无复发生存期正相关。过表达ELF3加速HeLa细胞G0/G1期向S期转变,促进HeLa细胞增殖,该作用可能与CDK2、MCM2、CREPT等分子的表达上调有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA细胞 ELF3 细胞增殖 细胞周期
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