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重组PCR——一种快速体外基因重组技术
被引量:
9
1
作者
张梅
司履生
《西安医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期270-271,275,共3页
重组PCR是一种用于体外进行基因重组的简单、高效、快速技术 ,在基因重组过程中 ,不受载体和待连接DNA片段内部自身酶切位点的制约 ,连接时不依赖于限制性内切酶和连接酶 ,具有传统的DNA重组技术无法比拟的优势。
关键词
重组PCR
体外基因重组
重叠引物
DNA聚合酶
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职称材料
重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达
被引量:
1
2
作者
张梅
司履生
+1 位作者
王一理
耿宜苹
《西安医科大学学报》
CSCD
2000年第4期297-302,共6页
克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法 从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1...
克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法 从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1 2 p40和 p35亚单位编码序列的 c DNA,运用重组 PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头 ( Gly4 Ser) 3 DNA序列进行体外基因重组 ,构建 rhsc IL- 1 2融合基因 ,将其插入 pc DNA3.1 ( + )真核表达载体 ,经脂质体转染 COS7细胞进行表达 ,Western blot进行分析。结果 所克隆的 h IL- 1 2 p40、p35c DNA序列和构建的 rhsc IL - 1 2融合基因 DNA序列均经测序得以证实 ,融合基因可在 COS7中表达其产物 rhsc IL- 1 2融合蛋白 ,其分子量为 70 KD,可与鼠抗人 IL - 1 2 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论 本研究结果为进一步探讨 rhsc IL- 1 2融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础 ,也为 rhsc IL- 1
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关键词
重组人单链白细胞介素12
融合基因
真核表达
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职称材料
题名
重组PCR——一种快速体外基因重组技术
被引量:
9
1
作者
张梅
司履生
机构
西安交通大学第一医院血液病研究室
西安交通大学
基础医学院免疫
病
理
研究室
出处
《西安医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期270-271,275,共3页
文摘
重组PCR是一种用于体外进行基因重组的简单、高效、快速技术 ,在基因重组过程中 ,不受载体和待连接DNA片段内部自身酶切位点的制约 ,连接时不依赖于限制性内切酶和连接酶 ,具有传统的DNA重组技术无法比拟的优势。
关键词
重组PCR
体外基因重组
重叠引物
DNA聚合酶
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达
被引量:
1
2
作者
张梅
司履生
王一理
耿宜苹
机构
西安交通大学第一医院血液病研究室
西安交通大学
免疫
病
理
研究室
出处
《西安医科大学学报》
CSCD
2000年第4期297-302,共6页
基金
陕西省自然科学基金! ( 99SM4 9)
文摘
克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法 从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1 2 p40和 p35亚单位编码序列的 c DNA,运用重组 PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头 ( Gly4 Ser) 3 DNA序列进行体外基因重组 ,构建 rhsc IL- 1 2融合基因 ,将其插入 pc DNA3.1 ( + )真核表达载体 ,经脂质体转染 COS7细胞进行表达 ,Western blot进行分析。结果 所克隆的 h IL- 1 2 p40、p35c DNA序列和构建的 rhsc IL - 1 2融合基因 DNA序列均经测序得以证实 ,融合基因可在 COS7中表达其产物 rhsc IL- 1 2融合蛋白 ,其分子量为 70 KD,可与鼠抗人 IL - 1 2 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论 本研究结果为进一步探讨 rhsc IL- 1 2融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础 ,也为 rhsc IL- 1
关键词
重组人单链白细胞介素12
融合基因
真核表达
Keywords
human interleukin 12(hIL 12)
recombinant human single chain interleukin 12
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组PCR——一种快速体外基因重组技术
张梅
司履生
《西安医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
9
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职称材料
2
重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达
张梅
司履生
王一理
耿宜苹
《西安医科大学学报》
CSCD
2000
1
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职称材料
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