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体外心肌细胞牵张刺激装置的建立
被引量：
3
1
作者
席雨涛
马爱群
+2 位作者
耿涛
白晓君
吴格如
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第11期2158-2160,共3页
目的 :设计一套实用的体外培养心肌细胞牵张刺激模拟装置 ,为探讨心肌细胞机械刺激转导机制提供研究方法。方法 :应用自行设计制作的离心力牵张装置模型和传统膜牵张模型刺激培养的乳鼠心肌细胞 ,通过细胞体积、数量 ,培养液中血管紧张...
目的 :设计一套实用的体外培养心肌细胞牵张刺激模拟装置 ,为探讨心肌细胞机械刺激转导机制提供研究方法。方法 :应用自行设计制作的离心力牵张装置模型和传统膜牵张模型刺激培养的乳鼠心肌细胞 ,通过细胞体积、数量 ,培养液中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )水平和乳酸脱氢酶活性和同位素标记亮氨酸掺入法评价心肌细胞受损和肥大情况。结果 :离心力牵张装置提供 180r/min的离心力和传统的 2 0 %的膜牵张力均可使培养心肌细胞体积明显增大 ,但对培养的心肌细胞的数量无显著影响。牵张刺激对培养液中乳酸脱氢酶活性影响无显著差异。 [3 H]-亮氨酸掺入在离心力牵张组 (12h为 12 95 17± 5 1 19,2 4h为 14 4 7 5 0± 35 96 ,P <0 0 5 )和膜牵张组(12h为 2 0 15 5 0± 79 0 6 ,2 4h为 1870 0 0± 4 5 91,P <0 0 1)均显著高于对照组 (12h为 112 2 6 7± 5 1 6 3,2 4h为12 10 6 7± 90 92 )。AngⅡ在离心力牵张组 (12h为 2 2 6± 3 2ng·g-1、2 4h为 5 2 7± 3 4ng·g-1)和膜牵张组 (12h为2 8 3± 6 3ng·g-1、2 4h为 6 5 1± 6 4ng·g-1)均明显高于同期未牵张组 (12h为 17 7± 1 9ng·g-1、2 4h为 37 8± 2 3ng·g-1)。结论 :离心力牵张装置可刺激培养心肌细胞发生肥大反应 。
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关键词
牵张
心肌
血管紧张素Ⅱ
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职称材料
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记
被引量：
10
2
作者
王亭忠
马爱群
+2 位作者
蒋文慧
徐正云
席雨涛
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期431-434,共4页
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP...
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP-N3与Lipofectamine 2000不同浓度比例转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率.结果①原代MSCs多呈纺锤形或梭形,有聚集生长的倾向,多3～5个细胞成为一个集落.传代后,细胞变为形态均一的排列有序的成纤维细胞样,长梭形,胞浆突起较少,胞体轮廓不甚清晰,胞体也相对较大;②GFP转染后24 h即可见绿色荧光蛋白表达,72 h表达最强,此后逐渐减弱,到4周时仍可见少量表达;③转染效率与质粒和脂质体的浓度比例有关,1:2到1:3最高.结论利用Percoll密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;GFP转染是一种较好的MSCs标记方法.
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关键词
大鼠
骨髓间充质干细胞
培养
绿色荧光蛋白
转染
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职称材料
题名
体外心肌细胞牵张刺激装置的建立
被引量：
3
1
作者
席雨涛
马爱群
耿涛
白晓君
吴格如
机构
西安交通大学第一医院心内科教育部环境与疾病相关基因重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第11期2158-2160,共3页
文摘
目的 :设计一套实用的体外培养心肌细胞牵张刺激模拟装置 ,为探讨心肌细胞机械刺激转导机制提供研究方法。方法 :应用自行设计制作的离心力牵张装置模型和传统膜牵张模型刺激培养的乳鼠心肌细胞 ,通过细胞体积、数量 ,培养液中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )水平和乳酸脱氢酶活性和同位素标记亮氨酸掺入法评价心肌细胞受损和肥大情况。结果 :离心力牵张装置提供 180r/min的离心力和传统的 2 0 %的膜牵张力均可使培养心肌细胞体积明显增大 ,但对培养的心肌细胞的数量无显著影响。牵张刺激对培养液中乳酸脱氢酶活性影响无显著差异。 [3 H]-亮氨酸掺入在离心力牵张组 (12h为 12 95 17± 5 1 19,2 4h为 14 4 7 5 0± 35 96 ,P <0 0 5 )和膜牵张组(12h为 2 0 15 5 0± 79 0 6 ,2 4h为 1870 0 0± 4 5 91,P <0 0 1)均显著高于对照组 (12h为 112 2 6 7± 5 1 6 3,2 4h为12 10 6 7± 90 92 )。AngⅡ在离心力牵张组 (12h为 2 2 6± 3 2ng·g-1、2 4h为 5 2 7± 3 4ng·g-1)和膜牵张组 (12h为2 8 3± 6 3ng·g-1、2 4h为 6 5 1± 6 4ng·g-1)均明显高于同期未牵张组 (12h为 17 7± 1 9ng·g-1、2 4h为 37 8± 2 3ng·g-1)。结论 :离心力牵张装置可刺激培养心肌细胞发生肥大反应 。
关键词
牵张
心肌
血管紧张素Ⅱ
Keywords
Stretch
Myocardium
Angiotensin Ⅱ
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记
被引量：
10
2
作者
王亭忠
马爱群
蒋文慧
徐正云
席雨涛
机构
西安交通大学第一医院心内科教育部环境与疾病相关基因重点实验室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期431-434,共4页
文摘
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP-N3与Lipofectamine 2000不同浓度比例转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率.结果①原代MSCs多呈纺锤形或梭形,有聚集生长的倾向,多3～5个细胞成为一个集落.传代后,细胞变为形态均一的排列有序的成纤维细胞样,长梭形,胞浆突起较少,胞体轮廓不甚清晰,胞体也相对较大;②GFP转染后24 h即可见绿色荧光蛋白表达,72 h表达最强,此后逐渐减弱,到4周时仍可见少量表达;③转染效率与质粒和脂质体的浓度比例有关,1:2到1:3最高.结论利用Percoll密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;GFP转染是一种较好的MSCs标记方法.
关键词
大鼠
骨髓间充质干细胞
培养
绿色荧光蛋白
转染
Keywords
rat
mesenchymal stem cell
culture
green fluorescent protein
transfection
分类号
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体外心肌细胞牵张刺激装置的建立
席雨涛
马爱群
耿涛
白晓君
吴格如
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记
王亭忠
马爱群
蒋文慧
徐正云
席雨涛
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
10
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