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宫颈癌相关新癌基因hWAPL的原核表达和免疫原性分析
被引量:
1
1
作者
曹春霞
马军
+3 位作者
寻萌
薛欣
陈萍
楚雍烈
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期562-564,共3页
目的:构建hWAPL原核表达载体,诱导hWAPL蛋白表达并制备其多克隆抗体。方法:RT-PCR技术扩增hWAPL cDNA片段,连接到pMD18-T载体,测序正确后亚克隆入原核表达载体pET28a并转化BL21菌株,用SDS-PAGE电泳鉴定重组菌的诱导表达情况,制备hWAPL...
目的:构建hWAPL原核表达载体,诱导hWAPL蛋白表达并制备其多克隆抗体。方法:RT-PCR技术扩增hWAPL cDNA片段,连接到pMD18-T载体,测序正确后亚克隆入原核表达载体pET28a并转化BL21菌株,用SDS-PAGE电泳鉴定重组菌的诱导表达情况,制备hWAPL蛋白并免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定其抗体效价,Western blot鉴定表达hWAPL蛋白的免疫原性。结果:①经PCR、双酶切鉴定和测序,证实hWAPL正确插入pMD18-T载体,序列正确。②经IPTG诱导的pET28a-hWAPL重组菌表达出相对分子质量(Mr)约为25000的蛋白,与预期蛋白Mr相符。③免疫小鼠后测得的平均抗体效价为1∶3200。④Western blot结果显示Mr约25000处有反应蛋白条带。结论:pET28a载体能够表达hWAPL蛋白,表达蛋白具有良好的免疫原性,其免疫小鼠后获得的多克隆抗体具有高效价和特异性。
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关键词
hWAPL
原核表达
多克隆抗体
宫颈癌
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职称材料
题名
宫颈癌相关新癌基因hWAPL的原核表达和免疫原性分析
被引量:
1
1
作者
曹春霞
马军
寻萌
薛欣
陈萍
楚雍烈
机构
西安交通大学
医学院病原
生物
教研室
郑州
大学
第二附属医院消化病研究所
西安交通大学生物遗传教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期562-564,共3页
基金
陕西省科学技术研究发展计划资助项目(2003k10-G49)
文摘
目的:构建hWAPL原核表达载体,诱导hWAPL蛋白表达并制备其多克隆抗体。方法:RT-PCR技术扩增hWAPL cDNA片段,连接到pMD18-T载体,测序正确后亚克隆入原核表达载体pET28a并转化BL21菌株,用SDS-PAGE电泳鉴定重组菌的诱导表达情况,制备hWAPL蛋白并免疫BALB/c小鼠,ELISA法测定其抗体效价,Western blot鉴定表达hWAPL蛋白的免疫原性。结果:①经PCR、双酶切鉴定和测序,证实hWAPL正确插入pMD18-T载体,序列正确。②经IPTG诱导的pET28a-hWAPL重组菌表达出相对分子质量(Mr)约为25000的蛋白,与预期蛋白Mr相符。③免疫小鼠后测得的平均抗体效价为1∶3200。④Western blot结果显示Mr约25000处有反应蛋白条带。结论:pET28a载体能够表达hWAPL蛋白,表达蛋白具有良好的免疫原性,其免疫小鼠后获得的多克隆抗体具有高效价和特异性。
关键词
hWAPL
原核表达
多克隆抗体
宫颈癌
Keywords
hWAPL
prokaryotic expression
polyclonal antibody
cervical cancer
分类号
R392.7 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
宫颈癌相关新癌基因hWAPL的原核表达和免疫原性分析
曹春霞
马军
寻萌
薛欣
陈萍
楚雍烈
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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