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KLK4介导氟诱发成釉细胞凋亡的作用机制
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作者 刘晓静 高美丽 阮建平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期918-926,共9页
目的探讨氟对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的氟化钠(NaF)处理ALC细胞24 h、48 h,qRT-PCR和Western blotting检测KLK4 mRNA及蛋白表达;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术... 目的探讨氟对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的氟化钠(NaF)处理ALC细胞24 h、48 h,qRT-PCR和Western blotting检测KLK4 mRNA及蛋白表达;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术、Hoechst 33342染色检测氟对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、真核生物起始因子2a(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)、激活转录因子-4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的蛋白表达。结果1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,与对照组(0 mmol/L NaF)相比,KLK4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,漂浮细胞增加,其中2.0 mmol/L NaF组细胞相对活力降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。NaF处理细胞24 h后,与对照组相比,0.1、1.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P<0.05),2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P<0.05);NaF处理细胞48 h后,与对照组相比,2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,G2/M期细胞比例降低(P<0.05)。随着NaF处理浓度的升高,亮蓝色的细胞数量逐渐增多,细胞凋亡率也依次升高,除了0.1 mmol/L NaF 24 h处理组外,其余氟浓度处理组细胞凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h后,GRP78和p-eIF2α蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组相比,1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05),0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞48 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。结论NaF可能通过上调GRP78表达,激活eIF2α/ATF4/CHOP信号通路,从而引起KLK4表达抑制,诱发ALC细胞生长异常。 展开更多
关键词 成釉细胞 激肽释放酶4(KLK4) 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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TiF4溶液对脱矿牙釉质再矿化作用的实验研究
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作者 汪鹏 高江红 +2 位作者 梁爽 高震 阮建平 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期526-529,共4页
目的:研究不同浓度四氟化钛(TiF_4)溶液对脱矿牙釉质的再矿化作用。方法:将人第三磨牙切割打磨,制备3 mm×2 mm×1.5 mm的牙釉质块60个,建立早期人工龋损模型后随机分6组:1%、2%、3%、4%TiF_4溶液组、1.356%Na F阳性对照组和双... 目的:研究不同浓度四氟化钛(TiF_4)溶液对脱矿牙釉质的再矿化作用。方法:将人第三磨牙切割打磨,制备3 mm×2 mm×1.5 mm的牙釉质块60个,建立早期人工龋损模型后随机分6组:1%、2%、3%、4%TiF_4溶液组、1.356%Na F阳性对照组和双蒸水DDW阴性对照组。各组试件每天处理1次后浸泡于再矿化液中,14 d后进行micro-CT扫描和表面显微硬度(SMH)测试。结果:2%TiF_4处理组脱矿深度变浅,显著优于3%TiF_4组和4%TiF_4组(P<0.05);2%TiF_4组脱矿深度优于Na F阳性对照组,差异无显著性(P>0.05);2%TiF_4组处理后表面硬度与阳性对照Na F组相当(P>0.05),显著高于其他组(P<0.05)。结论:2%TiF_4溶液对脱矿牙釉质再矿化作用优于1%、3%和4%TiF_4。 展开更多
关键词 釉质 再矿化 四氟化钛(TiF4)
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低钙对SD大鼠原代成釉细胞生物学特性影响的体外实验研究 被引量:1
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作者 王永刚 阮建平 +3 位作者 周静 田剑刚 黄瑞哲 高江红 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期257-261,266,共6页
目的探索低水平的钙对成釉细胞生物学特性的影响。方法用标准DMEM培养基培养大鼠原代成釉细胞,培养5 d后,RT-PCR及免疫组化对其进行鉴定,然后分别加入含Ca^(2+)0、0.6、1.2 mmoL/L及100 mL/L胎牛血清的不同钙浓度DMEM培养基。48 h后倒... 目的探索低水平的钙对成釉细胞生物学特性的影响。方法用标准DMEM培养基培养大鼠原代成釉细胞,培养5 d后,RT-PCR及免疫组化对其进行鉴定,然后分别加入含Ca^(2+)0、0.6、1.2 mmoL/L及100 mL/L胎牛血清的不同钙浓度DMEM培养基。48 h后倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT观察细胞增殖活力,Annexin V-PI观察细胞凋亡情况,Real time-PCR检测细胞釉原蛋白及激肽释放酶-4(KLK4)的mRNA表达水平。结果标准DMEM培养基培养5 d后,细胞呈铺路样排列,RT-PCR显示细胞釉原蛋白、KLK4均有表达;免疫组化显示多数细胞釉原蛋白染色阳性。不同浓度钙干预48 h后,1.2 mmoL/L Ca^(2+)组部分细胞较0 mmoL/L和0.6 mmoL/L Ca^(2+)组胞核密度高、透光性差、高柱状细胞数目多。随着培养基中Ca^(2+)浓度降低,MTT显示成釉细胞增殖活性增加(P<0.01);Annexin V-PI检测显示凋亡细胞百分率降低,1.2 mmoL/L Ca^(2+)组与0 mmoL/L Ca^(2+)组间差异具有统计学意义(P<0.05);Real time-PCR显示细胞釉原蛋白及KLK4 mRNA表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论钙缺乏可能抑制成釉细胞分化,进而影响釉质矿化成熟。 展开更多
关键词 成釉细胞 增殖 凋亡 分化
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