自体骨髓间充质干细胞移植对兔角膜碱烧伤炎症反应的抑制作用 被引量：7

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作者 吴利安 王从毅 +3 位作者 杨文 杨新光 张林 王佳慧 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期798-804,共7页

背景 眼表碱烧伤可引起角膜溃疡及角膜新生血管形成,导致角膜混浊,目前尚无有效的疗法.已有研究认为间充质干细胞（MSCs）移植具有修复角膜损伤的作用,但其在体内对角膜碱烧伤治疗的作用机制尚不清楚. 目的 研究兔自体骨髓间充质干细胞... 背景 眼表碱烧伤可引起角膜溃疡及角膜新生血管形成,导致角膜混浊,目前尚无有效的疗法.已有研究认为间充质干细胞（MSCs）移植具有修复角膜损伤的作用,但其在体内对角膜碱烧伤治疗的作用机制尚不清楚. 目的 研究兔自体骨髓间充质干细胞（BM SCs）对碱烧伤角膜的抗炎机制.方法 抽取2～3月龄日本大白兔骨髓,经体外分离培养得到BMSCs并进行传代,取第3代细胞用于实验,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,对细胞进行生物学鉴定.采用角膜贴敷NaOH滤纸法在24只日本大白兔的右眼建立中度角膜碱烧伤模型,然后将造模成功的实验兔应用随机数字表法随机分为2个组,于碱烧伤后1h分别在模型眼结膜下注射同种自体BMSCs悬液300μl（细胞密度5×106/μ1）（BMSCs组）或等容积PBS（PBS组）,每组各12只.分别于移植后3、14和28 d于裂隙灯显微镜下观察角膜的混浊度变化并进行评分,采用组织病理学方法检查角膜组织中炎症反应程度并进行多形核中性粒细胞（PMNs）计数;采用免疫组织化学染色法定位并检测角膜组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达.结果 体外分离培养的兔BMSCs贴壁生长,呈长梭形,细胞形态均一,传代后其形态无明显改变.细胞表面黏附分子标志物CD29和CD90阳性表达的细胞比例分别为99.18％和97.94％,而造血细胞标志物CD34和CD31的阳性表达分别为0.74％和0.15％.造模后兔右眼出现角膜混浊、上皮脱落、角膜基质水肿和新生血管形成,移植后14d和28 d BMSCs组混浊度评分分别为2.37±0.52和2.25±0.50,均明显低于PBS组的3.00±0.53和3.25±0.50,差异均有统计学意义（t=2.376、2.828,均P＜0.05）;移植后14 d和28 d BMSCs组角膜中PMNs数目分别为（34.17±1.85）/12个视野和（25.64±3.86）/12个视野,明显少于PBS组的（42.70±1.54）/12个视野和（32.67±1.42）/12个视野,差异均有统计学意义（t=10.021、4.832,均P=0.000）;移植后14 d和28 d BMSCs组角膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达量（A值）分别为0.388±0.016和0.384±0.006,明显低于PBS组的0.438±0.006和0.412±0.005,差异均有统计学意义（t=10.205、13.514,均P=0.000）.结论 角膜碱烧伤后早期行自体BMSCs移植可减少PMNs浸润,减轻角膜的炎症反应,下调或抑制MMP-2在受损角膜处的表达,抑制基质胶原纤维的降解,从而减少碱烧伤后角膜溃疡的发生。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞移植/方法 生物分子标志物 化学烧伤/治疗 角膜病/治疗 病理性新生血管/化学诱导 炎症/预防和治疗 基质金属蛋白酶 动物模型

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葛根素对过氧化氢致成骨细胞氧化损伤的影响 被引量：14

2

作者 王昌 汤旭磊 +3 位作者 陈克明 张莉 刘伟宁 赵瑾 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1442-1450,共9页

目的研究具有抗氧化作用的植物雌激素——葛根素(puerarin,Pue)对氧化应激后成骨细胞(osteoblast,OB)的影响。方法采用酶多次消化法,由出生24 h以内的Wistar大鼠头盖骨分离OB,培养、传代及诱导分化、矿化等。用0.1 mmol/L H_2O_2制造氧... 目的研究具有抗氧化作用的植物雌激素——葛根素(puerarin,Pue)对氧化应激后成骨细胞(osteoblast,OB)的影响。方法采用酶多次消化法,由出生24 h以内的Wistar大鼠头盖骨分离OB,培养、传代及诱导分化、矿化等。用0.1 mmol/L H_2O_2制造氧化应激状态模型。将细胞随机分为对照组、H_2O_2组[H'组]、"Pue(10^(-10)mol/L^10^(-3)mol/L)+H_2O_2"组["P+H'"组]和"H_2O_2+Pue(10^(-10)mol/L^10^(-3)mol/L)"组["H'+P"组]。观察不同处理组细胞的增殖、分化功能,并测定其微量丙二醛(m MDA)含量、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)等。结果与H_2O_2组相比,"P+H'"组和"H'+P"组中Pue10^(-7)mol/L^10^(-4)mol/L使细胞的增殖、分化功能,SOD活性和T-AOC均有显著升高(P<0.01),而mMDA含量则显著降低(P<0.01)。结论 H_2O_2过量会导致OB的氧化损伤,而葛根素在体外对H_2O_2介导OB的氧化损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 葛根素 成骨细胞 过氧化氢

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血管内皮生长因子基因多态性与陕西汉族阿尔茨海默病的相关性研究 被引量：2

3

作者 耿晓英 张爱香 +3 位作者 骞健 郭刚 张璐璐 王静 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期358-362,共5页

目的旨在探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因8个单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphism,SNP）位点与陕西汉族阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）的相关性。方法选取陕西汉族AD患者214... 目的旨在探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因8个单核苷酸多态性（single-nucleotide polymorphism,SNP）位点与陕西汉族阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）的相关性。方法选取陕西汉族AD患者214名（疾病组）及健康体检者（对照组）249名提取基因组DNA,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对9个SNP的基因型进行分型,采用SPSS 16.0及Haploview 4.2软件统计分析各基因型、等位基因及单倍型频率在病例组及对照组中的差异。结果 VEGF基因rs3025039（3非翻译区）基因型及等位基因频率分布在AD组及正常对照组差异有统计学意义（P〈0.05）。AD组T等位基因频率显著高于正常对照组（P=0.008,OR=1.527,95%CI=1.116~2.088）。连锁不平衡分析发现2个单倍型高度连锁（单倍型1：rs699947-rs1570360-rs2010963;单倍型2：rs3024997-rs3024998-rs3025006）（D〉0.9）。然而,其单倍型频率在AD组及正常对照组均无统计学差异（P〉0.05）。结论 VEGF基因功能区rs3025039位点可能与AD有关,携带有rs3025039T等位基因的个体可能更容易患AD。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 血管内皮生长因子 单核苷酸多态性 陕西汉族

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低剂量CT扫描重建颌面部软硬组织三维模型的剂量研究 被引量：6

4

作者 高蕊 王仪 +5 位作者 谷无畏 董瑜 董岩 任楠 赵铱民 白石柱 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期770-773,共4页

目的:评价CT扫描剂量对重建颌面部软硬组织三维模型的影响,为低剂量CT(LDCT)在颜面赝复体CAD/CAM技术中的应用提供依据。方法:采用Lightspeed 16排螺旋CT机对成人尸头标本,分别进行常规参数(280 mA)和低剂量参数(200、150、100、50、35... 目的:评价CT扫描剂量对重建颌面部软硬组织三维模型的影响,为低剂量CT(LDCT)在颜面赝复体CAD/CAM技术中的应用提供依据。方法:采用Lightspeed 16排螺旋CT机对成人尸头标本,分别进行常规参数(280 mA)和低剂量参数(200、150、100、50、35、25、15、5 mA)扫描,应用Mimics 10.01软件重建软硬组织三维模型;利用Geomagic 11.0软件进行三维比较,评价不同扫描参数下重建软硬组织三维模型表面形态的差异。结果:随着管电流的降低,模型表面逐渐变粗糙,与280mA相比,降至35 mA时模型表面仍较光顺,但降至25 mA以下时表面粗糙,难以确定其准确形态;模型配准后表面形态检测得出相同的结果。结论:低剂量CT(35 mA)扫描可用于颌面部软硬组织三维模型的重建。 展开更多

关键词 低剂量CT(LDCT) 三维模型

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40例中青年性白内障患者临床分析 被引量：2

5

作者 喻磊 王从毅 +4 位作者 李康寯 陈涛 贺敏 唐乐 高金荣 《海南医学院学报》 CAS 2011年第10期1412-1413,1416,共3页

目的:探讨中青年性白内障患者的临床特征及诊断。方法:回顾性分析2007年2月～2011年3月西安市第四医院收治的40例中青年性白内障患者临床资料,分析其年龄分布、病程、发病特征,所有患者行超声乳化联合人工晶体植入术治疗。结果:40例白... 目的:探讨中青年性白内障患者的临床特征及诊断。方法:回顾性分析2007年2月～2011年3月西安市第四医院收治的40例中青年性白内障患者临床资料,分析其年龄分布、病程、发病特征,所有患者行超声乳化联合人工晶体植入术治疗。结果:40例白内障患者年龄30～45岁,平均37.1岁;病程3～6个月,平均4.6个月,晶状体为典型的棉花团样;术中未行超声能量碎核,负压100～150mmHg,流量20～30cc/min;术后视力及屈光力有明显改善。结论:无明确病因的中青年性白内障患者临床诊断较为困难,应提高对此病的正确认识,有助于指导临床诊断和治疗。 展开更多

关键词 白内障 中青年 病因 临床特征 诊断

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BAMBI过表达抑制缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和迁移 被引量：4

6

作者 朱江 许治国 +1 位作者 任梅 党晓洁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第5期418-422,共5页

目的探讨过表达激活素膜结合抑制剂(bmp and activin membrane-bound inhibitor,BAMBI)对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A)增殖和迁移的影响。方法将RF/6A细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧+pF LAG组和缺氧+BAMBI组。Wes... 目的探讨过表达激活素膜结合抑制剂(bmp and activin membrane-bound inhibitor,BAMBI)对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A)增殖和迁移的影响。方法将RF/6A细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧+pF LAG组和缺氧+BAMBI组。Western blot检测各组细胞中BAMBI的表达,倒置显微镜观察各组细胞形态和密度,CCK-8法和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和周期情况,Transwell检测细胞的迁移,Western blot检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果与对照组相比,缺氧组细胞数目明显增多,增殖增加,培养120 h后,对照组细胞增殖倍数为5.00±0.28,缺氧组为7.64±0.32(P<0.001);缺氧组S期进程显著加快,占(10.44±2.61)%,对照组S期占(20.79±2.23)%(P<0.05);细胞迁移增加,缺氧组细胞数目为33.80±4.20,对照组为8.35±2.50(P<0.05),TGF-β1和VEGF的表达明显增加(P<0.05)。缺氧+BAMBI组:缺氧处理的细胞转染pF LAG-BAMBI后,与缺氧组相比,BAMBI蛋白表达显著上调,细胞数目明显减少,增殖显著降低,培养120 h后,增殖倍数为5.53±0.27(P<0.001),细胞S期受到阻滞,占(18.75±2.92)%,迁移显著下降,数目为13.00±2.80(P<0.05),TGF-β1和VEGF的表达明显下调(P<0.05)。结论过表达BAMBI可抑制缺氧诱导的RF/6A细胞的增殖和迁移,进而有望抑制视网膜血管新生。 展开更多

关键词 视网膜血管内皮细胞 缺氧 BAMBI 增殖 迁移

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TGF-β_2刺激人Tenon囊成纤维细胞生物学行为改变及表达整合素连接激酶(ILK)的研究 被引量：2

7

作者 崔丽珺 孙娜 +3 位作者 田蕴霖 王群 裴澄 谢安明 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第7期605-609,共5页

目的探讨转化生长因子β2(transforming growth factor beta 2,TGF-β2)对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞(human Tenon fibroblasts,HTFs)生物学行为及表达整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的影响。方法组织块贴壁法培养原代... 目的探讨转化生长因子β2(transforming growth factor beta 2,TGF-β2)对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞(human Tenon fibroblasts,HTFs)生物学行为及表达整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的影响。方法组织块贴壁法培养原代HTFs,免疫荧光染色鉴定波形蛋白和角蛋白。MTT法检测不同浓度TGF-β2对HTFs细胞的促增殖作用,RT-PCR检测TGF-β2作用前后α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)、ILK mRNA的表达,Western Blot检测α-SMA、ILK、E-cadherin蛋白的表达,细胞免疫荧光染色检测α-SMA、E-cadherin蛋白的表达。结果 MTT检测结果显示,TGF-β2作用48 h、72 h,5.0μg·L^(-1)及10.0μg·L^(-1)诱导下的OD值显著高于0.1μg·L^(-1)、1.0μg·L^(-1)组及空白对照组(均为P<0.05),5.0μg·L^(-1)及10.0μg·L^(-1)作用48 h及72 h的OD值显著高于24 h(均为P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,5.0μg·L^(-1)TGF-β2诱导48 h后,α-SMA mRNA及ILK mRNA水平和空白对照组相比明显上调,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western Blot检测结果显示,ILK、α-SMA及E-cadherin在空白对照组和5.0μg·L^(-1)TGF-β2处理组均有表达,但TGF-β2能够明显上调三者的表达,5.0μg·L^(-1)TGF-β2处理48 h组与空白对照组差异均有统计学意义(均为P<0.05)。细胞免疫荧光染色结果显示,TGF-β2处理组α-SMA、E-cadherin均有荧光表达,其中α-SMA表达在细胞质中,而E-cadherin在细胞质和细胞核中均有表达。结论 TGF-β2可以诱导体外培养HTFs增殖,转分化及黏附性增强,同时促进ILK的高表达,提示ILK在青光眼术后瘢痕化过程中可能也起到一定作用。 展开更多

关键词 成纤维细胞 转化生长因子 整合素连接激酶 增殖 转分化

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不同生长期晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞存活的促进作用 被引量：2

8

作者 王文军 唐罗生 杨新光 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期175-179,共5页

目的观察不同生长期大鼠的晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)是否具有不同的保护作用。方法分别提取出生后1 d、2周、6月、1年期的SD大鼠晶状体可溶性蛋白,加入培养的RGCs中,观察其对RGCs存活... 目的观察不同生长期大鼠的晶状体蛋白对体外培养的大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)是否具有不同的保护作用。方法分别提取出生后1 d、2周、6月、1年期的SD大鼠晶状体可溶性蛋白,加入培养的RGCs中,观察其对RGCs存活时间、突触生长状况及凋亡的影响。结果同期提取的晶状体蛋白各不同浓度作用于RGCs,促进其存活的作用有差异,最佳有效浓度为10-5g/L。不同生长期大鼠的晶状体蛋白可以延长RGCs存活时间,并随生长期增长而延长,但1 d组与2周组无显著性差异。加入晶状体蛋白后RGCs凋亡减少,随生长期增长而逐级减少。结论晶状体可溶性蛋白可显著促进离体培养的RGCs的存活和生长,晶状体蛋白的最佳有效质量浓度为10-5g/L。不同生长期晶状体蛋白的神经保护作用有所不同,随生长期延长,作用逐渐增强。 展开更多

关键词 晶状体蛋白 视网膜神经节细胞 细胞凋亡 大鼠 细胞培养

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白内障术后角膜病变治疗的新进展 被引量：3

9

作者 陈曦 严宏 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第10期981-984,共4页

白内障患者晶状体超声乳化术后的角膜水肿、干眼、角膜内皮功能失代偿致大泡性角膜病变等严重影响着患者满意度和视觉质量。长期以来,穿透性角膜移植是角膜内皮功能失代偿患者视力恢复的有效方法,但角膜供体缺乏及移植后角膜内皮细胞密... 白内障患者晶状体超声乳化术后的角膜水肿、干眼、角膜内皮功能失代偿致大泡性角膜病变等严重影响着患者满意度和视觉质量。长期以来,穿透性角膜移植是角膜内皮功能失代偿患者视力恢复的有效方法,但角膜供体缺乏及移植后角膜内皮细胞密度降低等问题仍然无法解决。近年来,角膜内皮移植、局部角膜后弹力层撕除、人工培养角膜内皮细胞植片的移植、Rho激酶抑制剂调节角膜内皮细胞增殖等方面的进展和新手段,为白内障术后角膜内皮功能失代偿患者的治疗带来新思路。 展开更多

关键词 白内障术后角膜病变 后弹力层撕除 人工角膜内皮细胞植片 RHO激酶抑制剂 飞秒激光辅助的晶状体超声乳化术

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骨髓间充质干细胞移植对兔碱烧伤角膜新生血管形成的抑制作用 被引量：1

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作者 吴利安 王从毅 +3 位作者 杨新光 王建洲 张林 范晶晶 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第7期623-625,633,共4页

目的观察角膜碱烧伤兔行骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植后不同时间受损角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)发生情况,探讨BMSC移植后对碱烧伤CNV的抑制作用。方法取日本大白兔24只,随机分为... 目的观察角膜碱烧伤兔行骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植后不同时间受损角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)发生情况,探讨BMSC移植后对碱烧伤CNV的抑制作用。方法取日本大白兔24只,随机分为实验组和对照组各12只,实验组进行烧伤后BMSC移植,体外分离培养得到BMSC,制备中度角膜碱烧伤模型,随后行BMSC移植。对照组不进行移植。分别于移植后3 d、14 d、28 d观察CNV生长状态、计算CNV面积、采用RT-PCR检测角膜中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。结果 BMSC贴壁生长,呈长梭形,CD90呈现高表达(表达率97.94%),CD31低表达(表达率0.15%)。BMSC移植后28 d时实验组角膜较对照组明显透亮,新生血管面积显著减小(P<0.05)。BMSC移植后14 d、28 d,实验组MMP-2基因条带的灰度值均低于对照组(均为P<0.05),实验组MMP-2 mRNA表达低于对照组且14 d时差异最明显(P<0.01)。BMSC移植后3 d,实验组TNF-α基因条带灰度值较对照组低,实验组TNF-αmRNA的表达明显受到抑制,且两组间差异有统计学意义(P<0.05);14 d时,实验组TNF-α基因表达仍低于对照组(P<0.05),28 d时实验组与对照组TNF-αmRNA表达量相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMSC通过抑制MMP-2的表达,减少细胞外基质的溶解,抑制CNV的形成;通过降低炎性细胞因子TNF-α的表达,减轻局部炎症反应,从而抑制CNV的生长。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 角膜碱烧伤 基质金属蛋白酶-2 肿瘤坏死因子-Α

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miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮细胞增殖的实验研究 被引量：1

11

作者 刘静 雷春灵 +2 位作者 白淑玮 张磊 陈莉 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第9期805-808,共4页

目的研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用。方法通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24~72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达。采用凝... 目的研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用。方法通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24~72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达。采用凝血酶刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型。使用0.5×103 U·L^-1凝血酶预刺激1 h,然后分别加入miR-29b和Lenti-vector空载体刺激24 h。分为空白对照组(Sham组)、凝血酶刺激组(RPE组)、凝血酶刺激组+miR-29b过表达组(RPE+Lenti-29b组)、凝血酶刺激组+空载体组(RPE+Lenti-vector组)。利用MTT微量酶比色法检测各组RPE细胞增殖情况,Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ表达变化。结果在倒置荧光显微镜下观察发现,RPE+Lenti-29b组和RPE+Lenti-vector组90%以上的RPE细胞成功转染,且RPE+Lenti-29b组miR-29 mRNA水平高表达,与其余3组相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。与Sham组比较,其余3组RPE细胞增殖明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05),LC3Ⅱ蛋白表达也明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与RPE+Lenti-29b组比较,RPE组和RPE+Lenti-vector组细胞增殖明显(均为P<0.05),但LC3Ⅱ蛋白表达明显低于RPE+Lenti-29b组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论上调miR-29b表达可激活RPE细胞中LC3Ⅱ蛋白表达,提高细胞自噬水平,抑制RPE细胞增殖,可能在增生性玻璃体视网膜病变发生及发展中扮演重要作用。 展开更多

关键词 miR-29b LC3 自噬 视网膜色素上皮细胞 增殖

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自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者的临床疗效 被引量：1

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作者 刘静 朱娟 +2 位作者 朱忠桥 白淑玮 周卓琳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第8期754-757,共4页

目的评价自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者的临床疗效。方法本研究为回顾性病例研究。收集2016年3月至2018年6月14例(14眼)玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者,行自体游离单层内... 目的评价自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者的临床疗效。方法本研究为回顾性病例研究。收集2016年3月至2018年6月14例(14眼)玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔患者,行自体游离单层内界膜移植术,将黄斑区外残留的内界膜剥除一片略大于黄斑裂孔直径的游离植片,放置于黄斑裂孔中,并将植片边缘置于裂孔边缘下,起到固定作用,然后行气液交换,术后严格俯卧位3~5 d。术前,术后1 d、2周、1个月、3个月通过频域光学相干断层扫描图像观察黄斑裂孔直径及是否闭合,记录患者最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)和眼压。结果术后3个月,13眼黄斑裂孔完全闭合,裂孔闭合率为92.9%;1眼黄斑裂孔直径较术前明显缩小,裂孔周围视网膜贴附良好,但黄斑中心凹可见裸露的RPE层,未见神经上皮层组织。术后各时间BCVA较术前明显提高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),其中11眼较术前提高,3眼无变化,但所有患者自诉视物变形症状较术前明显好转。术后2周,仅有1眼眼压高,为33.4 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),给予降眼压滴眼液后恢复正常。术后2周所有患者气体均完全吸收。14眼均未出现手术相关并发症。结论自体游离内界膜移植术治疗玻璃体切割联合内界膜剥除术后未闭合黄斑裂孔,术后裂孔闭合率高,患者视功能改善明显。 展开更多

关键词 黄斑裂孔 内界膜移植术 玻璃体切割术

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白内障术后并发症:现状与对策 被引量：29

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作者 严宏 陈曦 陈颖 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第1期1-7,共7页

近年来,由于手术方式、仪器设备和人工晶状体的改进,白内障术后并发症的发生率已明显下降。晶状体上皮细胞间质转化机制学说和人工晶状体材料及设计研究有了新的突破,为后发性白内障的防治提供了新途径。大量临床研究证实,术毕前房注射... 近年来,由于手术方式、仪器设备和人工晶状体的改进,白内障术后并发症的发生率已明显下降。晶状体上皮细胞间质转化机制学说和人工晶状体材料及设计研究有了新的突破,为后发性白内障的防治提供了新途径。大量临床研究证实,术毕前房注射抗生素(头孢呋辛或莫西沙星)可显著降低术后眼内炎的发生率,包括术中合并晶状体后囊膜破裂的患者,未来有望在临床广泛推广。体外培养人角膜内皮细胞和促角膜内皮细胞增生药物的研发为白内障术后角膜内皮损伤的治疗带来了曙光。利用光学相干断层扫描、光学相干断层扫描血管成像能在早期准确诊断白内障术后黄斑囊样水肿,且非甾体抗炎药或抗血管内皮生长因子药物玻璃体内注射对此疗效明确。随着研究的深入,进一步认识到先天性白内障手术时机、人工晶状体植入否与术后继发性青光眼的相关性。高度近视眼患者晶状体屈光性手术的提前,增加了这类患者晚期人工晶状体-囊袋复合体脱位的发生率,并让相应治疗面临新的挑战。飞秒激光辅助的白内障手术因其精准性和安全性已在临床逐渐应用,但仍需关注其可能带来的干眼、瞳孔缩小、视网膜光损伤等并发症。另外,由于糖尿病的高发病率,对糖尿病患者的白内障手术应全面、综合、系统地治疗,以防止术后各种眼表、眼底并发症的发生。本文就上述各方面的研究现状和相应对策进行综述,以期帮助眼科医生进行临床诊疗。 展开更多

关键词 白内障术后并发症 后发性白内障 眼内炎 角膜损伤 黄斑囊样水肿 飞秒激光辅助的白内障手术

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藏红花素与灯盏细辛对慢性高眼压模型大鼠视神经保护作用的比较 被引量：8

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作者 吕伯昌 许治国 +2 位作者 陈涛 史娟 杨新光 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期990-996,共7页

背景 青光眼视神经损害的主要机制是视觉神经元的凋亡和视网膜血液供应的减少,灯盏细辛已证实对高眼压大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）和视神经有保护作用.研究发现,藏红花提取物具有抗炎、抑制神经元凋亡和调节血流等作用,但其能否保护... 背景 青光眼视神经损害的主要机制是视觉神经元的凋亡和视网膜血液供应的减少,灯盏细辛已证实对高眼压大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）和视神经有保护作用.研究发现,藏红花提取物具有抗炎、抑制神经元凋亡和调节血流等作用,但其能否保护青光眼患者的RGCs尚不清楚. 目的 探讨藏红花素对慢性高眼压模型大鼠视神经的保护作用.方法 采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组,每组8只,均以右眼为实验眼.模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组大鼠采用巩膜静脉烧灼法建立慢性高眼压模型;假手术组大鼠仅剪开结膜,灯盏细辛组和藏红花素组大鼠于术前30 rmin和术后每日分别腹腔内注射灯盏细辛注射液150 mg/kg（0.5 ml）和藏红花素20 mg/kg（0.5 ml）,共给药4周,假手术组和模型对照组大鼠以同样的方式注射0.5 ml生理盐水.各组大鼠均于术前和术后1d、3d、1周、2周、3周、4周测量眼压.术后4周制备大鼠眼球及视神经标本,采用苏木精-伊红染色法测定视网膜厚度;采用TUNEL染色法计数RGCs凋亡数量;采用透射电子显微镜观察各组大鼠视神经轴突超微结构的变化;采用Western blot法检测视网膜中bcl-2和bax蛋白的表达.结果 模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠造模和干预后不同时间点眼压均明显高于假手术组,造模后不同时间点大鼠的眼压值均明显高于造模前,各组大鼠在造模前后不同时间点眼压值的变化差异均有统计学意义（F分组=169.079,P=0.000;F时间=50.505,P=0.000）.假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠视网膜厚度分别为（192.72±4.28）、（165.15±3.89）、（177.75±3.35）和（182.48±4.12） μm,藏红花素组大鼠视网膜厚度值明显低于假手术组而高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠RGCs凋亡率分别为（2.58±1.33）％、（42.10±4.71）％、（28.34±2.96）％和（19.95±2.93）％,藏红花素组大鼠RGCs凋亡率明显低于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.藏红花素组大鼠视神经有髓纤维数量和bcl-2/bax值均明显高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 藏红花素可抑制RGCs凋亡和视神经纤维的变性,对慢性高眼压大鼠视网膜神经细胞发挥保护作用,其对视神经的保护作用强于灯盏细辛. 展开更多

关键词 藏红花素/化学 草药 植物提取物/药物学 高眼压 凋亡 视网膜神经节细胞 灯盏细辛/化学 视神经保护

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视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿时VEGF和IL-6在前房和玻璃体腔的表达 被引量：43

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作者 艾华 杨新光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1124-1126,共3页

目的:探讨视网膜中央静脉阻塞(CRVO)黄斑水肿的严重程度与前房中的血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-6(IL-6)相关性。方法:15例CRVO合并黄斑水肿的患者在接受玻璃体切除联合白内障摘除手术时收集其房水和玻璃体标本,采用酶联免疫吸附试... 目的:探讨视网膜中央静脉阻塞(CRVO)黄斑水肿的严重程度与前房中的血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-6(IL-6)相关性。方法:15例CRVO合并黄斑水肿的患者在接受玻璃体切除联合白内障摘除手术时收集其房水和玻璃体标本,采用酶联免疫吸附试验检测房水、玻璃体、血浆中的VEGF和IL-6。结果:VEGF和IL-6在前房和玻璃体腔的分布显著相关。相比非缺血型CRVO,缺血型CRVO玻璃体腔和前房的VEGF和IL-6水平更高,且和黄斑水肿严重程度相关。结论:我们的研究提示前房的VEGF和IL-6可以间接反映其在玻璃体腔的水平。房水VEGF和IL-6的检测对临床评估CRVO患者黄斑水肿严重程度可能是行之有效的方法之一。 展开更多

关键词 视网膜中央静脉阻塞 黄斑水肿 IL-6 血管内皮生长因子

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球周及眼内注射曲安奈德对脉络膜脱离型视网膜脱离预后的影响 被引量：7

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作者 魏勇 毕春潮 +3 位作者 朱忠桥 王建洲 朱群丽 王润生 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第10期968-970,共3页

目的探讨球周及眼内注射曲安奈德对脉络膜脱离型视网膜脱离预后的影响。方法将脉络膜脱离型视网膜脱离29眼随机分为:眼内硅油填充+曲安奈德(TA)玻璃体腔注射(A组,15眼),眼内C3F8填充+TA半球后注射(B组,14眼)。术前均以40 mg甲泼尼龙半... 目的探讨球周及眼内注射曲安奈德对脉络膜脱离型视网膜脱离预后的影响。方法将脉络膜脱离型视网膜脱离29眼随机分为:眼内硅油填充+曲安奈德(TA)玻璃体腔注射(A组,15眼),眼内C3F8填充+TA半球后注射(B组,14眼)。术前均以40 mg甲泼尼龙半球后注射。术毕A组以硅油填充且眼内注入4 mg TA,B组以C3F8填充且40 mg TA半球后注射。比较两组间最佳矫正视力、视网膜复位率的差异。结果第1次手术视网膜复位率A组(86.67%)高于B组(71.43%),但差异无统计学意义(P=0.390);术后增生性玻璃体视网膜病变发生率B组(28.57%)高于A组(13.33%)且增生性玻璃体视网膜病变严重程度更高。A组中有11眼,B组中有10眼术后最佳矫正视力提高,差异无统计学意义。结论玻璃体切除联合TA眼内注射及硅油眼内填充对脉络膜脱离型视网膜脱离的视网膜复位更好一些,尤其对于一些特殊患者如患有糖尿病、高血压及消化道溃疡,可能是一种更好的选择。 展开更多

关键词 视网膜脱离 脉络膜脱离 玻璃体切割术

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氧化应激条件下miR-21对人眼小梁网细胞胞外基质蛋白表达的影响 被引量：6

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作者 党晓洁 任梅 +2 位作者 朱江 许治国 杨新光 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第1期30-34,共5页

目的探讨氧化应激条件下miR-21对人眼小梁网细胞(human trabecular meshwork cells,HTMCs)胞外基质蛋白表达的影响。方法用不同浓度H_2O_2(0μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1)、400μmol·L^(-1)、600μmol·L^(-1))刺激... 目的探讨氧化应激条件下miR-21对人眼小梁网细胞(human trabecular meshwork cells,HTMCs)胞外基质蛋白表达的影响。方法用不同浓度H_2O_2(0μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1)、400μmol·L^(-1)、600μmol·L^(-1))刺激HTMCs 1 h,MTT法检测其对HTMCs活力的影响,从而确定后续实验所需H_2O_2浓度。随后将细胞分成正常组和H_2O_2组,Real-time PCR检测miR-21的表达,Western blot检测胞外基质蛋白(纤维连接蛋白和胶原蛋白I)的表达。然后将细胞分成5组:H_2O_2组(只用H_2O_2处理)、miR-21干预组(H_2O_2+miR-21模拟物)、miR-21对照组(H_2O_2+miR-21对照模拟物)、miR-21抑制组(H_2O_2+miR-21抑制剂)和miR-21抑制对照组(H_2O_2+miR-21抑制剂对照物),Real-time PCR检测miR-21、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β2和PTEN mRNA表达,Western blot检测胞外基质蛋白、TGF-β2和PTEN蛋白表达。最后将细胞分成3组:H_2O_2组(只用H_2O_2处理)、PTEN干扰组(H_2O_2+PTEN siRNA)和干扰对照组(H_2O_2+control siRNA),检测PTEN、胞外基质蛋白和TGF-β2蛋白水平表达。结果当H_2O_2浓度≥400μmol·L^(-1)时,可显著抑制HTMCs的活性,后续实验选择此浓度。与正常组相比,H_2O_2组中miR-21、纤维连接蛋白和胶原蛋白I的表达均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。检测氧化应激条件下miR-21对胞外基质蛋白、TGF-β2和PTEN表达的影响,发现与H_2O_2组相比,miR-21对照组和miR-21抑制对照组中miR-21、纤维连接蛋白与胶原蛋白I蛋白水平表达以及TGF-β2和PTEN mRNA及蛋白水平表达差异均无统计学意义(均为P>0.05);与miR-21对照组相比,miR-21干预组miR-21、纤维连接蛋白和胶原蛋白I蛋白水平及TGF-β2 mRNA和蛋白水平表达均增加,PTEN蛋白水平表达降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而PTEN mRNA表达差异均无统计学意义(均为P>0.05);与miR-21抑制对照组相比,miR-21抑制组miR-21、纤维连接蛋白和胶原蛋白I蛋白水平及TGF-β2 mRNA和蛋白水平表达均降低,PTEN蛋白水平表达增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而PTEN mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。采用Western blot检测氧化应激条件下PTEN对TGF-β2和胞外基质蛋白表达的影响,发现与H_2O_2组相比,干扰对照组PTEN、TGF-β2、纤维连接蛋白和胶原蛋白I的表达差异均无统计学意义(均为P>0.05);与干扰对照组相比,PTEN干扰组PTEN的表达下调,TGF-β2、纤维连接蛋白和胶原蛋白I的表达均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论氧化应激条件下miR-21可增加HTMCs胞外基质产物,这可能与其靶向沉默PTEN基因,调节TGF-β2的表达相关。 展开更多

关键词 MIR-21 转化生长因子 小梁网细胞 胞外基质

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miR-375对缺氧诱导的人视网膜微血管内皮细胞功能的抑制作用及其机制 被引量：1

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作者 朱江 任梅 许治国 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期695-702,共8页

背景研究表明miR-375抑制肿瘤细胞的增生、凋亡、迁移和黏附,并对肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)含量的变化进行调控,进而影响血管的生成,但miR-375是否于预视网膜新生血管的形成鲜见报道。目的探讨miR-375对缺氧诱导的人视网膜微血... 背景研究表明miR-375抑制肿瘤细胞的增生、凋亡、迁移和黏附,并对肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)含量的变化进行调控,进而影响血管的生成,但miR-375是否于预视网膜新生血管的形成鲜见报道。目的探讨miR-375对缺氧诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs)功能的影响及其可能的作用机制。方法用IMDM完全培养液培养HRCECs,并将细胞分为正常对照组、CoCl_(2)处理组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂对照组、CoCl_(2)+miR-375抑制剂组和CoCl_(2)+miR-375抑制剂对照组,待细胞生长至对数生长期后用200μmol/LCoCl_(2)处理HRCECs以制备缺氧细胞模型;制备终浓度为50nmol/L的miRNA-脂质体复合物和小干扰RNA(siRNA)-脂质体复合物将miR-375和卷曲蛋白4(FZD4)siRNA转染各组细胞48h。采用MTT法检测各组细胞的增生情况(A值)并计算增生倍数;采用Transwell小室法检测各组迁移的细胞数目;采用ELISA法检测细胞培养液中VEGF和血管内皮钙黏蛋白(VE—cadherin)含量;采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR.375mRNA和FZD4mRNA的相对表达量变化;采用Westernblot法分析细胞中Wnt通路相关蛋白的相对表达量变化;采用Matrigel小管形成实验检测细胞的体外形成血管的长度。将培养的细胞分为正常对照组、CoCl_(2)处理组、CoCl_(2)+mock组和CoCl_(2)+FZD4siRNA组,采用荧光素酶报告基因法探测miR-375靶基因FZD4的表达。结果miR-375处理组miR-375mRNA相对表达量明显高于正常对照组,miR-375拟似剂组细胞中miR-375mRNA相对表达量明显高于miR-375拟似剂对照组,miR-375抑制剂组细胞中miR-375mRNA相对表达量明显低于miR-375抑制剂对照组,差异均有统计学意义(t=-19.237、8.764,均P〈0.01),提示miR-375的转染效率较高。正常对照组、CoCl_(2)处理组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂对照组、CoCl_(2)+miR-375抑制剂组、CoCl_(2)+miR.375抑制剂对照组间细胞增生倍数、迁移细胞数、细胞培养液中VEGF和VE—Cadherin含量以及体外小管形成长度的总体比较差异均有统计学意义(F=24.324、26.776、14.113、19.225、15.040,均P〈0.001),CoCl2+miR-375拟似剂组细胞增生倍数、迁移细胞数体外小管形成长度及细胞分泌VEGF和VE—cadherin量均较CoCl_(2)+miR-375拟似剂对照组明显减少,而CoCl_(2)+miR-375抑制剂组较CoCl_(2)+miR-375抑制剂对照组明显增加,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。正常对照组、CoCl_(2)处理组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂组、CoCl_(2)+miR-375拟似剂对照组、CoCl_(2)+miR-375抑制剂组、CoCl_(2)+miR-375抑制剂对照组细胞中B—catenin、cyclinD1、MMP2和VEGF蛋白表达量的总体比较差异均有统计学意义(F=11.753、13.283、16.770、10.334,均P〈0.001),CoCl_(2)+miR-375拟似剂组细胞中B.catenin、cyclinDl、MMP2、VEGF蛋白表达量较CoCl2+miR-375拟似剂对照组均明显下降,CoCl_(2)+miR-375抑制剂组较CoCl2+miR-375抑制剂对照组明显增加,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。CoCl_(2)处理组和CoCl_(2)+mock组细胞增生倍数、迁移细胞数和小管形成长度均较正常对照组明显增加,CoCl2+FZD4siRNA组细胞增生倍数、迁移细胞数和小管形成长度均明显低于CoCl_(2)+mock组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论miR-375抑制缺氧条件下HRCECs的增生、迁移以及血管形成能力,其作用机制与miR-375直接靶向FZD4调控Wnt通路活性有关。 展开更多

关键词 微小RNA/生理 视网膜 血管内皮细胞 病理性新生血管形成 信号转导/生理 Wnt相关蛋白/代谢 细胞增生/药物作用 基因表达调控

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细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞存活的影响 被引量：2

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作者 党晓洁 任梅 +1 位作者 朱江 许治国 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第3期225-229,共5页

目的研究细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法采用视神经横断手术构建大鼠视神经损伤模型,... 目的研究细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法采用视神经横断手术构建大鼠视神经损伤模型,术后分离RGCs。实验分为视神经损伤组(optic nerve transection,ONT组)和假手术组。采用Western blot和RT-PCR检测SOCS3在两组细胞中的表达。随后将SOCS3 siRNA分别转染假手术组和ONT组RGCs,实验进一步分为空白对照组、阴性对照组和SOCS3沉默组。CCK8和MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342荧光染色法和流式细胞技术检测细胞凋亡。进一步将mTOR siRNA和SOCS3 siRNA共转染RGCs,检测细胞存活和细胞凋亡。结果视神经损伤3d后,ONT组SOCS3表达水平显著高于假手术组(P=0.049),且随损伤时间延长而升高。与空白对照组相比,SOCS3沉默可显著提高视神经损伤后RGCs的存活率[空白对照组与SOCS3沉默组分别为(49.47±7.35)%和(73.24±8.70)%],降低细胞凋亡率[2组分别为(27.25±0.75)%和(10.96±1.07)%]和细胞生长抑制率[2组分别为(23.06±1.43)%和(10.65±1.77)%]。Hoechst染色也表明SOCS3沉默可改善视神经损伤诱导的细胞凋亡。同时,SOCS3沉默可显著提高视神经损伤后2周mTOR活性标志蛋白pS6的表达;且与单独沉默SOCS3相比,共同沉默mTOR和SOCS3可降低细胞存活率,提高细胞生长抑制率和细胞凋亡率。结论SOCS3沉默可以通过上调损伤后期mTOR的活性而促进损伤RGCs的存活并抑制其凋亡。 展开更多

关键词 细胞因子信号转导抑制因子 MTOR 视神经损伤 视网膜神经节细胞 增殖

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埃罗替尼对小鼠角膜上皮组织病理学及超微结构的影响 被引量：2

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作者 罗阿丽 李娟 +5 位作者 杨启晨 王春宝 牛静静 叶蕾 容蓉 邵毅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第5期401-405,共5页

目的探讨埃罗替尼对小鼠角膜上皮组织引起的组织病理学及超微结构改变的影响。方法30只雄性6~8周龄BALB/c小鼠,随机分为对照组(12只)和实验组(12只),6只不作处理为空白对照。实验组使用20μmol·L^(-1)埃罗替尼液滴眼,对照组采用PB... 目的探讨埃罗替尼对小鼠角膜上皮组织引起的组织病理学及超微结构改变的影响。方法30只雄性6~8周龄BALB/c小鼠,随机分为对照组(12只)和实验组(12只),6只不作处理为空白对照。实验组使用20μmol·L^(-1)埃罗替尼液滴眼,对照组采用PBS滴眼,每天4次。分别在干预后1 d、7 d、14 d对各组小鼠进行荧光素钠(fluorescent,FL)染色及评分。干预后14 d取小鼠眼球,光学显微镜及电子显微镜下观察角膜上皮及细胞的结构变化。提取角膜蛋白进行Western Blot检测。结果干预前,实验组和对照组FL评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。在干预后1 d、7 d、14 d,实验组FL评分较干预前明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而对照组FL评分与干预前无明显改变,差异均无统计学意义(均为P>0.05);两组间FL评分在干预后1 d相比,差异无统计学意义(P>0.05);两组间FL评分在干预后7 d、14 d相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。实验组小鼠角膜上皮细胞排列紊乱,层数增加;电镜下见角膜上皮表层细胞形态不规则、脱落,微绒毛减少、消失;表层上皮细胞的桥粒、半桥粒连接数目明显减少。实验组角膜表皮生长因子受体表达明显发生变化,两组表皮生长因子受体比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论埃罗替尼会引起小鼠角膜上皮的组织结构及细胞超微结构损坏。其机制可能是通过抑制表皮生长因子受体的活化来影响角膜上皮的。 展开更多

关键词 埃罗替尼 角膜上皮 电子显微镜 微绒毛 超微结构

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