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人U_6启动子表达载体的构建及在胃癌细胞中的活性鉴定
1
作者
张鹏宇
于杰
+1 位作者
谭武红
赵璇
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期525-528,571,共5页
目的构建人U6(hU6)snRNA启动子驱动的小RNA分子的表达载体,并在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞中鉴定其表达外源性小RNA分子的活性。方法以人基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hU6snRNA启动子序列,并将其克隆入PUC19载体中,命名为PUC-hU6-ext...
目的构建人U6(hU6)snRNA启动子驱动的小RNA分子的表达载体,并在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞中鉴定其表达外源性小RNA分子的活性。方法以人基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hU6snRNA启动子序列,并将其克隆入PUC19载体中,命名为PUC-hU6-extra,经测序证明其序列的正确性;用脂质体法转染SGC-7901细胞;用RT-PCR检测U6启动子的转录活性,并测定培养细胞的生长曲线。结果hU6snRNA基因启动子和紧接转录起始点hU6snRNA的前27个核苷酸被成功地克隆入PUC19质粒载体,重组载体在SGC-7901细胞中能高表达小分子RNA,并且未观察到后者对细胞体外增殖的影响。结论成功构建了以hU6snRNA启动子驱动的、能在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞内高效转录小分子RNA的表达质粒PUC-hU6-extra。
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关键词
人U6启动子
载体构建
胃癌细胞系
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职称材料
题名
人U_6启动子表达载体的构建及在胃癌细胞中的活性鉴定
1
作者
张鹏宇
于杰
谭武红
赵璇
机构
西安交通大学
医学院
遗传与分子生物
学
系
西安交通大学
医学院
地方病研究所
西安交通大学医学院组胚学教研室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期525-528,571,共5页
文摘
目的构建人U6(hU6)snRNA启动子驱动的小RNA分子的表达载体,并在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞中鉴定其表达外源性小RNA分子的活性。方法以人基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hU6snRNA启动子序列,并将其克隆入PUC19载体中,命名为PUC-hU6-extra,经测序证明其序列的正确性;用脂质体法转染SGC-7901细胞;用RT-PCR检测U6启动子的转录活性,并测定培养细胞的生长曲线。结果hU6snRNA基因启动子和紧接转录起始点hU6snRNA的前27个核苷酸被成功地克隆入PUC19质粒载体,重组载体在SGC-7901细胞中能高表达小分子RNA,并且未观察到后者对细胞体外增殖的影响。结论成功构建了以hU6snRNA启动子驱动的、能在人胃低分化腺癌SGC-7901细胞内高效转录小分子RNA的表达质粒PUC-hU6-extra。
关键词
人U6启动子
载体构建
胃癌细胞系
Keywords
human U6 promoter
vector construction
gastric carcinoma cell line
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人U_6启动子表达载体的构建及在胃癌细胞中的活性鉴定
张鹏宇
于杰
谭武红
赵璇
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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