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hTERT转染永生化新生大鼠耳蜗基底膜细胞的研究
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作者 许映龙 刘晖 +1 位作者 王军利 许珉 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期685-688,共4页
目的通过基因转染法获得新生大鼠耳蜗基底膜细胞永生化细胞系。方法通过脂质体法将pCI-neo-hTERT质粒转染原代培养的新生大鼠耳蜗基底膜细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞系,并行转染细胞RT-PCR、端粒酶活性、细胞周期、细胞凋亡等检测... 目的通过基因转染法获得新生大鼠耳蜗基底膜细胞永生化细胞系。方法通过脂质体法将pCI-neo-hTERT质粒转染原代培养的新生大鼠耳蜗基底膜细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞系,并行转染细胞RT-PCR、端粒酶活性、细胞周期、细胞凋亡等检测。结果转染72h后RT-PCR检测到人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因阳性表达,转染细胞通过G418筛选传代后,可检测到端粒酶活性,流式细胞术检测提示转染细胞增殖活力增强不明显,但细胞凋亡明显减少。结论通过脂质体转染hTERT基因,可使新生大鼠耳蜗基底膜细胞凋亡减少,传代能力增强,给耳蜗细胞实验提供足够的细胞来源。 展开更多
关键词 耳蜗基底膜 细胞 人端粒酶逆转录酶 大鼠
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良性阵发性位置性眩晕患者前庭诱发肌源性电位的特点 被引量:13
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作者 胡娟 张青 +5 位作者 梁建民 许珉 许信达 陈彦飞 张滟 加我君孝 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期115-119,共5页
目的探讨良性阵发性位置性眩晕(BPPV)患者前庭诱发肌源性电位(VEMPs)的临床特征。方法对67例BPPV患者及19例(38耳)年龄、性别与之匹配的健康人进行颈肌前庭诱发肌源性电位(cVEMP)及眼肌前庭诱发肌源性电位(oVEMP)测试,分析对比VEMPs的... 目的探讨良性阵发性位置性眩晕(BPPV)患者前庭诱发肌源性电位(VEMPs)的临床特征。方法对67例BPPV患者及19例(38耳)年龄、性别与之匹配的健康人进行颈肌前庭诱发肌源性电位(cVEMP)及眼肌前庭诱发肌源性电位(oVEMP)测试,分析对比VEMPs的引出率及各参数指标。结果 oVEMP在病例组患侧的引出率为43.3%、健侧为41.8%,对照组为71.1%;患侧与健侧比较差异无统计学意义(P>0.05),患侧、健侧与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。cVEMP在病例组患侧的引出率为62.7%、健侧为61.2%,对照组为84.2%;患侧与健侧比较差异无统计学意义(P>0.05),患侧、健侧与对照组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。oVEMP引出率较cVEMP引出率更低(P<0.05)。病例组患侧、健侧及对照组间oVEMP、cVEMP的阈值、各波潜伏期、振幅对比均无统计学差异(P>0.05)。结论 BPPV患者无论健侧还是患侧,其oVEMP和cVEMP引出率均显著下降,且以oVEMP降低为著,提示BPPV患者的耳石器,尤其是椭圆囊机能受损明显;引出VEMPs波形的BPPV患者,无论oVEMP还是cVEMP,其波形(参数)基本正常。 展开更多
关键词 良性阵发性位置性眩晕 前庭诱发肌源性电位 前庭 椭圆囊 球囊
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运用伦理道德理念进行护理管理的研究 被引量:9
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作者 吴彩芹 石莉红 +1 位作者 李静静 陈芳 《中国医学伦理学》 2012年第6期781-782,共2页
应用伦理道德理念进行护理管理是对医学伦理学基本原则和医院伦理管理理念的实践,具体应用过程中,需要加强护理人员的伦理道德培训,转变护士长的管理理念,提高其专业知识和技能,培养其崇高的道德人格;培养护士乐于奉献的优秀思想品质及... 应用伦理道德理念进行护理管理是对医学伦理学基本原则和医院伦理管理理念的实践,具体应用过程中,需要加强护理人员的伦理道德培训,转变护士长的管理理念,提高其专业知识和技能,培养其崇高的道德人格;培养护士乐于奉献的优秀思想品质及职业道德素质,提高其心理素质;用伦理道德理念管理患者;设置人性化的医疗环境等。通过伦理护理管理的实施有利于提高护理人员的责任意识和自身素质,改善护患关系,提高患者满意度。 展开更多
关键词 伦理道德 护理管理 护患关系 医学伦理学 人性化服务
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雷公藤红素抑制人喉癌Hep-2细胞增殖并诱导其凋亡 被引量:1
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作者 任晓勇 常换换 罗花南 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期785-788,796,共5页
目的研究雷公藤红素对人喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法以不同浓度、不同时间的雷公藤红素处理体外培养的人喉癌Hep-2细胞,采用锥虫蓝(台盼蓝)染色、CCK-8和结晶紫染色法检测其对细胞增殖的影响;DAPI... 目的研究雷公藤红素对人喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法以不同浓度、不同时间的雷公藤红素处理体外培养的人喉癌Hep-2细胞,采用锥虫蓝(台盼蓝)染色、CCK-8和结晶紫染色法检测其对细胞增殖的影响;DAPI荧光染色法和流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测EZH2、H3K27me3的蛋白表达变化。结果雷公藤红素能够抑制喉癌Hep-2细胞的增殖且呈时间与剂量依赖性,48h后其IC50为(3.19±0.83)μmol/L;与对照组相比,5μmol/L的雷公藤红素作用24h后Hep-2凋亡率显著增加(t=-11.32,P<0.05),EZH2、H3K27me3蛋白表达水平下降。结论雷公藤红素能显著抑制人喉癌Hep-2细胞的增殖并诱导其凋亡,可能是通过下调EZH2及下游靶基因H3K27me3从而发挥作用。 展开更多
关键词 雷公藤红素 人喉癌Hep-2细胞 增殖 凋亡 EZH2 H3K27me3
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大鼠Atoh1基因真核表达载体的构建及转染293T细胞的实验研究
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作者 郑国玺 祝康 +3 位作者 朱珠 侯瑾 韦俊荣 许珉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1131-1137,共7页
目的利用基因工程方法克隆SD大鼠Atoh1基因CDS,构建大鼠核转录因子Atoh1的真核表达载体并在真核细胞中表达。方法从SD大鼠结肠粘膜提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增Atoh1基因CDS区序列并TA克隆至PMD-19T载体中。测序鉴定后将Atoh1基因连... 目的利用基因工程方法克隆SD大鼠Atoh1基因CDS,构建大鼠核转录因子Atoh1的真核表达载体并在真核细胞中表达。方法从SD大鼠结肠粘膜提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增Atoh1基因CDS区序列并TA克隆至PMD-19T载体中。测序鉴定后将Atoh1基因连接于含有EGFP和内部核糖体转入位点(internal ribosome entrysite,IRES)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,对重组质粒进行酶切鉴定和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至293T细胞,荧光显微镜、PT-PCR和Western blot检测其在293T细胞中的表达。结果扩增得到大鼠Atoh1CDS区长1056bp,编码351个氨基酸,与GeneBank公布的参考序列对比,有两处碱基发生突变,但克隆序列编码的氨基酸序列与参考序列完全一致,两处碱基应为单核苷酸多态性(SNP),突变为无义突变,不影响蛋白表达。双酶切和测序结果证明Atoh1已正确地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染293T细胞48h后,荧光显微镜下观察到荧光蛋白的表达,PT-PCR和Western blot证实Atoh1的mRNA和蛋白能在293T细胞中正确表达。结论成功构建了真核表达载体pAtoh1-IRES2-EGFP,并在293T细胞中成功表达,为进一步研究Atoh1的功能、作用机制及感音神经性耳聋的基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 感音神经性耳聋 Atoh1 基因克隆 真核表达载体
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