一种新的结直肠癌组织学分型、分级-评分方案 被引量：22

1

作者 杨军 郭睿 +5 位作者 康安静 陈晓黎 苏宝山 黄小钟 靳耀锋 李宗芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期169-173,共5页

目的：提出一种新型结直肠癌组织学分型、分级-评分方案，为结直肠癌的生物学行为和预后判断提供评估指标。方法根据结直肠癌高度异质性的组织学特征、参照WHO分型方案和目前对结直肠癌组织学分型、分化程度与生物学行为相关性的研究成... 目的：提出一种新型结直肠癌组织学分型、分级-评分方案，为结直肠癌的生物学行为和预后判断提供评估指标。方法根据结直肠癌高度异质性的组织学特征、参照WHO分型方案和目前对结直肠癌组织学分型、分化程度与生物学行为相关性的研究成果，设计新型结直肠癌组织学分型、分级-评分方案：（1）将结直肠癌分为不同组织学类型并予以评分：④非黏液性腺癌（管状腺癌、筛状粉刺型腺癌、髓样癌、锯齿状腺癌、微乳头状癌等，1~3分）；④黏液性腺癌（黏液腺癌、印戒细胞癌，评3~4分）；④鳞癌（1~3分）；④神经内分泌肿瘤（神经内分泌瘤、神经内分泌癌，1~4分）；④特殊类型结直肠癌（透明细胞癌、梭形细胞癌等，4分）；④未分化癌（5分）；（2）病理诊断书写格式：按照组织学结构主次顺序诊断，如＊＊＊癌伴＊＊＊癌；（3）计分方法：将结直肠癌组织中的不同组织类型的分级-评分累计作为结直肠癌的总评分，单一结构组成的结直肠癌其分值乘以2获得最终得分。并采用这一方案对666例进展期结直肠癌患者病理标本进行组织学分型、分级-评分，分析其与TNM分期和淋巴结癌转移之间的相关性。结果结直肠癌组织学分级-评分与结直肠癌的TNM分期和是否伴有淋巴结癌转移关系密切，结直肠癌组织学分级-评分随着结直肠癌的TNM分期和淋巴结癌转移而升高，并具显著统计学意义（P＆lt;0.05）。结论该分级-评分方案能够客观评价结直肠癌的生物学行为和侵袭转移能力，有可能成为一个评价结直肠癌生物学行为及预后预测的具有重要价值的新客观指标，但仍有必要经过前瞻性多中心、大规模临床研究对该新型结直肠癌组织学分型、分级-评分方案进行持续修订和更新。 展开更多

关键词 结直肠癌 组织学分型 组织学分级-评分 分期

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姜黄素通过降低一氧化氮合酶水平抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭和转移 被引量：9

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作者 李牧 王丽 +5 位作者 刘海莉 苏宝山 刘变利 林温静 李昭荣 常黎华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1752-1756,共5页

目的探讨姜黄素抗宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其可能机制。方法分别以0、10、25、50、100、150和200μmol/L浓度的姜黄素干预宫颈癌HeLa细胞。24 h后,采用MTT法观察其对HeLa细胞增殖的抑制作用,TUNEL法染色观察其对HeLa细胞凋亡的... 目的探讨姜黄素抗宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其可能机制。方法分别以0、10、25、50、100、150和200μmol/L浓度的姜黄素干预宫颈癌HeLa细胞。24 h后,采用MTT法观察其对HeLa细胞增殖的抑制作用,TUNEL法染色观察其对HeLa细胞凋亡的诱导作用。应用Transwell小室检测姜黄素对HeLa细胞侵袭转移能力的抑制作用,Western-blot检测其对金属基质蛋白酶-9(MMP-9)以及E-钙粘素(E-cad)表达水平的影响。通过RT-PCR及Western-blot检测姜黄素对诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平的影响;采用Griess法观察姜黄素对HeLa细胞生成一氧化氮(NO)能力的影响。结果姜黄素可通过诱导凋亡抑制HeLa细胞的增殖,且呈现浓度依赖性;姜黄素可显著降低HeLa细胞的侵袭能力并能够降低MMP-9的表达水平,同时升高E-cad的表达水平;姜黄素可显著降低HeLa细胞内iNOS的表达水平,并降低NO的合成。结论姜黄素可能通过降低iNOS的表达水平抑制HeLa细胞的侵袭、转移能力。 展开更多

关键词 姜黄素 宫颈癌 侵袭 转移 HELA细胞 一氧化氮合酶

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HBeAg的B细胞线性表位预测及鉴定 被引量：12

3

作者 杨军 刘妮 +5 位作者 张婷 赵世平 强磊 苏宝山 康安静 李宗芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-257,共5页

目的预测并鉴定乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的B细胞线性表位,为乙型肝炎的诊断和治疗提供新的依据。方法采用生物信息学分析技术,利用NCBI数据库和免疫表位数据库提供的相应软件预测HBeAg的B细胞线性表位,采用人工合成法合成相应表位肽并... 目的预测并鉴定乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的B细胞线性表位,为乙型肝炎的诊断和治疗提供新的依据。方法采用生物信息学分析技术,利用NCBI数据库和免疫表位数据库提供的相应软件预测HBeAg的B细胞线性表位,采用人工合成法合成相应表位肽并分别将与血蓝蛋白(KLH)偶联,作为免疫原,免疫大白兔制备抗HBeAg抗原表位抗体,ELISA法鉴定抗体的特异性。结果发现了1MDIDPYKEFG10、37LYREALESPEHCSP50、74SNLEDPAS81、127RTPPAYRPPNAPIL140等4条新的HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,其与KLH的偶联物作为免疫原免疫大白兔,获得特异性高效价抗体,抗体滴度大于1∶512000,ELISA实验证实上述抗体均可与HBeAg发生特异性免疫反应。结论采用生物信息学技术成功确认了4个HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,为深入研究HBeAg的功能和作用以及乙型肝炎的治疗提供了新依据。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 乙肝e抗原乙型肝炎病毒 抗原表位预测 B细胞线性表位

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TMEM 16A在胃腺癌中的表达及意义 被引量：9

4

作者 杨军 刘妮 +5 位作者 康安静 靳耀锋 王军宁 苏宝山 陈晓黎 李宗芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期794-797,共4页

目的探讨Ca2+激活的氯离子通道(CaCC)蛋白TMEM16A在胃癌中的表达和意义。方法收集72例胃癌标本,采用免疫组织化学SP法检测TMEM16A的表达,以癌旁胃粘膜组织和非肿瘤胃粘膜组织作为对照,胃间质瘤组织作为阳性对照。结果TMEM16A表达于胃癌... 目的探讨Ca2+激活的氯离子通道(CaCC)蛋白TMEM16A在胃癌中的表达和意义。方法收集72例胃癌标本,采用免疫组织化学SP法检测TMEM16A的表达,以癌旁胃粘膜组织和非肿瘤胃粘膜组织作为对照,胃间质瘤组织作为阳性对照。结果TMEM16A表达于胃癌细胞胞膜和胞质内,在72例胃癌中TMEM16A呈不同程度阳性表达,在胃癌组织中TMEM16A表达的总阳性率("阳性"和"强阳性")为80.56%(58/72);而在相应的癌旁组织中TMEM16A表达的总阳性率("阳性"和"强阳性")仅为4.17%(3/72),两者之间差异显著(P<0.005)。结论 TMEM16A高表达于胃癌组织,可作为胃癌的分子诊断和靶向治疗的一个新的候选靶点。 展开更多

关键词 胃癌 Ca2+激活的氯离子通道 TMEM16A 免疫组织化学

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一种新型胃癌组织学分型、分级-评分系统 被引量：7

5

作者 杨军 刘妮 +3 位作者 康安静 李宗芳 苏宝山 陈晓黎 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期159-162,共4页

目的提出一种新型胃癌组织学分型、分级-评分系统,为胃癌的生物学行为和预后判断提供评估指标。方法根据胃癌高度异质性的组织学特征、参照WHO分型方案和现阶段对胃癌分化程度与生物学行为的研究成果,提出新型胃癌组织学分型、分级-评... 目的提出一种新型胃癌组织学分型、分级-评分系统,为胃癌的生物学行为和预后判断提供评估指标。方法根据胃癌高度异质性的组织学特征、参照WHO分型方案和现阶段对胃癌分化程度与生物学行为的研究成果,提出新型胃癌组织学分型、分级-评分系统。按照胃癌不同组织学结构所占面积的主次将其分为主要型和次要型进行诊断和评分,最后将评分相加的总和作为胃癌的总评分。该文采用这一系统对216例进展期胃癌患者病理标本进行评分,分析其与TNM分期的相关性。结果随着胃癌组织学分级-评分的增高,胃癌的TNM分期也随之增加,且两者之间关系密切(P<0.05)。结论新型胃癌组织学分型、分级-评分系统的提出,为胃癌的生物学行为和预后的判断提供了新的思路和指标。 展开更多

关键词 胃肿瘤 病理诊断 组织学分型 组织学分级-评分 预后

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宫颈癌中EZH2的表达与细胞增殖和血管生成的关系 被引量：8

6

作者 刘莹 高庆 +5 位作者 高艳娥 常黎华 张卫华 董小章 杨军 李牧 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期580-584,共5页

目的检测果蝇zeste基因增强子2(EZH2)、增殖细胞核抗原(Ki67)和微血管密度在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈癌组织中的表达,探讨EZH2在宫颈癌发生发展中的作用及其与临床特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测EZH2、Ki67和CD3... 目的检测果蝇zeste基因增强子2(EZH2)、增殖细胞核抗原(Ki67)和微血管密度在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈癌组织中的表达,探讨EZH2在宫颈癌发生发展中的作用及其与临床特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测EZH2、Ki67和CD34在20例正常宫颈、35例CIN和50例宫颈癌组织中的表达,并分析EZH2与宫颈癌患者临床特征、Ki67和CD34之间的关系。结果 EZH2染色主要位于细胞核,在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中的阳性表达阳性率分别为15.0%、20.0%、40.0%、66.7%和70.0%,呈上升趋势,组间比较有统计学差异(P<0.01)。EZH2与细胞增殖和血管生成、淋巴结转移呈显著相关性(P<0.05)。EZH2表达阳性率随分化程度的增高而降低,组间比较有统计学差异(P<0.05),但与患者的年龄、临床分期均无关(P>0.05)。结论 EZH2与肿瘤细胞的增殖活性有关,可能在宫颈癌的发展、浸润、转移和血管生成中起重要作用。 展开更多

关键词 果蝇zeste基因增强子2(EZH2) 增殖细胞核抗原(Ki67) CD34 宫颈癌 微血管密度

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人尿道狭窄瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β_1的表达及意义 被引量：9

7

作者 程伟 孙润芹 +1 位作者 呼冬利 赵世平 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期207-208,共2页

目的探讨人尿道瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法和VG染色方法检测了16例尿道狭窄患者及6例正常人尿道组织中的TGF-β1表达和胶原蛋白含量。结果尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1... 目的探讨人尿道瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法和VG染色方法检测了16例尿道狭窄患者及6例正常人尿道组织中的TGF-β1表达和胶原蛋白含量。结果尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1蛋白表达较强,阳性表达率100%,且其表达主要集中在瘢痕成纤维细胞、巨噬细胞及血管内皮细胞的胞浆和胞膜;而正常尿道组织中TGF-β1表达较弱,阳性表达率仅为33.3%。两组比较差异有显著性(P<0.05)。VG染色结果显示尿道瘢痕组织中胶原纤维染色密集,成束状排列;而正常尿道组织胶原纤维染色淡,成网状排列。结论TGF-β1和胶原蛋白与尿道瘢痕形成关系密切,抑制TGF-β1过度表达将有助于预防和减轻尿道狭窄的发生。 展开更多

关键词 尿道瘢痕 转化生长因子Β1 胶原蛋白 免疫组织化学

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抗HPV16L1IgY抗体的制备及活性检测 被引量：8

8

作者 杨军 张明娟 +3 位作者 强磊 苏宝山 王一理 司履生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期324-327,332,共5页

目的制备出高特异性的抗HPV16L1IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法。方法用纯化HPV16L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法... 目的制备出高特异性的抗HPV16L1IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法。方法用纯化HPV16L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法通过对转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中L1蛋白的检测评价IgY抗体的特异性。结果3次免疫之后,IgY抗体效价达到1:10240,同时可特异性与转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中EGFP-HPV16L1结合。结论采用HPV16L1蛋白免疫母鸡,成功获得了较高效价的特异性IgY抗体,并可用于HPV16L1蛋白的细胞学检测,为IgY抗体在免疫组织化学检中的应用提供实验依据。 展开更多

关键词 人头瘤病毒16型 鸡蛋黄 IGY

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甲亢患者^(131)碘治疗前心理健康水平与人格分析 被引量：10

9

作者 何长武 黄莺 +1 位作者 屈伟 王社教 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期67-68,共2页

目的:评估甲状腺功能亢进症(甲亢)患者131碘治疗前心理健康状况及人格特征,分析其与甲亢发病的关系。方法:采用症状自评量表(SCL-90)、艾克森人格问卷(EPQ)对48例131碘治疗前甲亢患者(甲亢组)进行测量并与40例正常成人(对照组)比较。结... 目的:评估甲状腺功能亢进症(甲亢)患者131碘治疗前心理健康状况及人格特征,分析其与甲亢发病的关系。方法:采用症状自评量表(SCL-90)、艾克森人格问卷(EPQ)对48例131碘治疗前甲亢患者(甲亢组)进行测量并与40例正常成人(对照组)比较。结果:甲亢组SCL-90在F1(躯体化)、F2(强迫)、F3(人际关系敏感)、F4(抑郁)、F5(焦虑)和F10(其他)因子分显著高于对照组(P<0.05),而F6(敌对)、F7(恐怖)、F8(偏执)和F9(精神病性)因子分和总分及阳性项目数与对照组比较差异有非常显著性(P<0.01)。EPQ测量:甲亢组的精神度(P)和神经质(N)分值显著高于对照组(P<0.05或<0.01),甲亢患者多属于抑郁质(内向不稳定型)人格,而对照组多属于多血质(外向稳定型)和黏液质(内向稳定型)人格特质。结论:甲亢患者总体心理健康状况较差;内向不稳定型人格,神经质的人格特征与甲亢的发病有关。 展开更多

关键词 甲状腺功能亢进症 心理健康 人格特质

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导向激光捕获显微切割技术在贲门腺癌差异蛋白质组学的应用研究 被引量：4

10

作者 程妍 张军 +4 位作者 张蓉 刘冬 陈晓黎 谢丹红 龚均 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期557-561,564,共6页

目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切... 目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切片的镜下组织学特点,改进常规LCM,建立在染色切片指引下分离细胞的NLCM技术,并通过双向凝胶电泳分析对该技术进行评价。结果染色剂对蛋白质的影响大于700mL/L乙醇固定剂;光镜下在不染色的组织切片上,贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状上皮细胞都有其各自的形态特异性,易于辨认;NLCM可以准确纯化贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状细胞;LCM的苏木素染色贲门腺癌细胞(A组)、NLCM的无染色贲门腺癌细胞(B组)和未切割的新鲜贲门腺癌组织(C组)的双向电泳表达图谱非常相似。各组蛋白质点的数量之间差异无统计学意义(P>0.05)。A组碱性端蛋白等点聚焦较差,部分蛋白质点的表达量减低或消失,B组双向电泳表达图谱蛋白质点分离较好。结论 NLCM不但可以快速、准确地将贲门腺癌及其癌前病变细胞进行分离,而且有效避免了染色剂对蛋白质提取质量的影响,是一项适用于贲门腺癌蛋白质组学研究的样品制备方法。 展开更多

关键词 贲门腺癌 激光捕获显微切割 蛋白质组 双向凝胶电泳

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HER-2表达与乳腺癌不同方案新辅助化疗疗效的关系 被引量：5

11

作者 代志军 王西京 +5 位作者 李宗芳 康华峰 苏宝山 刘小旭 薛锋杰 薛兴欢 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1397-1399,共3页

目的探讨HER-2表达与乳腺癌不同方案新辅助化疗疗效的关系,为HER-2阳性患者筛选有效的化疗方案。方法应用CMF、CEF、NEF3种化疗方案对132例局部进展期乳腺癌进行新辅助化疗。所有患者完成2个周期新辅助化疗后评价疗效,免疫组织化学SP法... 目的探讨HER-2表达与乳腺癌不同方案新辅助化疗疗效的关系,为HER-2阳性患者筛选有效的化疗方案。方法应用CMF、CEF、NEF3种化疗方案对132例局部进展期乳腺癌进行新辅助化疗。所有患者完成2个周期新辅助化疗后评价疗效,免疫组织化学SP法检测标本中HER-2的表达。结果CMF、CEF、NEF三组总有效率分别为39.5%(17/43)、54.3%(25/46)和72.1%(31/43)。常见不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应和脱发。CMF、CEF和NEF三组白细胞下降发生率分别为34.9%(15/43)、58.7%(27/46)、60.5%(26/43),CMF组明显低于其余两组。三组其他不良反应均无显著性差异(P>0.05)。CMF、CEF、NEF三组患者化疗前后HER-2阳性表达率均无显著性差异。CMF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为21.1(4/19)、54.2(13/24),差异有显著性(P<0.05);CEF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为42.9(9/21)、64.0(16/25),NEF组HER-2阳、阴性患者总有效率分别为65.0(13/20)、78.3(18/23),差异无显著性(P>0.05)。结论新辅助化疗对乳腺癌HER-2表达无影响,HER-2阳性患者对CMF方案不敏感,对CEF、NEF较敏感。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 新辅助化疗 HER-2

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人Na^+、K^+-ATPase α1亚单位M1～M2膜外区片段结合活性的研究 被引量：3

12

作者 张明娟 杨军 +3 位作者 朱参战 段宗明 牛小麟 王蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期13-15,19,共4页

目的研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1～M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力。方法采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析。然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能... 目的研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1～M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力。方法采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析。然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能力。结果人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力。3H-ouabain与Na+,K+-ATPaseHES1衍生物结合的平衡解离常数为24.58nmol·L-1,受体密度为492.43fmol·mg-1蛋白。IC50=3.078×10-7mol·L-1。结论人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物具有与哇巴因结合的活性,为其作为一种新型药物奠定实验基础。 展开更多

关键词 Na^+ K^+-ATPase α1亚单位 膜外区 哇巴因

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哇巴因对大鼠血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响 被引量：2

13

作者 张明娟 张美程 +3 位作者 张超英 杨军 朱参战 段宗明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期960-965,共6页

目的探讨哇巴因对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内Ca2+浓度的影响。方法用组织块贴壁法进行大鼠胸主动脉VSMCs原代培养,用免疫组织化学方法进行细胞鉴定,采用放射自显影术检测哇巴因对大鼠胸主动脉VS... 目的探讨哇巴因对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内Ca2+浓度的影响。方法用组织块贴壁法进行大鼠胸主动脉VSMCs原代培养,用免疫组织化学方法进行细胞鉴定,采用放射自显影术检测哇巴因对大鼠胸主动脉VSMCs的结合能力,采用Fluo 3-AM(钙离子荧光探针)法研究哇巴因在短时间内对VSMCs细胞内Ca2+浓度的影响,探讨不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段的拮抗作用。结果(1)放射自显影术检测结果显示,哇巴因与VSMCs间有一定的结合能力。在0.1~100 nmol/L浓度范围,随着哇巴因浓度的增加,VSMCs与哇巴因的结合能力增加;(2)Fluo 3-AM检测VSMCs内Ca2+浓度结果显示:不同浓度的哇巴因在短时间内能够引起VSMCs内Ca2+浓度的变化。在0~3200 nmol/L浓度范围,细胞内Ca2+离子浓度会随着哇巴因浓度的增加呈现出逐渐升高的趋势;(3)不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用。结论哇巴因引起的细胞内高钙是高哇巴因高血压发生的细胞学基础,钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用,为进一步探讨哇巴因的作用机制结高血压的治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 钠泵 血管平滑肌细胞 哇巴因 CA2+

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芳香化酶P450、ERβ在宫颈癌组织的表达及临床意义 被引量：2

14

作者 赵恒芳 刘孜 +2 位作者 康安静 苏进 代丽 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期505-508,共4页

目的探讨芳香化酶P450、ERβ在正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织的表达差异,进而探讨其临床意义。方法对西安交通大学医学院第二附属医院2004年至2008年手术切除的正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织存档蜡块标本各30例,用免疫组化S... 目的探讨芳香化酶P450、ERβ在正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织的表达差异,进而探讨其临床意义。方法对西安交通大学医学院第二附属医院2004年至2008年手术切除的正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织存档蜡块标本各30例,用免疫组化SP法检测其表达。结果芳香化酶P450在正常宫颈组织、癌周组织和宫颈癌组织的表达率分别为0%(0/30)、0%(0/30)和36.7%(11/30),经比较有显著性差异(P<0.05),而正常宫颈组与癌周组织组的表达无显著性差异(P>0.05)。ERβ在正常宫颈组织、癌周组织和宫颈癌组织的表达率分别为73%(22/30)、70%(21/30)和36.7%(11/30),相比较有显著性差异(P<0.05),而正常宫颈组织与癌周组织的表达无显著性差异(P>0.05)。结论芳香化酶P450在宫颈癌组织的阳性表达可能参与宫颈癌的发生;ERβ在宫颈癌组织的阳性表达率低,可作为预测宫颈癌变及宫颈癌预后良好的一项参考指标。 展开更多

关键词 宫颈癌 芳香化酶P450 ERΒ 免疫组织化学法

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涎腺肿瘤中Survivin蛋白的表达及意义 被引量：3

15

作者 齐红 王康敏 +1 位作者 梁永强 杨荔琳 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期82-85,102,共5页

目的探讨涎腺肿瘤中Survivin蛋白的表达情况,明确其表达与涎腺肿瘤的发生、发展及临床病理的关系。方法制备组织芯片,应用pictureTM法进行免疫组化染色。结果①Survivin蛋白在涎腺良性肿瘤中的阳性表达率显著低于交界性肿瘤、恶性肿瘤... 目的探讨涎腺肿瘤中Survivin蛋白的表达情况,明确其表达与涎腺肿瘤的发生、发展及临床病理的关系。方法制备组织芯片,应用pictureTM法进行免疫组化染色。结果①Survivin蛋白在涎腺良性肿瘤中的阳性表达率显著低于交界性肿瘤、恶性肿瘤及癌旁腺体中的表达(P均<0.005);交界性肿瘤与恶性肿瘤中的表达无显著性差异(P>0.05);而恶性肿瘤中的表达高于癌旁腺体中的表达,且差异有显著性(P<0.01)。②在恶性肿瘤中,低分化者的Survivin阳性表达率明显高于高分化者(P<0.0005);有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.0005);复发瘤明显高于原发瘤(P<0.05);而不同性别、年龄及不同大小的肿瘤间均无显著性差异(P>0.05)。结论Survivin蛋白表达与涎腺恶性肿瘤的发生、发展及预后有关,可作为涎腺恶性肿瘤早期诊断及预后判断的可靠指标。 展开更多

关键词 涎腺肿瘤 SURVIVIN 组织芯片 免疫组织化学

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增强型绿色荧光蛋白标记的Hela细胞株的建立 被引量：2

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作者 杨军 陈晓黎 +2 位作者 苏宝山 王一理 司履生 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期717-719,F0004,共4页

目的构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系。方法PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行... 目的构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系。方法PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性。结果PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80%Hela细胞内均可见绿色荧光。加入含G418的选择性培养基进行选择性培养,选择荧光较强的Hela细胞经有限稀释,持续筛选及克隆化培养,获得稳定表达绿色荧光的Hela细胞克隆,扩大培养并传至10代以上,将此细胞株命名为Hela-EGFP。激光共聚焦显微镜观察发现:在蓝光(-395nm)激发时,Hela-EGFP细胞绿色荧光激发波长为395nm,最大发射峰为509nm。结论Hela-EGFP细胞株具备稳定表达EGFP的能力,为实时可视化进行宫颈癌侵袭转移机制的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 增强型绿色荧光蛋白 宫颈癌 HELA细胞

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C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及意义 被引量：2

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作者 周任 刘勇 +4 位作者 王睿智 吕健 王康敏 赵世平 师蔚 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期203-204,219,共3页

目的探讨C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与肿瘤恶性程度之间的关系。方法应用免疫组织化学方法检测40例脑胶质瘤组织标本中的C-myc蛋白表达情况。结果C-myc蛋白阳性染色主要定位于脑胶质瘤细胞的胞浆或胞核中,其表达强度与脑... 目的探讨C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与肿瘤恶性程度之间的关系。方法应用免疫组织化学方法检测40例脑胶质瘤组织标本中的C-myc蛋白表达情况。结果C-myc蛋白阳性染色主要定位于脑胶质瘤细胞的胞浆或胞核中,其表达强度与脑胶质瘤的组织学分级相关,随着脑胶质瘤恶性程度的增高,C-myc的表达强度和阳性细胞百分比也随之逐渐增加,各级之间均有显著性差异(P<0.05)。结论C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中呈过度表达,并与脑胶质瘤的恶性程度密切相关。 展开更多

关键词 胶质瘤 C-MYC蛋白 免疫组织化学

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抗哇巴因抗体IgY的制备及其应用 被引量：1

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作者 张明娟 杨军 +1 位作者 段宗明 强磊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1358-1360,共3页

目的制备高度特异性的抗哇巴因多克隆抗体,并将其应用于组织中内源性哇巴因的免疫学检测。方法采用哇因-牛血清蛋白耦联物作为免疫原免疫母鸡。免疫后1周收集鸡蛋。鸡蛋黄采用PEG-6000方法进行纯化分离,并采12%SDS-PAGE分析其纯度。酶... 目的制备高度特异性的抗哇巴因多克隆抗体,并将其应用于组织中内源性哇巴因的免疫学检测。方法采用哇因-牛血清蛋白耦联物作为免疫原免疫母鸡。免疫后1周收集鸡蛋。鸡蛋黄采用PEG-6000方法进行纯化分离,并采12%SDS-PAGE分析其纯度。酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价。然后应用IgY的竞争性酶联免疫吸附法检测哇巴水平,并将IgY应用于大鼠肾上腺组织中内源性哇巴因的检测。结果IgY抗体效价在第二次免疫后迅速升高,最高效达到1:10240,并持续至少4周左右。竞争性酶联免疫吸附法检测哇巴因的批内差异及批间差异分别为2.03%、2.34%免疫组化结果显示内源性哇巴因主要分布于大鼠肾上腺皮质的网状带,髓质未见明显阳性颗粒。结论免疫母鸡简单快速,并且高效价抗体持续时间较长。同时本研究结果提示IgY抗体可用于常规免疫学检测。 展开更多

关键词 哇巴因 IGY 抗体制备 抗体

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HT-1型组织芯片仪的研制和应用 被引量：1

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作者 杨军 苏宝山 +1 位作者 赵世平 强磊 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期128-130,F0003,共4页

目的研制简单、快捷、使用方便的组织芯片仪,验证其性能。方法根据组织芯片制备原理设计HT-1型组织芯片仪,该组织芯片仪由阵列孔受体蜡块成型器、组织挖取器、负压包埋仪和操作支架组成。采用一次成型技术,仅一次操作即可快速制备所需... 目的研制简单、快捷、使用方便的组织芯片仪,验证其性能。方法根据组织芯片制备原理设计HT-1型组织芯片仪,该组织芯片仪由阵列孔受体蜡块成型器、组织挖取器、负压包埋仪和操作支架组成。采用一次成型技术,仅一次操作即可快速制备所需的阵列孔受体蜡块;采用负压包埋技术,既可将组织样本精确定位并固定于同一水平面,又可迅速抽除组织样本与受体蜡块阵列孔间残留气泡。结果使用HT-1型组织芯片仪,可在数秒之内制备高质量阵列孔受体蜡块,构建一个容量为56例组织样本的TMAs蜡块仅需不到20min,且组织样本排列规则,无漂浮、倒伏和移位现象,也无气泡残留。经HE及免疫组织化学染色证实,组织芯片中组织样本排列规则、结构完整、背景清晰,脱片率低(<1.0%±1.1%)。结论HT-1型组织芯片仪是一款结构简单、使用方便、易于操作的高性价比组织芯片仪。 展开更多

关键词 生物芯片 组织阵列(组织芯片) 组织阵列仪

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新型EGFP标记的杆状病毒转移载体的构建及EGFP的制备 被引量：2

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作者 杨军 王一理 司履生 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期433-436,459,共5页

目的构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP。方法用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转... 目的构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP。方法用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转化E.coliDH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Ac-EGFP;感染Sf-9昆虫细胞;利用激光共聚焦显微镜和SDS-PAGE观察并检测EGFP的表达。非变性法纯化EGFP。结果荧光显微镜和激光共聚焦显微镜证实感染的Sf-9细胞可表达EGFP;通过SDS-PAGE获得的EGFP,大小为27ku。结论重组pFB-EGFP载体具备表达EGFP的能力,为分子生物学研究提供了一种新型可表达EGFP融合蛋白的昆虫杆状病毒表达载体。 展开更多

关键词 昆虫杆状病毒表达系统 增强型绿色荧光蛋白

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