西安市更年期妇女健康状况调查分析 被引量：19

1

作者 林永洁 李芬 +1 位作者 张剑萍 王良红 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期110-114,共5页

目的调查分析更年期妇女生理心理健康状况对更年期有关知识的认知情况及其影响因素。方法采用随机整群抽样法,在西安市6个区抽取2500名年龄在40-60岁的妇女为调查对象。结果①获取有效调查问卷2023份,年龄(47.38±5.429)岁,初潮年龄... 目的调查分析更年期妇女生理心理健康状况对更年期有关知识的认知情况及其影响因素。方法采用随机整群抽样法,在西安市6个区抽取2500名年龄在40-60岁的妇女为调查对象。结果①获取有效调查问卷2023份,年龄(47.38±5.429)岁,初潮年龄为(14.31±1.74)岁(9-19岁),自然绝经年龄为(48.9±3.54)岁;②约半数受调查者为子女的教育、工作、婚姻、经济困难、住房紧张而担忧,并且对更年期存在认知不足;③更年期症状发生率为54.9%,不同年龄组、不同职业组更年期症状发生率均有显著性差异,分别为:χ2=226.14,P<0.005和χ2=39.043,P<0.005。更年期症状与年龄增长呈正相关(r=0.333,P<0.01),与受教育程度高、收入高及参加社会活动多呈负相关(r=-0.096,P<0.001;r=-0.088,P<0.001;r=-0.069,P<0.01);④调查对象中患骨关节疾病者1 025例(50.7%),其中颈椎疾患667例,占首位,发生骨折的人数占9.6%,更年期症状与骨折发生及骨关节疾患具有显著的相关性(r=0.067,P<0.01;r=0.249,P<0.01)。结论更年期症状的发生与年龄呈正相关,与收入、文化程度及妇女参加社会活动多、接受培训多呈负相关。 展开更多

关键词 更年期妇女 调查 健康状况 发生率

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西安市城市社区老年人生活质量的调查 被引量：28

2

作者 欧阳雁 胡森科 赵紫玉 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期370-372,共3页

目的调查西安市城市社区老年人生活现状及生活质量。方法采用生活质量调查表(QOL),以西安市两个社区老年群体为对象,对躯体、心理、社会、物质及总体生存质量进行调查。结果男性、经济收入高的老年群体心理及社会功能评分较高;低年龄组... 目的调查西安市城市社区老年人生活现状及生活质量。方法采用生活质量调查表(QOL),以西安市两个社区老年群体为对象,对躯体、心理、社会、物质及总体生存质量进行调查。结果男性、经济收入高的老年群体心理及社会功能评分较高;低年龄组老年人躯体和社会功能显著高于高年龄组老年人;有配偶、与家人同住、积极参加社会活动、有兴趣爱好及享有医疗保险的老年人,其总体生存质量评分较高。文化程度高的老年人社会功能评分显著高于文化程度低的群体;且不良事件的发生明显降低老年人的生活质量。80%以上的老年人对生活环境满意。老年人的慢性病患病率最高的是高血压。结论西安市城市社区老年人生活质量良好,其健康状况、家庭氛围、文化水平、经济收入和婚姻状况是影响老年人生活质量的重要因素。 展开更多

关键词 城市社区 老年人 生活质量

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干燥综合征腮腺核素动态显像的影像特征及应用价值 被引量：3

3

作者 张芬茹 施秉银 +2 位作者 李积厚 薛建军 高信曜 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2006年第1期144-146,共3页

目的探讨干燥综合征腮腺核素动态显像的影像特征及应用价值。方法所有患者均行腮腺99TcmO4-核素和VitC负荷动态显像,并进行腮腺时间-放射性曲线(TRC)分析。结果10例正常对照者双侧腮腺核素动态显像的系列影像结果与TRC均正常,40例干燥... 目的探讨干燥综合征腮腺核素动态显像的影像特征及应用价值。方法所有患者均行腮腺99TcmO4-核素和VitC负荷动态显像,并进行腮腺时间-放射性曲线(TRC)分析。结果10例正常对照者双侧腮腺核素动态显像的系列影像结果与TRC均正常,40例干燥综合征患者中,显像结果异常者34例,异常率85.0%;排泄率(14.5±7.2)%,与正常组(46.0±13.0)%比较,P<0.01。其中双侧腮腺不显影即功能严重受损11例(27.5%),双侧平行性功能轻度和中度受累19例(47.5%),双侧腮腺非一致性功能异常4例(10.0%),双侧腮腺正常显影6例(15.0%)。结论核素动态显像是诊断干燥综合征及判断腮腺功能最有价值的方法。 展开更多

关键词 腮腺 干燥综合征 放射性核素显像

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EGFRvIII/PEP-3 cDNA与HBcAg重组基因原核表达载体的构建、表达与免疫分析 被引量：2

4

作者 段小艺 王健生 +3 位作者 郭佑民 韩俊丽 王全颖 杨广笑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期21-24,共4页

目的:构建EGFRvIII与HBcAg重组基因的原核表达质粒,进行原核表达、纯化,观察表达蛋白的免疫原性和抗原性。方法:通过双酶切从pGEM-TEasy/PEP-3载体获得编码EGFRvIII突变区的cDNA片段,插入去除了主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中... 目的:构建EGFRvIII与HBcAg重组基因的原核表达质粒,进行原核表达、纯化,观察表达蛋白的免疫原性和抗原性。方法:通过双酶切从pGEM-TEasy/PEP-3载体获得编码EGFRvIII突变区的cDNA片段,插入去除了主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/c-PEP-3-c,将重组基因亚克隆于原核表达载体pET28a(+)中,通过IPTG诱导蛋白表达,利用Ni2+-NTA亲和层析法对融合蛋白进行纯化;用融合蛋白常规免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA检测小鼠血清中抗体的滴度。结果:经酶切鉴定、序列测定证实融合基因已插入pET28a(+)载体中,融合基因序列与设计序列完全一致。原核表达后表达量占沉淀全菌蛋白的56%,纯化产物占总蛋白的92%,浓度约8g/L。BALB/c小鼠经4次免疫后,其血清中中和抗体的滴度可达1∶16000,第6次免疫后血清中中和抗体的滴度达到1∶2.56×105,抗PEP-3抗体滴度达到1∶1.28×105,抗HBcAg抗体滴度小于1∶4×103。结论:融合基因PEP-3-HBcAg在大肠杆菌中可获得高效表达,表达的融合蛋白可以诱导小鼠产生高滴度和高特异性中和抗体,从而为高表达EGFRvIII恶性肿瘤基因工程疫苗的研究奠定基础。 展开更多

关键词 重组基因 EGFRvⅢ HBCAG 原核表达 免疫原性

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Apoptin原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

5

作者 王健生 张明鑫 +5 位作者 段小艺 王峥 周苏娜 张广健 王全颖 杨广笑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期496-498,503,共4页

目的构建Apoptin的原核表达载体,并制备抗原物质Apoptin融合蛋白。方法在获得Apoptin融合基因的基础上,成功构建了Apoptin的高效原核表达载体pET-28a(+)-Apoptin,将该质粒转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达... 目的构建Apoptin的原核表达载体,并制备抗原物质Apoptin融合蛋白。方法在获得Apoptin融合基因的基础上,成功构建了Apoptin的高效原核表达载体pET-28a(+)-Apoptin,将该质粒转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果转化有Apoptin的原核表达载体pET-28a(+)-Apoptin的大肠杆菌E.coliBL21(DE3)经IPTG诱导后,经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约17 000的位置出现目的蛋白条带,大小与Apoptin融合蛋白一致。结论Apoptin原核表达载体pET-28a(+)-Apoptin能够表达出Apoptin融合蛋白,为进一步的Apoptin研究和制备Apoptin抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 APOPTIN 原核表达载体 pET-28a(+) 大肠杆菌

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凋亡素原核表达载体的构建、表达与抗体制备

6

作者 王健生 张明鑫 +3 位作者 段小艺 莫非 王全颖 杨广笑 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1405-1407,共3页

目的构建凋亡素基因的原核表达载体,进行表达并制备表达蛋白的多克隆抗体。方法构建凋亡素pGEM-T/Apoptin载体,并将凋亡素基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,将该质粒转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达... 目的构建凋亡素基因的原核表达载体,进行表达并制备表达蛋白的多克隆抗体。方法构建凋亡素pGEM-T/Apoptin载体,并将凋亡素基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,将该质粒转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。用表达蛋白常规免疫Balb/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中抗体的滴度。结果凋亡素基因被成功的克隆至pET-28a(+),表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子量约17000的位置出现目的蛋白条带,大小与预期结果一致,Balb/c小鼠经5次免疫后,得到了滴度为1:5×105血清抗体。结论凋亡素原核表达载体的成功构建和多克隆抗体的制备为进一步研究凋亡素的功能和凋亡素的应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 凋亡素蛋白 原核表达 抗体制备

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血府逐瘀汤对肋骨骨折伴血胸患者凝血功能的影响及疗效观察 被引量：28

7

作者 张广健 高蕊 +2 位作者 邱根全 付军科 金鑫 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期632-635,共4页

目的观察血府逐瘀汤对肋骨骨折伴血胸患者凝血功能的影响及对血胸的治疗效果。方法肋骨骨折伴血胸患者随机、对照分组后,分别治疗。常规治疗组30例给予西药常规疗法,血府逐瘀汤组31例在此基础上加用血府逐瘀汤内服。两组均于入院后1、7... 目的观察血府逐瘀汤对肋骨骨折伴血胸患者凝血功能的影响及对血胸的治疗效果。方法肋骨骨折伴血胸患者随机、对照分组后,分别治疗。常规治疗组30例给予西药常规疗法,血府逐瘀汤组31例在此基础上加用血府逐瘀汤内服。两组均于入院后1、7、14 d进行D-二聚体(D-Di)、凝血4项检查以观察患者凝血功能改变;同时行CT检查,评估其对血胸的疗效。结果骨折后两组患者血液第14天的D-Di水平与入院第1天比较,明显降低(P<0.05)。而且,血府逐瘀汤组显著低于常规治疗组(P<0.05)。入院14 d后,两组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)较入院时均有所延长,纤维蛋白原(FIB)随之减低。胸部CT检查评估血胸疗效,两组总有效率无显著性差异(100%、96.67%,P>0.05)。但是血府逐瘀汤组患者的平均住院天数显著缩短[(13.25±1.48)d、(18.79±1.69)d,P<0.05]。结论血府逐瘀汤可改善血胸患者出现的血液高凝状态;同时,常规疗法辅以血府逐瘀汤既确保临床疗效,又显著缩短血胸患者的住院时间,对临床工作有一定的指导意义。 展开更多

关键词 肋骨骨折 血胸 血府逐瘀汤 D-二聚体 高凝状态 CT检查

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脑弥漫性轴索损伤实验装置的研制及动物模型的建立 被引量：36

8

作者 刘晓斌 宋锦宁 +2 位作者 陈景宇 张芬茹 刘守勋 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期595-598,共4页

目的自制一种脑弥漫性轴索损伤(DAI)装置并成功建立DAI动物模型。方法自制头颅瞬间旋转损伤装置,使大鼠头颅在瞬间(<3 ms)旋转90°造成剪切损伤。观察损伤后大鼠的生命体征及行为学改变;于伤后2、6、12、24、36、72 h及10 d分别... 目的自制一种脑弥漫性轴索损伤(DAI)装置并成功建立DAI动物模型。方法自制头颅瞬间旋转损伤装置,使大鼠头颅在瞬间(<3 ms)旋转90°造成剪切损伤。观察损伤后大鼠的生命体征及行为学改变;于伤后2、6、12、24、36、72 h及10 d分别处死损伤组动物,制备脑石蜡切片,行镀银及HE染色,光镜下观察神经轴索变化。结果伤后大鼠均即刻出现原发昏迷,其中2只于损伤后20 min内死亡,余持续时间1-30 min不等;伤后大鼠呼吸节律紊乱,瞳孔对光反射减弱或消失,醒后均有程度不等的反应性下降,肢体活动迟缓;肉眼可见广泛蛛网膜下腔出血或脑室出血;光镜下可见皮髓交界区、胼胝体区、脑干、小脑白质等部位的神经轴索有不同程度的肿胀、断裂、轴索球形成,后期有小胶质细胞增生,局部呈巢样聚集。结论本装置能造成大鼠脑DAI,且具有简便、可控、确切的特点,适合进行中、小型动物DAI模型的实验研究。 展开更多

关键词 弥漫性轴索损伤 实验装置 动物模型 大鼠

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肿瘤患者骨外软组织摄取骨显像剂的临床意义 被引量：9

9

作者 张芬茹 许建林 +2 位作者 周建平 段小艺 薛建军 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2007年第7期1076-1079,共4页

目的探讨肿瘤患者骨外软组织异常摄取骨显像剂的临床意义。方法将全身骨显像示软组织异常摄取骨显像剂99Tcm-MDP的20例患者显像结果与其手术病理和(或)CT、MRI等影像检查结果进行对照,分析异常摄取99Tcm-MDP的临床意义。结果20例患者中... 目的探讨肿瘤患者骨外软组织异常摄取骨显像剂的临床意义。方法将全身骨显像示软组织异常摄取骨显像剂99Tcm-MDP的20例患者显像结果与其手术病理和(或)CT、MRI等影像检查结果进行对照,分析异常摄取99Tcm-MDP的临床意义。结果20例患者中肺摄取7例,其中弥漫性摄取1例为转移癌,局灶性摄取6例(3例肺癌,1例乳癌肺转移,1例肺错构瘤,1例肺炎性假瘤);胸膜弥漫性摄取3例均为转移癌,其中肺癌转移2例,乳癌转移1例;脑局灶性摄取5例,均为脑转移癌;乳腺摄取2例,原发乳癌和乳腺癌复发各1例;鼻咽部摄取2例均为鼻咽癌;肾脏摄取1例为肾癌。各种原发癌和转移癌对骨显像剂的异常摄取占90%(18/20);摄取部位以肺脏、胸膜及头部居多,占85%。结论骨外软组织对骨显像剂99Tcm-MDP的异常摄取主要见于原发癌或转移癌,具有一定的临床意义,值得关注。 展开更多

关键词 骨骼 放射性核素显像 ^99Tc^m-亚甲基二磷酸盐 软组织分布

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人肾透明细胞癌中EGFRvⅢ的表达及意义 被引量：6

10

作者 段小艺 王健生 +1 位作者 张明鑫 夏鹏 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期441-442,449,共3页

目的检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在肾透明细胞癌组织中的表达,探讨其与肾透明细胞癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色和图像分析法检测80例肾透明细胞癌和24例正常肾组织中EGFRvⅢ的表达水平,进行统计学分析、... 目的检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在肾透明细胞癌组织中的表达,探讨其与肾透明细胞癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色和图像分析法检测80例肾透明细胞癌和24例正常肾组织中EGFRvⅢ的表达水平,进行统计学分析、比较。结果肾透明细胞癌组织和正常肾组织EGFRvⅢ的表达阳性率分别为46%、8%。通过半定量分析,二者EGFRvⅢ平均灰度值分别为148.49±13.05和155.65±14.86,其差异具有统计学意义(t=2.13,P=0.04);男、女患者EGFRvⅢ的平均灰度值分别为149.01±13.70和147.40±11.76,二者无显著性差异(t=0.54,P=0.59);EGFRvⅢ表达与年龄无显著相关性(r=0.01,P=0.92)。结论EGFR-vIII在肾透明细胞癌组织中存在高表达,与肾透明细胞癌的发生、发展有一定关系。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ) 肾透明细胞癌 免疫组织化学 图像分析

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原发性肺癌^(99m)Tc-MIBI显像与多药耐药蛋白表达的关系 被引量：4

11

作者 段小艺 王健生 +1 位作者 张芬茹 郭佑民 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期314-316,共3页

目的:探讨原发性肺癌对99mTc-MIBI摄取和滞留与三种多药耐药蛋白表达的关系及临床意义。方法:对26例原发性肺癌患者静脉注射925MBq99mTc-MIBI后15min和120min分别行SPECT显像,采用感性趣区(ROI)技术计算早期和延迟相肿瘤/非肿瘤(T/N)比... 目的:探讨原发性肺癌对99mTc-MIBI摄取和滞留与三种多药耐药蛋白表达的关系及临床意义。方法:对26例原发性肺癌患者静脉注射925MBq99mTc-MIBI后15min和120min分别行SPECT显像,采用感性趣区(ROI)技术计算早期和延迟相肿瘤/非肿瘤(T/N)比值以及滞留率RI%。采用免疫组化法检测肺癌组织多药耐药蛋白P-gp、MRP和GSTπ表达水平,并与T/N和RI%进行相关性分析。结果:99mTc-MIBI显像阳性率为92.31%;P-gp、MRP、GSTπ表达阳性率分别为75.00%、58.33%、45.83%,三者无明显差别("2=4.273,P=0.118)。P-gp+MRP、P-gp+GSTπ、MRP+GSTπ、P-gp+MRP+GSTπ共表达阳性率分别为41.67%、37.50%、29.17%、20.83%;P-gp表达阳性组和阴性组RI%间有显著性差异(t=-2.258,P=0.034)。结论:99mTc-MIBI显像能预测肺癌组织P-gp的表达水平,为临床个体化治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 原发性肺癌 ^99MTC-甲氧基异丁基异腈 多药耐药 蛋白表达 显像

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EGFRvⅢ与HBcAg重组疫苗抗肿瘤作用的实验研究 被引量：4

12

作者 段小艺 王健生 +3 位作者 郭佑民 王鹏 王全颖 杨广笑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期600-602,共3页

目的:观察PEP-3/HBcAg融合蛋白疫苗的体内抗肿瘤作用。方法:BALB/c小鼠30只随机分成3组,分别接种PEP-3/HBcAg融合蛋白、HBcAg和生理盐水,待融合蛋白组小鼠体内抗体效价达到1:20000时终止免疫,于每只小鼠背部皮下种植阳性Renca细胞,2... 目的:观察PEP-3/HBcAg融合蛋白疫苗的体内抗肿瘤作用。方法:BALB/c小鼠30只随机分成3组,分别接种PEP-3/HBcAg融合蛋白、HBcAg和生理盐水,待融合蛋白组小鼠体内抗体效价达到1:20000时终止免疫,于每只小鼠背部皮下种植阳性Renca细胞,2×105个/只。观察融合蛋白疫苗的抗肿瘤效应。采用HE染色和免疫组织化学图像分析法检测各组肿瘤组织的坏死情况和EGFRvIII表达水平。结果:融合蛋白组、HBcAg组和生理盐水组的成瘤率分别为50%、100%和100%。生理盐水组肿瘤生长速度最快,HBcAg组次之,融合蛋白组肿瘤出现最晚,生长速度最慢。融合蛋白组成瘤小鼠肿瘤平均质量显著小于生理盐水组和HBcAg组(t=4·731,P=0·044;t=6·890,P=0·040);后两组肿瘤质量无统计学意义(t=0·024,P=0·382)。HBcAg组和生理盐水组移植瘤呈不完全小片状坏死,融合蛋白组移植瘤呈大片状坏死,伴炎细胞浸润。融合蛋白组EGFRvⅢ表达水平明显低于生理盐水组和HBcAg组(t=3·157,P=0·006;t=2·539,P=0·021),后两者EGFRvIII表达水平无统计学差异(t=0·460,P=0·651)。结论:PEP-3/HBcAg融合蛋白疫苗能诱导机体产生保护性免疫反应,并具有抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 重组疫苗 PEP-3/HBcAg融合蛋白 免疫应答 恶性肿瘤

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自发性食管破裂的诊断与外科治疗 被引量：7

13

作者 张广健 高蕊 +1 位作者 付军科 金鑫 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期181-182,共2页

回顾性分析13例自发性食管破裂患者的病例资料,总结外科诊断与治疗自发性食管破裂的经验。

关键词 食管破裂 外科手术

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抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体噬菌体单链抗体库的构建与初步筛选 被引量：4

14

作者 韩东刚 段小艺 +3 位作者 郭佑民 周琦 王全颖 杨广笑 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-29,共5页

目的构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)特异性单链抗体库,从中筛选抗EGFRvⅢ特异性单链抗体。方法用pep-3偶联载体蛋白OVA,然后免疫BALB/c小鼠从脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增重链(VH)和轻链(VL)的可变区基因片段... 目的构建抗表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)特异性单链抗体库,从中筛选抗EGFRvⅢ特异性单链抗体。方法用pep-3偶联载体蛋白OVA,然后免疫BALB/c小鼠从脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增重链(VH)和轻链(VL)的可变区基因片段。将两基因片段由编码(Gly4Ser)3的linker连在一起,并克隆入噬菌体展示表达载体pCANTAB5E中,电转化至E.coliTG1,经辅助噬菌体超感染,构建噬菌体单链抗体库。以pep-3-BSA为抗原对所建抗体库进行4轮亲和筛选,用ELISA鉴定抗体与EGFRvⅢ结合的特异性。结果经琼脂糖凝胶电泳分析,RT-PCR方法扩增的抗体VH和VL基因片段大小约350和320bp,与预期理论值相符。经重组PCR得到大小约780bp的ScFv基因片段。ScFv基因片段经双酶切后成功定向克隆到噬菌粒载体,回收后构建成库容量为5.0×106的噬菌体抗体库,噬菌体滴度为3.0×104pfu/ml。通过亲和筛选使抗EGFRvⅢ噬菌体单链抗体得到富集,第4轮为第1轮的56倍。在E.coliHB2151中实现了单链抗体的可溶性表达。SDS-PAGE结果显示抗体相对分子质量为28000左右。ELISA测定结果显示该单链抗体具有结合EGFRvⅢ的特异性。结论成功构建了噬菌体单链抗体库,筛选得到了抗EGFRvⅢ特异性噬菌体单链抗体。 展开更多

关键词 噬菌体展示技术 单链抗体 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 筛选

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Nrf2在不同肝癌细胞株中的表达及定位 被引量：2

15

作者 马仁强 张明鑫 +3 位作者 王健生 蔡惠 叶尔买克 段小艺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期608-610,共3页

目的:观察红系衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)在肝癌细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721)中的表达及分布情况。方法:应用流式细胞术测定Nrf2阳性细胞的比例,激光共聚焦观察Nrf2在3种细胞株中的定位情况,通过Westernblot测定Nrf2在不同细胞... 目的:观察红系衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)在肝癌细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721)中的表达及分布情况。方法:应用流式细胞术测定Nrf2阳性细胞的比例,激光共聚焦观察Nrf2在3种细胞株中的定位情况,通过Westernblot测定Nrf2在不同细胞胞质及胞核中的表达差异。结果:流式细胞术测定Nrf2在HepG2、Hep3B和SMMC-77213种细胞中表达率分别为99.39%、99.94%和99.98%,激光共聚焦观察到Nrf2在3种肝癌细胞株胞质胞核中均有分布,但不同细胞的分布规律各不相同,Western blot结果显示:Nrf2在HepG2中以胞质分布为主,在Hep3B中胞质、胞核分布相当,在SMMC-7721中以胞核分布为主。结论:Nrf2在3种肝癌细胞株(HepG2、Hep3B、SMMC-7721)中均有表达,且在胞质胞核中均有分布,但在不同细胞中的分布规律各不相同,为下一步探讨肝癌细胞耐药机制的相关研究奠定了基础。 展开更多

关键词 NRF2 肝癌细胞株 表达 定位

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多药耐药基因及缺氧诱导因子-1α在食管癌组织中的表达及其临床意义 被引量：2

16

作者 张广健 高蕊 +3 位作者 付军科 金鑫 张明鑫 王健生 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期724-727,共4页

目的分析食管癌多药耐药基因(MDR1)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达的相关性及探讨其与临床病理间的关系。方法应用实时定量PCR(QRT-PCR)及Western blot对34例食管癌及癌旁组织标本的MDR1及HIF-1α表达水平进行检测。结果 34例食管癌... 目的分析食管癌多药耐药基因(MDR1)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达的相关性及探讨其与临床病理间的关系。方法应用实时定量PCR(QRT-PCR)及Western blot对34例食管癌及癌旁组织标本的MDR1及HIF-1α表达水平进行检测。结果 34例食管癌组织的MDR1表达显著低于癌旁组织(P<0.05),但高于正常组织(P<0.05)。而HIF-1α在癌组织的表达水平则显著高于癌旁组织(P<0.05)。两基因表达水平存在正相关关系(P<0.01)。HIF-1α、MDR1表达均与食管癌的分化程度呈正相关。结论 MDR1、HIF-1α的表达在食管癌及癌旁组织中均明显上调。HIF-1α可能通过诱导MDR1表达导致食管癌化疗耐药。 展开更多

关键词 多药耐药基因 缺氧诱导因子 食管癌

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放疗分割剂量对食管癌细胞耐药基因表达的影响 被引量：1

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作者 张广健 高蕊 +3 位作者 张明鑫 金鑫 梁鹏 王健生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期152-153,156,共3页

目的:观察不同放疗剂量对食管癌细胞EC9706耐药基因MDR1表达水平的影响,同时分析其对细胞化疗耐药性的作用。方法:对食管癌细胞分别按常规剂量组(2 Gy/d.f)和小剂量组(1 Gy/d.f)进行分次外照射,共20次。采用实时定量PCR(QRT-PCR)和Weste... 目的:观察不同放疗剂量对食管癌细胞EC9706耐药基因MDR1表达水平的影响,同时分析其对细胞化疗耐药性的作用。方法:对食管癌细胞分别按常规剂量组(2 Gy/d.f)和小剂量组(1 Gy/d.f)进行分次外照射,共20次。采用实时定量PCR(QRT-PCR)和Western blot对外照射前后处于缺氧培养下的食管癌细胞MDR1表达水平进行检测。MTT实验评估化疗细胞抑制率。结果:照射前缺氧培养下的食管癌细胞MDR1表达水平即较对照组明显升高(P<0.05)。接受20次2 Gy/d.f照射后食管癌细胞的MDR1表达水平明显高于单纯缺氧培养组(P<0.05),但小剂量照射组的MDR1表达则明显减低(P<0.05),同时其耐药指数亦明显下降(P<0.05)。结论:同缺氧条件下进行常规剂量分次外照射相比,小剂量分次外照射可以缓解食管癌细胞的耐药程度,推测其辅助化疗疗效应较好。 展开更多

关键词 多药耐药基因 食管癌 放疗 化疗

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编码表皮生长因子受体Ⅲ型突变体PEP-3表位的cDNA的克隆 被引量：1

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作者 段小艺 王健生 +4 位作者 郭佑民 刘敏 周斌 王全颖 杨广笑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期140-142,共3页

目的克隆出针对表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)PEP-3表位的cDNA片段,为高表达EGFRvⅢ肿瘤的免疫治疗奠定基础。方法根据PEP-3的碱基序列设计出有12对互补碱基的正负引物,正负引物互为模板进行PCR扩增,制备出两端含酶切位点的PEP-3... 目的克隆出针对表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)PEP-3表位的cDNA片段,为高表达EGFRvⅢ肿瘤的免疫治疗奠定基础。方法根据PEP-3的碱基序列设计出有12对互补碱基的正负引物,正负引物互为模板进行PCR扩增,制备出两端含酶切位点的PEP-3 cDNA片段,再将扩增的PCR产物亚克隆于载体pGEM-T Easy构建重组质粒pGEM-T Easy/PEP-3。结果经限制性内切酶酶切鉴定和DNA测序证实,编码PEP-3的cDNA片段被成功扩增并亚克隆于载体pGEM-T Easy中。结论成功克隆了编码表皮生长因子受体Ⅲ型突变体PEP-3表位的cDNA片段。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体 PEP-3表位 CDNA 基因克隆

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NT4-Apoptin-HA2-TAT融合基因重组腺相关病毒的构建及鉴定 被引量：1

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作者 王健生 张明鑫 +5 位作者 刘德纯 段小艺 周苏娜 张广健 杨广笑 王全颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期754-756,共3页

目的:构建编码融合基因NT4-Apoptin-HA2-TAT的重组腺相关病毒表达载体。方法:利用限制性内切酶切相应载体后将Apoptin和HA2-TAT连入pUC19/NT4质粒,再将融合基因NT4-Apoptin-HA2-TAT亚克隆至腺相关病毒的穿梭质粒内,与辅助质粒pAAV/Ad、... 目的:构建编码融合基因NT4-Apoptin-HA2-TAT的重组腺相关病毒表达载体。方法:利用限制性内切酶切相应载体后将Apoptin和HA2-TAT连入pUC19/NT4质粒,再将融合基因NT4-Apoptin-HA2-TAT亚克隆至腺相关病毒的穿梭质粒内,与辅助质粒pAAV/Ad、腺病毒质粒pFG140共同转染HEK-293细胞,通过同源重组获得NT4-Apoptin-HA2-TAT重组腺相关病毒载体,收集病毒上清,Dot blot法测定其滴度。MTT比色法观察NT4-Apoptin-HA2-TAT重组腺相关病毒表达载体,对HepG2细胞存活率的影响。结果:经酶切及测序证实克隆出NT4-Apoptin-HA2-TAT融合基因;得到高滴度的(3.14×1015pfu/L)重组腺相关病毒表达载体。NT4-Apoptin-HA2-TAT重组腺相关病毒表达载体,对HepG2细胞有强烈的诱导凋亡作用,与对照组比较,处理组细胞的存活率明显降低。结论:通过分子克隆体外重组技术成功制备了NT4-Ap-optin-HA2-TAT重组腺相关病毒载体,为下一步的Apoptin应用于基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 NT4-Apoptin-HA2-TAT 重组腺相关病毒 肿瘤 融合基因

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三维适形放射治疗Graves眼病的临床观察 被引量：1

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作者 蒙渡 陈利红 +2 位作者 刘锐 赵东利 杨爱民 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第8期964-967,共4页

观察25例Graves眼病(甲状腺相关性眼病)患者三维适形放疗治疗的疗效。患者接受球后三维放射治疗,95%CTV DT 20 Gy/10 f,常规分割,随访期6个月～2年。症状完全改善者为24%,部分改善为40%,病情稳定为28%,病情进展为8%。总的有效率为64%。... 观察25例Graves眼病(甲状腺相关性眼病)患者三维适形放疗治疗的疗效。患者接受球后三维放射治疗,95%CTV DT 20 Gy/10 f,常规分割,随访期6个月～2年。症状完全改善者为24%,部分改善为40%,病情稳定为28%,病情进展为8%。总的有效率为64%。急性期患者症状改善较慢性期患者改善更为明显(P<0.05)。眼科学指数(OI)值<5分的患者症状改善明显好于5分≤OI值<8分及OI值≥8分的患者(P<0.05)。 展开更多

关键词 GRAVES眼病 甲状腺相关性眼病 三维适形放疗

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