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心脏传导阻滞SCN5A基因L1001Q突变体构建和功能研究
被引量：
2
1
作者
周熙惠
惠智艳
+4 位作者
史瑞明
高锦伟
梁潇
李溪
肖丹丹
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期593-597,616,共6页
目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blottin...
目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blotting技术检测突变蛋白定位和表达;全细胞膜片钳技术观察突变体钠电流。结果野生型和L1001Q突变均表达在细胞膜上,且表达量无明显变化。二者最大激活电流分别为(148.34±0.77)pA/pF和(132.59±0.96)pA/pF(P>0.05),L1001Q突变半失活电压V1/2为(-73.25±0.87)mV,较野生型正向转移约3.5mV[V1/2为(-76.71±0.73)mV,P<0.05],L1001Q突变失活后恢复时间常数较野生型稍减小,差异无统计学意义(WT tau=16.8ms,L1001Qtau=14.1ms,P>0.05)。结论 L1001Q突变未影响钠通道蛋白的表达和转运,主要通过改变钠通道门控特性引起钠通道功能减弱进而导致心脏传导阻滞。
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关键词
钠通道
SCN5A
心脏传导阻滞
膜片钳
基因突变
基因表达载体
在线阅读
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职称材料
题名
心脏传导阻滞SCN5A基因L1001Q突变体构建和功能研究
被引量：
2
1
作者
周熙惠
惠智艳
史瑞明
高锦伟
梁潇
李溪
肖丹丹
机构
西安交通大学医学院第一附属医院新生儿科 环境与疾病相关基因教育部重点实验室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期593-597,616,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30900580)~~
文摘
目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blotting技术检测突变蛋白定位和表达;全细胞膜片钳技术观察突变体钠电流。结果野生型和L1001Q突变均表达在细胞膜上,且表达量无明显变化。二者最大激活电流分别为(148.34±0.77)pA/pF和(132.59±0.96)pA/pF(P>0.05),L1001Q突变半失活电压V1/2为(-73.25±0.87)mV,较野生型正向转移约3.5mV[V1/2为(-76.71±0.73)mV,P<0.05],L1001Q突变失活后恢复时间常数较野生型稍减小,差异无统计学意义(WT tau=16.8ms,L1001Qtau=14.1ms,P>0.05)。结论 L1001Q突变未影响钠通道蛋白的表达和转运,主要通过改变钠通道门控特性引起钠通道功能减弱进而导致心脏传导阻滞。
关键词
钠通道
SCN5A
心脏传导阻滞
膜片钳
基因突变
基因表达载体
Keywords
sodium channel
SCN5A
cardiac conduction defect
patch clamp
gene mutation
gene expression vector
分类号
R54 [医药卫生—心血管疾病]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
心脏传导阻滞SCN5A基因L1001Q突变体构建和功能研究
周熙惠
惠智艳
史瑞明
高锦伟
梁潇
李溪
肖丹丹
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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