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丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及表达
1
作者
孙菊
楚雍烈
+3 位作者
姜凤良
景晓红
柴长斌
解颖馨
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期609-611,615,共4页
目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18-T vector中,酶切后再与表达载体pBV220连接,构建重组表达载体pBV220/HCV-C。...
目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18-T vector中,酶切后再与表达载体pBV220连接,构建重组表达载体pBV220/HCV-C。经鉴定后温度诱导表达,采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测核心蛋白基因的蛋白表达。结果经温度诱导后获得目的基因的非融合表达,SDS-PAGE电泳显示在14000 u处有一表达条带;Western-blot结果显示其具有HCV抗原特异性。结论丙型肝炎病毒核心蛋白基因成功表达,对临床诊断试剂和HCV基因疫苗的研制有一定的意义。
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关键词
丙型肝炎病毒
核心蛋白
pBV220载体
基因表达
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职称材料
丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
2
作者
付慧
楚雍烈
+4 位作者
张丽莉
曹美茹
成凡
茹小荣
王勇健
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期376-379,398,共5页
目的克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,...
目的克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平。结果成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达。结论成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件。
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关键词
丙型肝炎病毒
ns5a基因
基因表达
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职称材料
题名
丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及表达
1
作者
孙菊
楚雍烈
姜凤良
景晓红
柴长斌
解颖馨
机构
西安
医学院
微
生物
与免疫学
教研室
西安交通大学医学院病原生物学教研室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期609-611,615,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30470089)
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(No.2002AA21416)
文摘
目的在大肠杆菌中表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白基因片段。方法以HCV全长cDNA质粒为模板进行PCR扩增,获得366bp的核心蛋白基因片段。将其插入连接载体pMD18-T vector中,酶切后再与表达载体pBV220连接,构建重组表达载体pBV220/HCV-C。经鉴定后温度诱导表达,采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测核心蛋白基因的蛋白表达。结果经温度诱导后获得目的基因的非融合表达,SDS-PAGE电泳显示在14000 u处有一表达条带;Western-blot结果显示其具有HCV抗原特异性。结论丙型肝炎病毒核心蛋白基因成功表达,对临床诊断试剂和HCV基因疫苗的研制有一定的意义。
关键词
丙型肝炎病毒
核心蛋白
pBV220载体
基因表达
Keywords
hepatitis C virus
core protein
pBV220 vector
gene expression
分类号
R512.63 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
2
作者
付慧
楚雍烈
张丽莉
曹美茹
成凡
茹小荣
王勇健
机构
西安
医学院
生物
化学
教研室
西安交通大学医学院病原生物学教研室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期376-379,398,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30470089)
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(No.2002AA21416)
文摘
目的克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平。结果成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达。结论成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件。
关键词
丙型肝炎病毒
ns5a基因
基因表达
Keywords
hepatitis C virus （HCV）
ns5a gene
gene expression
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
丙型肝炎病毒核心蛋白基因的克隆及表达
孙菊
楚雍烈
姜凤良
景晓红
柴长斌
解颖馨
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
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职称材料
2
丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
付慧
楚雍烈
张丽莉
曹美茹
成凡
茹小荣
王勇健
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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