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转录因子KLF4在宫颈癌中的表达及意义 被引量:8
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作者 杨文婷 刘树艳 郑鹏生 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期22-25,共4页
目的探讨转录因子KLF4在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法采用组织微阵列结合免疫组织化学方法研究39例宫颈鳞癌、28例宫颈原位癌、30例正常宫颈组织中KLF4蛋白的表达及其与临床病理因素间的关系。结果KLF4蛋白在正常宫颈组织与宫颈原位癌... 目的探讨转录因子KLF4在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法采用组织微阵列结合免疫组织化学方法研究39例宫颈鳞癌、28例宫颈原位癌、30例正常宫颈组织中KLF4蛋白的表达及其与临床病理因素间的关系。结果KLF4蛋白在正常宫颈组织与宫颈原位癌中的表达均为阳性,在宫颈鳞癌组织中表达显著下调(P<0.05);KLF4蛋白的表达与临床病理因素不相关。结论KLF4可能作为一个抑癌基因与宫颈鳞癌的发生有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 KLF4 免疫组织化学
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降植烷通过内质网应激诱导大鼠巨噬细胞自噬
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作者 朱文华 韩燕 +3 位作者 宁启兰 张富军 孟列素 吕社民 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期368-372,共5页
目的探讨佐剂降植烷诱导自噬增强的确切机制。方法构建降植烷刺激的大鼠巨噬细胞系模型;Western blotting检测细胞模型能量代谢分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及内质网应激通路真核起始因子2α(eIF2α)和... 目的探讨佐剂降植烷诱导自噬增强的确切机制。方法构建降植烷刺激的大鼠巨噬细胞系模型;Western blotting检测细胞模型能量代谢分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及内质网应激通路真核起始因子2α(eIF2α)和肌醇依赖酶1α(IRE1α)的表达与活化,及转录因子EB(TFEB)的表达及入核情况;采用二硫苏糖醇(DTT)、4-苯基丁酸(4-PBA)调控细胞内质网应激水平并观察对mTOR表达和细胞自噬的影响。结果降植烷刺激的NR8383细胞模型中,eIF2α在刺激0.5 h活化,mTOR表达在刺激后1、3 h较对照组(0 h)显著降低,AMPK及IRE1α无明显变化。降植烷刺激的NR8383细胞模型的mTOR表达下调,在4-PBA干预时表达回升,而增强的LC3-II表达受到抑制;在DTT干预细胞模型时,mTOR表达则进一步下调,同时LC3-II表达则更高。降植烷诱导细胞的TFEB表达升高并活化入核。结论降植烷可能通过诱导内质网应激实现巨噬细胞自噬增强。 展开更多
关键词 降植烷 油性佐剂 内质网应激 自噬 巨噬细胞
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大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)多克隆抗体的制备及活性鉴定
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作者 刘莉 蓝茜 +6 位作者 李靖 伊静 王璇 李玥 张富军 吕社民 李冬民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期114-118,共5页
目的制备大鼠Toll样受体2胞外段(TLR2ex,405T-573Q)的多克隆抗体并鉴定其活性。方法用反转录PCR从大鼠肝细胞中扩增长507个碱基的TLR2部分胞外段,并构建重组表达载体p ET28a-TLR2ex。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达TLR2ex-6×His融合蛋... 目的制备大鼠Toll样受体2胞外段(TLR2ex,405T-573Q)的多克隆抗体并鉴定其活性。方法用反转录PCR从大鼠肝细胞中扩增长507个碱基的TLR2部分胞外段,并构建重组表达载体p ET28a-TLR2ex。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达TLR2ex-6×His融合蛋白,该蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。ELISA鉴定抗血清的效价,Western blot法检测抗血清的特异性。结果成功构建了原核表达载体p ET28a-TLR2ex,并成功表达纯化了TLR2ex-6×His融合蛋白,将该蛋白免疫BALB/c小鼠后获得抗血清;Western blot法结果显示该血清可以特异性地检出E3大鼠脾组织TLR2蛋白,ELISA测定该多克隆抗体的效价可以达到1∶76 800。结论成功制备了大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)的多克隆抗体。 展开更多
关键词 TOLL样受体2 胞外段 多克隆抗体
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Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用
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作者 闫小飞 武丽涛 +5 位作者 杜小娟 李靖 张福军 韩燕 吕社民 李冬民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1695-1699,共5页
目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^... 目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。 展开更多
关键词 钠钾ATP酶(Na+-K+-ATPase) DR多肽 单克隆抗体
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颌下腺注射分泌表达Exendin-4的重组腺相关病毒治疗糖尿病大鼠
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作者 王俊红 问姣 +1 位作者 白丹 郭永红 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1179-1185,共7页
目的:探讨颌下腺(submandibular gland,SG)重组双链腺相关病毒(double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)表达Exendin-4治疗2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型的机制。方法:对T2DM大鼠SG注射重组Exendin-4/ds A... 目的:探讨颌下腺(submandibular gland,SG)重组双链腺相关病毒(double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)表达Exendin-4治疗2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型的机制。方法:对T2DM大鼠SG注射重组Exendin-4/ds AAV,于第2,4及8周采用实时荧光定量检测胰岛素及α-淀粉酶表达,第8周行SG组织内胰岛素含量分析,胰腺切除后检测血糖及胰岛素水平,采用免疫组织化学方法检测Exendin-4和胰岛素的表达。结果:重组ds AAV治疗组可观察到SG腺体明显增大,胰岛素基因表达增加,α-淀粉酶变化不显著,免疫组织化学检测Exendin-4及胰岛素阳性;重组ds AAV治疗组胰腺切除后血糖较对照组低,胰岛素分泌增加(P<0.05)。结论:重组ds AAV/Exendin-4不仅可以在SG细胞持续表达Exendin-4,而且可能诱导胰岛素表达从而降低血糖水平,同时不影响SG功能。 展开更多
关键词 腺相关病毒 EXENDIN-4 颌下腺 糖尿病 大鼠
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