临床致病性不动杆菌的分子生物学鉴定 被引量：4

1

作者 韩蕾 张旭燕 +4 位作者 韩少山 MCCARRON Andrew MOORE John E MILLAR Cherie B 徐纪茹 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期611-616,共6页

目的对临床致病性不动杆菌进行种属鉴定,并比较3种方法(44℃生长试验、特异性引物PCR扩增和16SrRNA测序)对鲍曼不动杆菌鉴定的特异性、准确性及应用价值。方法收集临床致病不动杆菌56株,首先接种在胰蛋白胨大豆肉汤中44℃进行培养,观察... 目的对临床致病性不动杆菌进行种属鉴定,并比较3种方法(44℃生长试验、特异性引物PCR扩增和16SrRNA测序)对鲍曼不动杆菌鉴定的特异性、准确性及应用价值。方法收集临床致病不动杆菌56株,首先接种在胰蛋白胨大豆肉汤中44℃进行培养,观察是否可以生长;其次,提取56株不动杆菌基因组DNA,用两组不同的特异性引物进行PCR扩增鉴定;最后,用通用引物对56株不动杆菌的16SrRNA进行测序鉴定。结果 56株不动杆菌中有17株可在44℃生长。经特异性引物PCR扩增鉴定,发现8株鲍曼不动杆菌和3株13TU型不动杆菌均可在44℃中较早较快生长。金标准16SrRNA测序确定56株不动杆菌中含有9个种,其中鲍曼不动杆菌和13TU型不动杆菌的鉴定结果与特异性引物PCR扩增法相同。结论应用分子生物学方法鉴定鲍曼不动杆菌具有准确、高效且可重复性高的优点,尤其是特异性PCR扩增法,可作为较难诊断的鲍曼不动杆菌的首选鉴定方法。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 44℃生长试验 特异性引物PCR扩增 16SrRNA测序

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细胞角蛋白8真核表达载体的构建、表达及生物信息学分析

2

作者 寻萌 赵四海 +5 位作者 曹春霞 薛欣 邵明明 李薇 徐琨 楚雍烈 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期123-127,共5页

目的:构建人细胞角蛋白8(CK8)全长CDS序列真核表达载体,并转染人肝癌细胞SMMC7721,为研究CK8的生物学功能提供细胞模型。方法:RT-PCR扩增CK8全长CDS,克隆入pMD18-Tsimplevector质粒,鉴定正确后,亚克隆入质粒pEGFP-C1,构建真核表达载体pE... 目的:构建人细胞角蛋白8(CK8)全长CDS序列真核表达载体,并转染人肝癌细胞SMMC7721,为研究CK8的生物学功能提供细胞模型。方法:RT-PCR扩增CK8全长CDS,克隆入pMD18-Tsimplevector质粒,鉴定正确后,亚克隆入质粒pEGFP-C1,构建真核表达载体pEGFP-CK8。脂质体介导转染SMMC7721细胞,荧光显微镜、realtimePCR和Westernblot检测CK8的表达。生物信息学软件分析CK8理化特性、信号肽及功能位点等。结果:PCR、酶切和测序结果均证实重组质粒含有人CK8全长CDS序列,转染实验表明CK8在SMMC7721细胞中发生了高表达。结论:成功地构建了人CK8全长CDS真核表达载体,并使其在SMMC7721细胞中获得高表达,为研究CK8的生物学功能奠定了实验基础。 展开更多

关键词 细胞角蛋白8 全长编码序列 真核表达 生物信息学分析

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熊果酸免疫调节作用的初步研究 被引量：15

3

作者 冯英杰 任会勋 +2 位作者 袁育康 申斐 范桂香 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期541-543,共3页

目的观察熊果酸(UA)对正常小鼠及免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法用MTT染色法检测淋巴细胞转化功能,用溶血分光光度法检测抗体形成细胞功能,用巨噬细胞吞噬实验检测非特异免疫功能,用ELISA方法检测小鼠血清中Th1型细胞因子白介素-2(IL... 目的观察熊果酸(UA)对正常小鼠及免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法用MTT染色法检测淋巴细胞转化功能,用溶血分光光度法检测抗体形成细胞功能,用巨噬细胞吞噬实验检测非特异免疫功能,用ELISA方法检测小鼠血清中Th1型细胞因子白介素-2(IL-2)和Th2型细胞因子白介素-6(IL-6)质量浓度的变化。结果UA对于正常小鼠的细胞免疫功能为小剂量促进,大剂量抑制,对体液免疫功能表现出剂量依赖性抑制作用。对于免疫抑制的小鼠,UA可以全面改善免疫功能,各个剂量组与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),其中以中剂量组效果最为显著。结论UA具有免疫调节作用,对于正常的机体表现出使免疫功能向Th1漂移的特点。UA能够显著增强环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能。 展开更多

关键词 熊果酸 免疫调节 Th平衡 小鼠

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复方锁阳口服液对小鼠性激素水平及免疫功能的影响 被引量：10

4

作者 刘如意 刘敏 +3 位作者 任会勋 刘洁 黄思慧 李彦霖 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期760-762,共3页

目的观察复方锁阳口服液对小鼠性激素水平的影响及其对免疫功能的调节作用,探讨其临床疗效机制。方法用复方锁阳口服液大(180 mg/kg)、中(90 mg/kg)剂量对小鼠灌胃4周后,用放射免疫法检测其对小鼠激素水平的影响,用MTT染色法、LDH释放... 目的观察复方锁阳口服液对小鼠性激素水平的影响及其对免疫功能的调节作用,探讨其临床疗效机制。方法用复方锁阳口服液大(180 mg/kg)、中(90 mg/kg)剂量对小鼠灌胃4周后,用放射免疫法检测其对小鼠激素水平的影响,用MTT染色法、LDH释放法等检测其对小鼠相关免疫功能指标的影响。结果复方锁阳口服液大、中剂量灌胃给药均可显著提高雄性小鼠睾丸酮水平(P<0.05),对雌性小鼠孕激素和雌二醇有明显提高作用(P<0.05);对小鼠抗体产生、淋巴细胞转化以及NK细胞杀伤功能均有明显促进作用(P<0.05),大剂量优于小剂量。结论复方锁阳口服液能显著提高小鼠性激素水平,对小鼠免疫功能有明显促进作用。 展开更多

关键词 复方锁阳口服液 小鼠 性激素 免疫

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人源抗菌肽LL-37衍生物GLL-37抗菌活性研究 被引量：4

5

作者 史霖 刘珊 +2 位作者 范桂香 袁育康 梅龙 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第1期73-77,82,共6页

目的:对人源抗菌肽LL-37的特定氨基酸残基进行替换,获得衍生抗菌肽GLL-37,以增强其抗蛋白酶解能力和抗菌活性。方法:肽LL-37和GLL-37均由化学合成。采用微量稀释法测定它们对6种革兰氏阴性和阳性菌的最低抑菌浓度,以及在不同NaCl浓度下... 目的:对人源抗菌肽LL-37的特定氨基酸残基进行替换,获得衍生抗菌肽GLL-37,以增强其抗蛋白酶解能力和抗菌活性。方法:肽LL-37和GLL-37均由化学合成。采用微量稀释法测定它们对6种革兰氏阴性和阳性菌的最低抑菌浓度,以及在不同NaCl浓度下,它们对大肠埃希菌ATCC 25922的最低抑菌浓度。将LL-37和GLL-37与弹性蛋白酶共孵育后,通过对共孵育产物进行蛋白聚丙烯凝胶电泳和抗菌活性测定,研究它们抗弹性蛋白酶水解的能力。结果:GLL-37较LL-37对弹性蛋白酶的水解作用更具抵抗力。在高浓度NaCl下,GLL-37也较LL-37具有更强的抗菌活性。结论:通过对LL-37氨基酸序列中特定氨基酸残基的替换,可增强其抗菌活性及抗弹性蛋白酶水解能力,获得的衍生肽GLL-37具有很高的研究开发价值。 展开更多

关键词 抗感染药 抗微生物阳离子肽类 肽类/药理学 胰弹性蛋白酶 聚合酶链反应 电泳 琼脂凝胶

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慢性神经病理性痛对小鼠细胞免疫功能的影响 被引量：4

6

作者 邵玲巧 袁育康 +1 位作者 王军阳 任会勋 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期252-254,共3页

目的探讨慢性神经病理性痛对小鼠细胞免疫功能的影响。方法在通过结扎小鼠单侧胫神经和腓总神经建立慢性坐骨神经病理性疼痛模型的基础上,利用淋巴细胞增殖试验(MTT法)和酶联免疫吸附试验(ELISA)动态观察慢性神经病理性疼痛对T淋巴细胞... 目的探讨慢性神经病理性痛对小鼠细胞免疫功能的影响。方法在通过结扎小鼠单侧胫神经和腓总神经建立慢性坐骨神经病理性疼痛模型的基础上,利用淋巴细胞增殖试验(MTT法)和酶联免疫吸附试验(ELISA)动态观察慢性神经病理性疼痛对T淋巴细胞增殖活性以及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平的影响。结果神经病理性疼痛模型小鼠的T淋巴细胞增殖活性明显高于假手术组及对照组,外周血液中的TNF-α和IL-6亦明显高于假手术组及对照组。结论小鼠在慢性神经病理性疼痛状态下细胞免疫功能明显增强。 展开更多

关键词 神经病理性痛 肿瘤坏死因子 白介素-6 T淋巴细胞

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弓形虫多表位DNA疫苗的构建及其免疫保护作用 被引量：5

7

作者 史霖 刘珊 +3 位作者 程雁斌 范桂香 袁育康 艾立 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期689-691,共3页

目的:构建弓形虫多表位DNA疫苗并研究其免疫保护效果。方法:将编码含弓形虫多个T、B细胞表位的6段弓形虫多肽基因,以5个甘氨酸编码基因相间隔相连接,克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建成多表位弓形虫DNA疫苗。免疫BALB/c小鼠,测定... 目的:构建弓形虫多表位DNA疫苗并研究其免疫保护效果。方法:将编码含弓形虫多个T、B细胞表位的6段弓形虫多肽基因,以5个甘氨酸编码基因相间隔相连接,克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建成多表位弓形虫DNA疫苗。免疫BALB/c小鼠,测定其诱导的特异性抗体水平及T淋巴细胞增殖状况,同时进行弓形虫攻击感染保护实验。结果:成功构建了包含多个弓形虫表位的真核表达质粒pcDNA3.1/T-ME,以其作为DNA疫苗免疫小鼠,可诱导机体产生弓形虫特异性的体液及细胞免疫应答,产生有效的抗弓形虫保护性免疫应答。结论:构建的弓形虫多表位DNA疫苗能诱导机体产生有效的保护性免疫应答,在控制弓形虫感染上具有可行性。 展开更多

关键词 弓形虫 表位 DNA疫苗

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参芪注射液对H22荷瘤小鼠抑瘤作用的细胞免疫机制 被引量：4

8

作者 梅龙 董晓慧 +1 位作者 段刚 苟伟 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期279-282,共4页

目的研究参芪注射液的体内抑瘤效应与荷瘤机体细胞免疫功能的关系,探讨其抑瘤作用的细胞免疫学机制。方法建立小鼠H22肝癌实体瘤模型,分别给予高、中、低剂量参芪注射液,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率(IR)和腹腔巨噬细胞的吞噬指数;采用MT... 目的研究参芪注射液的体内抑瘤效应与荷瘤机体细胞免疫功能的关系,探讨其抑瘤作用的细胞免疫学机制。方法建立小鼠H22肝癌实体瘤模型,分别给予高、中、低剂量参芪注射液,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率(IR)和腹腔巨噬细胞的吞噬指数;采用MTT法测定各组小鼠脾淋巴细胞增殖指数;ELISA法检测各组小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果高、中剂量参芪注射液实验组小鼠H22实体瘤IR分别为60.72%和48.65%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);参芪注射液实验组小鼠脾脏淋巴细胞增值指数、腹腔巨嗜细胞吞噬指数、血清IL-2和IFN-γ的含量都显著高于模型组小鼠(P<0.05)。结论参芪注射液通过提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能,改善荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫状态,协同对肿瘤细胞的直接杀伤作用,在荷瘤小鼠体内发挥其抑瘤抗瘤作用。 展开更多

关键词 荷瘤小鼠 参芪注射液 抑瘤率 白细胞介素-2 Γ-干扰素 细胞免疫功能

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HCV全基因组培养细胞的比较蛋白组学研究 被引量：3

9

作者 赵四海 寻萌 +5 位作者 楚雍烈 朱彤 薛欣 徐琨 宋娟 邵明明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2174-2177,共4页

利用比较蛋白质组技术研究了转染丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)全基因组的人肝癌细胞系Huh7细胞模型中蛋白质表达谱的变化,建立了Huh7-HCV的双向凝胶电泳蛋白质表达图谱和数据库.通过双向凝胶电泳分离和图像分析,对表达差异2倍... 利用比较蛋白质组技术研究了转染丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)全基因组的人肝癌细胞系Huh7细胞模型中蛋白质表达谱的变化,建立了Huh7-HCV的双向凝胶电泳蛋白质表达图谱和数据库.通过双向凝胶电泳分离和图像分析,对表达差异2倍以上蛋白质点进行了胶内酶解和MALDI-TOF MS鉴定.得到包括与细胞骨架蛋白、细胞周期、凋亡和信号转导等相关的14个蛋白质,并且用Western blot验证了热休克蛋白70的蛋白质组研究结果.利用HCV全基因组培养系统,采用蛋白质组学技术,为研究HCV病毒和宿主细胞相互作用提供了新的实验数据,为深入研究HCV病毒复制和分子致病机理奠定了基础. 展开更多

关键词 培养细胞 丙型肝炎病毒 蛋白质组学

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宏基因组学及其技术的研究进展 被引量：14

10

作者 楚雍烈 杨娥 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期601-608,共8页

宏基因组学是研究生态群体基因功能和其相互作用的新科学领域,以特定生态环境中微小生物遗传物质的总和作为研究对象,基本研究策略是通过克隆、异源表达,筛选出有用的新基因及其产物。宏基因组学为生命学科和药学研究提供了一个强有力... 宏基因组学是研究生态群体基因功能和其相互作用的新科学领域,以特定生态环境中微小生物遗传物质的总和作为研究对象,基本研究策略是通过克隆、异源表达,筛选出有用的新基因及其产物。宏基因组学为生命学科和药学研究提供了一个强有力的新技术,并在包括医学在内的许多领域取得了新成就。本述评对宏基因组学的概念、技术和应用作了简要介绍。 展开更多

关键词 宏基因组学 宏基因组文库构建 文库筛选

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八正合剂抗感染作用及其对小鼠免疫功能的影响 被引量：2

11

作者 刘如意 任会勋 +1 位作者 吴捷 董颖颖 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-51,共3页

目的探讨八正合剂治疗泌尿系统感染性疾病的药理学作用及其对小鼠免疫功能的影响。方法将大肠杆菌注入小鼠膀胱后观察药物对细菌上行感染肾脏的抑制作用,同时检测其对小鼠免疫功能的影响。结果八正合剂灌胃给药可显著降低大肠杆菌上行... 目的探讨八正合剂治疗泌尿系统感染性疾病的药理学作用及其对小鼠免疫功能的影响。方法将大肠杆菌注入小鼠膀胱后观察药物对细菌上行感染肾脏的抑制作用,同时检测其对小鼠免疫功能的影响。结果八正合剂灌胃给药可显著降低大肠杆菌上行感染肾脏的带菌剖面百分率[ED50为(11.01±1.63)g/kg,95%可信限为9.50-12.76 g/kg],显著提高小鼠巨噬细胞吞噬率和吞噬指数,对体液免疫和细胞免疫影响不大。结论八正合剂治疗泌尿系统感染性疾病的作用机制主要与其增强巨噬细胞吞噬功能、清除尿路细菌有关。 展开更多

关键词 八正合剂 抗感染 小鼠 免疫

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温度对果蝇学习记忆行为的影响 被引量：2

12

作者 雷莉 范桂香 +2 位作者 宋土生 黄辰 牛跃英 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期341-343,共3页

目的研究温度对果蝇学习记忆行为的影响。方法设两个离心管,一只离心管内只有食物,果蝇既可以嗅到味道,也可以吃到食物;另一只离心管也有食物,果蝇只可以嗅到味道而不能吃到食物。将果蝇在不同的温度下饲养后,观察不同温度下饲养的果蝇... 目的研究温度对果蝇学习记忆行为的影响。方法设两个离心管,一只离心管内只有食物,果蝇既可以嗅到味道,也可以吃到食物;另一只离心管也有食物,果蝇只可以嗅到味道而不能吃到食物。将果蝇在不同的温度下饲养后,观察不同温度下饲养的果蝇进入两只离心管内的数量变化。结果高温环境下生长的果蝇进入可以吃到食物的离心管的数量少于正常温度和低温环境下生长的果蝇。结论高温可以降低果蝇的学习记忆行为。 展开更多

关键词 果蝇 温度 学习记忆

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结核杆菌DnaA蛋白的原核表达及免疫血清的制备和检测 被引量：3

13

作者 周爱萍 韩蕾 +3 位作者 王娟 段艳 吴晓康 徐纪茹 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-53,88,共5页

目的在大肠杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白,对表达产物进行纯化、鉴定后制备DnaA蛋白特异性免疫血清并进行Western blot检测。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,PCR扩增DnaA基因,构建DnaA原核表达质粒pET-DnaA,转化表达宿... 目的在大肠杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白,对表达产物进行纯化、鉴定后制备DnaA蛋白特异性免疫血清并进行Western blot检测。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,PCR扩增DnaA基因,构建DnaA原核表达质粒pET-DnaA,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,非变性条件下镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白pET-DnaA,并用Western blot检测和鉴定重组蛋白,用纯化得到的重组蛋白制备特异性免疫血清。结果成功构建了结核杆菌pET-DnaA重组质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达;用分离纯化后的重组蛋白免疫动物,获得高效价的特异性免疫血清。结论结核杆菌DnaA蛋白及其特异性抗体的成功制备,为进一步研究该蛋白在结核菌DNA复制机制中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 DnaA蛋白 DNA复制起始 原核表达

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艾叶精油对离体蠕形螨的杀灭作用与机制探讨 被引量：14

14

作者 赵亚娥 郭娜 +2 位作者 穆鑫 吴昌睿 卢朝晖 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期19-22,共4页

目的通过观察艾叶精油对离体蠕形螨的杀灭作用,探讨其杀虫机制。方法采用透明胶带粘贴过夜法获取人体蠕形螨,利用Motic图像采集软件系统在显微镜下观察不同浓度的艾叶精油对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的杀螨率和虫体变化情况。结果艾叶精... 目的通过观察艾叶精油对离体蠕形螨的杀灭作用,探讨其杀虫机制。方法采用透明胶带粘贴过夜法获取人体蠕形螨,利用Motic图像采集软件系统在显微镜下观察不同浓度的艾叶精油对毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨的杀螨率和虫体变化情况。结果艾叶精油对两种人体蠕形螨均有很好的杀灭作用,虫体形态及活动度均发生了兴奋-痉挛-松弛-死亡的典型变化。浓度为100%的艾叶精油1h可杀灭全部蠕形螨。随着药物浓度的降低,杀螨率也逐渐降低。12.5%艾叶精油是杀灭人体蠕形螨的最适有效浓度。对比观察发现艾叶精油对皮脂蠕形螨的杀螨率明显高于毛囊蠕形螨。结论艾叶精油可作为一种天然高效的杀螨药物,其杀螨机制推测主要作用于螨虫的神经肌肉系统,引起虫体剧烈的痉挛收缩后松弛死亡。 展开更多

关键词 毛囊蠕形螨 皮脂蠕形螨 艾叶精油 杀螨作用 杀螨机制

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毛囊蠕形螨的发育形态观察和存活适温范围研究 被引量：13

15

作者 赵亚娥 郭娜 +4 位作者 郑鑫 杨世峰 张明鑫 张灵敏 吴开杰 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期754-758,共5页

采用挤压涂片法或透明胶纸粘贴法获取毛囊蠕形螨,在数码显微镜Motic DM B5软件系统下进行动态观察、拍摄和测量;然后对离体蠕形螨按批随机分组,观察不同温度下虫体的存活时间和活动力.结果系统地展示了毛囊蠕形螨发育过程各个时期的动... 采用挤压涂片法或透明胶纸粘贴法获取毛囊蠕形螨,在数码显微镜Motic DM B5软件系统下进行动态观察、拍摄和测量;然后对离体蠕形螨按批随机分组,观察不同温度下虫体的存活时间和活动力.结果系统地展示了毛囊蠕形螨发育过程各个时期的动态照片,发现毛囊蠕形螨的前若虫期有足4对,若虫期具有活动能力.离体实验表明,毛囊蠕形螨耐低温而不耐高温;存活适温范围在8～30℃之间,发育适温范围在20～30℃之间,发育最适温度为25～26℃;0℃以下或37℃以上温度对蠕形螨生存不利,54℃为致死温度,58℃为有效灭螨温度.这一研究结果为蠕形螨的体外培养和防治工作提供了可靠的理论依据. 展开更多

关键词 毛囊蠕形螨 形态 存活适度 存活时间 活动力

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葡萄球菌的耐药性分析 被引量：8

16

作者 刘军辉 李鹏 +3 位作者 王淑梅 汪靖园 孟欣 董晓慧 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期135-136,F0003,共3页

目的研究医院内葡萄球菌属细菌的耐药状况,为临床合理、有效地使用抗生素提供依据。方法用K-B法对采集的咽拭子标本中分离到的葡萄球菌进行药敏试验,采用双重PCR方法检测葡萄球菌的FemA及MecA基因。FemA和MecA基因均为阳性者为耐甲氧西... 目的研究医院内葡萄球菌属细菌的耐药状况,为临床合理、有效地使用抗生素提供依据。方法用K-B法对采集的咽拭子标本中分离到的葡萄球菌进行药敏试验,采用双重PCR方法检测葡萄球菌的FemA及MecA基因。FemA和MecA基因均为阳性者为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)菌株,仅MecA基因阳性者为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS)。结果从采集的361份标本中,分离出葡萄球菌220株,其中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)110株。住院患者、医护人员葡萄球菌标本中凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococci,CNS)分别占84/151(55.63%)、13/25(52.00%),均高于正常人群的13/44(29.55%)(P<0.05);住院患者中的耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus,MRS)对除万古霉素外的常用抗生素均有明显的耐药性。住院患者分离的67株SA中检测到MRSA菌株31株(46.27%);84株CNS中检测到MRCNS菌株26株(30.95%)。结论住院患者标本中的葡萄球菌对常用抗生素均有明显的耐药性,且CNS的比例显著高于正常人群;其中MRS几乎对所有抗生素都表现为耐药,表明MRS已成为医院内感染的重要致病菌。用双重PCR方法检测MRSA,比药敏试验简单,且快速、准确、敏感、特异性强,具有很好的临床应用价值。 展开更多

关键词 耐药性 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因 FEMA基因 双重PCR

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人体蠕形螨的DNA提取与随机引物PCR检测 被引量：11

17

作者 赵亚娥 成慧 +1 位作者 寻萌 吴李萍 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期929-933,共5页

【目的】探索人体毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨DNA的提取方法。【方法】采用液氮反复冻融研磨法破碎螨体细胞,选用改良小昆虫DNA提取法、碱裂解法和试剂盒提取法,分别提取冻存时间在5个月内和8～10个月的毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨基因组DNA,并... 【目的】探索人体毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨DNA的提取方法。【方法】采用液氮反复冻融研磨法破碎螨体细胞,选用改良小昆虫DNA提取法、碱裂解法和试剂盒提取法,分别提取冻存时间在5个月内和8～10个月的毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨基因组DNA,并用随机引物PCR方法进行检测。【结果】蛋白核酸测定仪检测结果显示,试剂盒法提取的DNA纯度较高、量较多,明显优于改良小昆虫法和碱裂解法。随机引物扩增结果显示清晰的DNA指纹图谱,两种人体蠕形螨DNA指纹具有明显差异。蠕形螨冻存时间影响DNA提取的量,但对DNA提取的纯度和RAPD指纹图谱影响较小。不同DNA提取方法提取的同一种蠕形螨DNA指纹图谱基本相似,试剂盒法和改良小昆虫法提取的DNA样本条带多而清晰,碱裂解法提取的样本条带少而模糊。【结论】液氮反复冻融研磨法破碎蠕形螨细胞是有效的,蠕形螨冻存时间不宜超过6个月,试剂盒提取法是提取蠕形螨DNA的好方法。RAPD技术可以用于这两种人体蠕形螨DNA分子水平上的检测和分类。 展开更多

关键词 毛囊蠕形螨 皮脂蠕形螨 DNA提取 随机引物PCR检测

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新型天然杀螨药物樟脑精油的杀螨效果观察与机制分析 被引量：12

18

作者 赵亚娥 郭娜 +1 位作者 师睿 张灵小 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期544-547,共4页

目的观察樟脑精油对两种人体蠕形螨的体外杀灭效果,分析其杀螨机制。方法采用透明胶带粘贴法获取蠕形螨,随机分为六组,观察不同浓度下樟脑精油的杀虫作用,并在Motic DM图像采集软件系统下观察虫体对樟脑精油的药物反应过程。结果樟脑精... 目的观察樟脑精油对两种人体蠕形螨的体外杀灭效果,分析其杀螨机制。方法采用透明胶带粘贴法获取蠕形螨,随机分为六组,观察不同浓度下樟脑精油的杀虫作用,并在Motic DM图像采集软件系统下观察虫体对樟脑精油的药物反应过程。结果樟脑精油对两种蠕形螨均有杀灭作用,对皮脂蠕形螨的杀灭作用要强于毛囊蠕形螨,且杀虫效果随着药物浓度的增加及作用时间的延长而增强。12.5%樟脑精油是体外杀螨的最适浓度。显微镜下观察可见,使用樟脑油后,螨虫在经历短时间的兴奋痉挛期后,虫体松弛、死亡。结论樟脑精油具有良好的体外抗蠕形螨的作用,其机制可能是通过直接触杀作用和神经肌肉毒性作用完成的。 展开更多

关键词 樟脑油 毛囊蠕形螨 皮脂蠕形螨 杀灭作用

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2型糖尿病患者肠道拟类菌属和双歧杆菌属多样性的PCR-DGGE指纹图谱分析 被引量：7

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作者 吴晓康 徐纪茹 +5 位作者 张旭燕 马超锋 韩蕾 申艳星 NAWAZ M 王娟 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期475-480,共6页

目的分析2型糖尿病患者肠道拟类菌属和双歧杆菌属的多样性及其与健康个体的差异,探讨糖尿病与肠道优势菌属的相关性。方法收集2型糖尿病患者和健康志愿者粪样,提取样品中菌群总DNA,利用拟类菌和双歧杆菌16SrRNA种属特异性引物,进行PCR扩... 目的分析2型糖尿病患者肠道拟类菌属和双歧杆菌属的多样性及其与健康个体的差异,探讨糖尿病与肠道优势菌属的相关性。方法收集2型糖尿病患者和健康志愿者粪样,提取样品中菌群总DNA,利用拟类菌和双歧杆菌16SrRNA种属特异性引物,进行PCR扩增,将产物用变性梯度凝胶电泳分离,获得肠道菌群分子指纹图谱,进行多样性和相似性等特征分析。结果糖尿病组和健康人组样品DGGE图谱多样性指数范围分别是:拟类菌属0.89(0.75～0.95),0.95(0.89～0.97);双歧杆菌属:0.85(0.75～0.94),0.87(0.73～0.93)。组内成对相似性系数累积曲线分析,拟类菌属:小于0.5的Cs值在糖尿病组占到总Cs值个数的85.83%,而健康人组只占到35.71%;双歧杆菌属:小于0.4的Cs值在糖尿病组占到总Cs值个数的90%,健康人组占到总Cs值个数的60.7%。结论糖尿病患者和健康人肠道拟类菌属和双歧杆菌属指纹图呈现个体特异性,糖尿病患者两种菌属多样性与健康个体无显著差异,而糖尿病患者个体之间的相似性较健康个体之间低。 展开更多

关键词 2型糖尿病 肠道菌群 变性梯度凝胶电泳 指纹图谱技术 多样性

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虎杖提取物白藜芦醇的抗白血病作用及其可能的分子机制 被引量：10

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作者 李覃 范桂香 +2 位作者 王伟 李彤 袁育康 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期340-345,共6页

目的探讨白藜芦醇在体外对白血病细胞的抑制作用及其分子机制。方法MTT比色法测定细胞生长抑制率;流式细胞术、HE染色、激光共聚焦显微镜等方法观察各组白血病细胞的细胞周期与细胞凋亡情况;Western Blot-ting法测定细胞抗凋亡蛋白Bcl-... 目的探讨白藜芦醇在体外对白血病细胞的抑制作用及其分子机制。方法MTT比色法测定细胞生长抑制率;流式细胞术、HE染色、激光共聚焦显微镜等方法观察各组白血病细胞的细胞周期与细胞凋亡情况;Western Blot-ting法测定细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平;免疫组织化学法测定白血病细胞信号转导分子p-STAT3的活性表达。结果白藜芦醇可以时间-剂量依赖的方式抑制3种白血病细胞增殖、诱导凋亡、影响细胞周期分布、减弱STAT3的酪氨酸磷酸化活性。结论白藜芦醇对不同来源的白血病细胞均具有较强的抗肿瘤活性,显著减少STAT3的酪氨酸磷酸化活性,为其进一步应用于白血病的临床治疗积累了实验依据。 展开更多

关键词 白藜芦醇 细胞凋亡 白血病

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