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携带CIP2A shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其鉴定
被引量：
2
1
作者
杨雪
宋涛
+3 位作者
陶杰
孙昊
杨威
刘青光
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期743-748,共6页
目的构建携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体,制备靶向性沉默CIP2A表达的高浓度重组腺相关病毒。方法设计合成CIP2AshRNA,退火形成双链与pDC316-EGFP-U6质粒BamHⅠ和HindⅢ双酶切产物相连接构建形成质粒pDC316-EGFP-CIP2AshRNA,以鉴定正...
目的构建携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体,制备靶向性沉默CIP2A表达的高浓度重组腺相关病毒。方法设计合成CIP2AshRNA,退火形成双链与pDC316-EGFP-U6质粒BamHⅠ和HindⅢ双酶切产物相连接构建形成质粒pDC316-EGFP-CIP2AshRNA,以鉴定正确的pDC316-EGFP-CIP2AshRNA克隆为模板PCR扩增EGFPCIP2AshRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切PCR扩增产物及pSNAV2.0质粒后进行连接形成重组质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA,建立载体细胞株BHK/CIP2A-shRNA,采用AAV MaxTM包装系统大规模制备rAAV2-EGFPCIP2AshRNA并对其纯化及滴度测定。将rAAV2-EGFP-CIP2AshRNA感染肝癌细胞HepG2,利用空载病毒载体rAAV2-EGFP作对照,采用Real-time PCR及Western blot方法检测CIP2AshRNA基因沉默效果。结果携带编码CIP2AshRNA腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA经双酶切及测序鉴定,质粒构建正确;将重组质粒与辅助病毒HSV1-rc/ΔUL2共转染包装细胞BHK-21,成功制备重组腺相关病毒rAAV2-CIP2AshRNA,经测定纯化所得rAVV2病毒滴度为0.25×1012v.g./mL。筛选MOI值为1×105感染肝癌细胞HepG2,CIP2A mRNA及蛋白表达水平分别于感染后24h和48h与对照细胞相比出现明显下降。结论成功制备高滴度携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体rAAV2-CIP2AshRNA。
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关键词
CIP2A
RNA干扰
重组腺相关病毒
短发卡RNA
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职称材料
脂肪酸合成酶在胰腺癌细胞凋亡过程中的作用
被引量：
5
2
作者
苗常青
许静
+4 位作者
王军
沙焕臣
王凯飞
李晓青
彭波
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期770-774,共5页
目的探讨脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)对胰腺癌细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法应用Annexin V/FITC流式细胞仪检测脂肪酸合成酶受到抑制后对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡水平的影响,qRTPCR、Western blot技术检测受到C75...
目的探讨脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)对胰腺癌细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法应用Annexin V/FITC流式细胞仪检测脂肪酸合成酶受到抑制后对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡水平的影响,qRTPCR、Western blot技术检测受到C75作用后的胰腺癌细胞PANC-1中Caspase-3、Bcl-2、FASN蛋白及RNA的水平。结果应用C75对PANC-1细胞中FASN进行特异性地抑制,随着C75浓度增加,胰腺癌细胞中脂肪酸合成酶蛋白表达量明显降低,细胞凋亡水平升高。同时,C75处理组Caspase-3分子水平较对照组升高,Bcl-2分子水平下降(P<0.05)。结论脂肪酸合成酶通过Bcl-2以及Caspase-3分子,参与了胰腺癌细胞株PANC-1中细胞凋亡的过程。因此,脂肪酸合成酶在未来可以作为药物靶点,用于临床治疗胰腺癌。
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关键词
脂肪酸合酶
胰腺癌
生长
凋亡
C75
CASPASE-3
BCL-2
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职称材料
原发性肝癌合并胆囊癌病例报道
被引量：
5
3
作者
覃丹
万永
+2 位作者
张晓刚
梁华
刘昌
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期285-286,F0003,共3页
目的报道1例罕见双原发恶性肿瘤(原发性肝癌合并胆囊癌)病例以指导临床。方法与结果报道1例原发性肝癌合并胆囊癌病例,54岁男性患者以"右上腹间断性疼痛4d"之主诉入院。于当地县医院行上腹部CT示:胆囊结石、胆囊癌肝浸润后,...
目的报道1例罕见双原发恶性肿瘤(原发性肝癌合并胆囊癌)病例以指导临床。方法与结果报道1例原发性肝癌合并胆囊癌病例,54岁男性患者以"右上腹间断性疼痛4d"之主诉入院。于当地县医院行上腹部CT示:胆囊结石、胆囊癌肝浸润后,到西安交通大学第一附属医院就诊。实验室检查示:HBsAg(+),HBcAb(+),甲胎蛋白(AFP)>60 500ng/mL,癌胚抗原(CEA)5.25ng/mL。CT检查提示:肝门部稍强回声光团,肝癌待定,胆囊癌待定,胆囊结石,胆囊炎;肝动脉、门静脉血管CT成像(CTA+CTV)检查示肝左内侧叶巨大恶性肿块影,胆囊壁不均匀增厚,疑肝脏病变侵犯胆囊或/及胆囊病变侵犯肝脏。术前初步考虑为原发性肝癌伴胆囊浸润,行肝脏Ⅳb、Ⅴ段切除+胆囊切除+T管引流术。术后病理示:肝脏巨块型肝细胞癌Ⅲ级、胆囊隆起型中-低分化腺癌。术后1个月,患者复查CT示肝内播散,预后差。结论双原发癌中的"两者不相连续"这一标准并非适合于所有的双原发癌,并为以后诊治类似疾病提供了有益经验;及时准确地鉴别"转移"或"原发",是临床医师给予患者有效治疗的关键。
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关键词
双原发癌
原发性肝癌
胆囊癌
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职称材料
题名
携带CIP2A shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其鉴定
被引量：
2
1
作者
杨雪
宋涛
陶杰
孙昊
杨威
刘青光
机构
西安交通大学医学部第一附属医院肝胆外科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期743-748,共6页
文摘
目的构建携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体,制备靶向性沉默CIP2A表达的高浓度重组腺相关病毒。方法设计合成CIP2AshRNA,退火形成双链与pDC316-EGFP-U6质粒BamHⅠ和HindⅢ双酶切产物相连接构建形成质粒pDC316-EGFP-CIP2AshRNA,以鉴定正确的pDC316-EGFP-CIP2AshRNA克隆为模板PCR扩增EGFPCIP2AshRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切PCR扩增产物及pSNAV2.0质粒后进行连接形成重组质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA,建立载体细胞株BHK/CIP2A-shRNA,采用AAV MaxTM包装系统大规模制备rAAV2-EGFPCIP2AshRNA并对其纯化及滴度测定。将rAAV2-EGFP-CIP2AshRNA感染肝癌细胞HepG2,利用空载病毒载体rAAV2-EGFP作对照,采用Real-time PCR及Western blot方法检测CIP2AshRNA基因沉默效果。结果携带编码CIP2AshRNA腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-EGFP-CIP2AshRNA经双酶切及测序鉴定,质粒构建正确;将重组质粒与辅助病毒HSV1-rc/ΔUL2共转染包装细胞BHK-21,成功制备重组腺相关病毒rAAV2-CIP2AshRNA,经测定纯化所得rAVV2病毒滴度为0.25×1012v.g./mL。筛选MOI值为1×105感染肝癌细胞HepG2,CIP2A mRNA及蛋白表达水平分别于感染后24h和48h与对照细胞相比出现明显下降。结论成功制备高滴度携带CIP2AshRNA重组腺相关病毒载体rAAV2-CIP2AshRNA。
关键词
CIP2A
RNA干扰
重组腺相关病毒
短发卡RNA
Keywords
cancerous inhibitor of PP2A（CIP2A）
RNA interference
recombinant adeno-associated virus（rAAV）
short hairpin RNA（shRNA）
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
脂肪酸合成酶在胰腺癌细胞凋亡过程中的作用
被引量：
5
2
作者
苗常青
许静
王军
沙焕臣
王凯飞
李晓青
彭波
机构
西安交通大学
医学
部
第一
附属
医院
急诊科
西安交通大学医学部第一附属医院肝胆外科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期770-774,共5页
基金
陕西省科学技术研究发展计划项目(No.2012K13-01-10)~~
文摘
目的探讨脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)对胰腺癌细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法应用Annexin V/FITC流式细胞仪检测脂肪酸合成酶受到抑制后对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡水平的影响,qRTPCR、Western blot技术检测受到C75作用后的胰腺癌细胞PANC-1中Caspase-3、Bcl-2、FASN蛋白及RNA的水平。结果应用C75对PANC-1细胞中FASN进行特异性地抑制,随着C75浓度增加,胰腺癌细胞中脂肪酸合成酶蛋白表达量明显降低,细胞凋亡水平升高。同时,C75处理组Caspase-3分子水平较对照组升高,Bcl-2分子水平下降(P<0.05)。结论脂肪酸合成酶通过Bcl-2以及Caspase-3分子,参与了胰腺癌细胞株PANC-1中细胞凋亡的过程。因此,脂肪酸合成酶在未来可以作为药物靶点,用于临床治疗胰腺癌。
关键词
脂肪酸合酶
胰腺癌
生长
凋亡
C75
CASPASE-3
BCL-2
Keywords
fatty acid synthase（FASN）
pancreatic cancer
growth
apoptosis
C75
Caspase-3
Bcl-2
分类号
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
原发性肝癌合并胆囊癌病例报道
被引量：
5
3
作者
覃丹
万永
张晓刚
梁华
刘昌
机构
西安交通大学医学部第一附属医院肝胆外科
西安交通大学
医学
部
第一
附属
医院
病理科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期285-286,F0003,共3页
文摘
目的报道1例罕见双原发恶性肿瘤(原发性肝癌合并胆囊癌)病例以指导临床。方法与结果报道1例原发性肝癌合并胆囊癌病例,54岁男性患者以"右上腹间断性疼痛4d"之主诉入院。于当地县医院行上腹部CT示:胆囊结石、胆囊癌肝浸润后,到西安交通大学第一附属医院就诊。实验室检查示:HBsAg(+),HBcAb(+),甲胎蛋白(AFP)>60 500ng/mL,癌胚抗原(CEA)5.25ng/mL。CT检查提示:肝门部稍强回声光团,肝癌待定,胆囊癌待定,胆囊结石,胆囊炎;肝动脉、门静脉血管CT成像(CTA+CTV)检查示肝左内侧叶巨大恶性肿块影,胆囊壁不均匀增厚,疑肝脏病变侵犯胆囊或/及胆囊病变侵犯肝脏。术前初步考虑为原发性肝癌伴胆囊浸润,行肝脏Ⅳb、Ⅴ段切除+胆囊切除+T管引流术。术后病理示:肝脏巨块型肝细胞癌Ⅲ级、胆囊隆起型中-低分化腺癌。术后1个月,患者复查CT示肝内播散,预后差。结论双原发癌中的"两者不相连续"这一标准并非适合于所有的双原发癌,并为以后诊治类似疾病提供了有益经验;及时准确地鉴别"转移"或"原发",是临床医师给予患者有效治疗的关键。
关键词
双原发癌
原发性肝癌
胆囊癌
Keywords
multiple primary cancers
primary hepatocellular carcinoma
gall bladder cancer
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
携带CIP2A shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其鉴定
杨雪
宋涛
陶杰
孙昊
杨威
刘青光
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
2
脂肪酸合成酶在胰腺癌细胞凋亡过程中的作用
苗常青
许静
王军
沙焕臣
王凯飞
李晓青
彭波
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
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下载PDF
职称材料
3
原发性肝癌合并胆囊癌病例报道
覃丹
万永
张晓刚
梁华
刘昌
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
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