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题名正常角膜上皮细胞单纯疱疹I型病毒潜伏的研究
被引量：2
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作者
王彤
朱秀萍
刘先宁
王燕
张长宁
党双锁
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机构
西安市第一医院眼科
西安交通大学分子生物学教研室
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出处
《眼科研究》
CSCD
北大核心
2003年第6期612-614,共3页
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文摘
目的 检测近视眼患者角膜上皮细胞单纯疱疹I型病毒 (HSV I) ,探讨其在正常角膜潜伏的可能性。方法 取行准分子激光屈光性角膜切削术 (PRK)的近视眼角膜上皮细胞 13 8份 (13 8眼 ) ,每份均匀分为三部分 ,两份分别行HSV I的原位聚合酶链反应 (ISPCR)检测和间接免疫荧光法 (IFA)检测 ,阳性者取其相对应的第 3份角膜上皮进行病毒分离培养和电镜观察。结果 13 8份近视眼角膜上皮中 ,ISPCR阳性者 8眼 (5 8% ) ,IFA阳性者 4眼 (2 9% ) ,两种检测均阳性者 3眼 (2 2 % ) ,取此 9眼的第 3份角膜上皮进行病毒分离培养 ,电镜扫描未发现病毒颗粒。结论 正常角膜上皮细胞内存有HSV I功能基因 ,提示可能有HSV
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关键词
角膜上皮
单纯疱疹Ⅰ型病毒
原位聚合酶链反应
间接免疫荧光法
潜伏
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Keywords
corneal epithelium HSV-I ISPCR IFA latency
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分类号
R772.21
[医药卫生—眼科]
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题名RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用
被引量：1
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作者
刘莉扬
马文丽
宋艳斌
张宝
郑文岭
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机构
西安交通大学分子生物学教研室
第一军医大学分子生物学研究所
广州军区总医院分子肿瘤生物研究所
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出处
《西安医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期246-248,261,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目 (No.39880 0 32 )
广州市重点攻关项目 (No .990 4 480 2 2 )
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文摘
目的 应用RD PCR技术分离酵母基因。方法 首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的 3’端延伸两个碱基 )作第二次PCR扩增。 5 %PAGE胶分离基因片段 ,选择单带割胶回收 ,做第三次PCR扩增 ,与载体连接 ,最后进行测序分析。结果 采用这种方法分离得到的基因片段 ,经Blast检索分析 ,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签 (EST)。结论 RD PCR技术可以有效地分离EST ,可用于酵母基因表达调控的研究。
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关键词
RD-PCR技术
基因表达谱
酿酒酵母
限制性显示技术
表达序列标签
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Keywords
RD PCR
S. cerevisiae
EST
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分类号
Q75
[生物学—分子生物学]
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