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基于恒温隔绝式荧光PCR技术现场检测牛轮状病毒方法的建立及应用 被引量:16
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作者 李凡 岳华 +3 位作者 邱莞思 张斌 黄建德 汤承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1092-1098,共7页
轮状病毒(rotavirus,RV)是犊牛腹泻的重要病因,笔者旨在建立基于恒温隔绝PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR)技术现场检测牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的方法。根据BRV和牦牛RVVP6基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系... 轮状病毒(rotavirus,RV)是犊牛腹泻的重要病因,笔者旨在建立基于恒温隔绝PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR)技术现场检测牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的方法。根据BRV和牦牛RVVP6基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系,配合商品化PetNAD核酸萃取试剂盒,建立了检测BRV和牦牛RV的iiPCR方法。结果显示该方法只能检出BRV和牦牛RV,不能检出牛冠状病毒、牛星状病毒、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛大肠杆菌、牛沙门菌、牛艾美尔球虫、牛瑞氏隐孢子虫等无关病原;检测下限为96.6copies·μL-1,重复性好;对30份牛腹泻样本和30份牦牛腹泻样本的检测结果表明,本方法对BRV的检出率是33.33%,对牦牛RV的检出率为73.33%,与文献报道的检测BRV和牦牛RV的方法的符合率分别为100%;对2016年四川阿坝藏羌自治州14个牧场的88份犊牦牛腹泻样本RV的检测结果显示RV核酸阳性检出率为98.86%。本研究建立的BRV iiPCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,既可用于BRV检测,又可用于牦牛RV的检测;从核酸提取到报告检测结果仅需1h,操作方便,可现场使用,为BRV的现场快速诊断提供有力的工具。 展开更多
关键词 牦牛 轮状病毒 VP6基因 恒温隔绝PCR 现场检测
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多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展 被引量:33
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作者 陈诺 唐善虎 +1 位作者 岑璐伽 李雪 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期72-75,共4页
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术在微生物检测中具有快速、灵敏、操作简单等优点,而多重PCR检测还可以同时扩增多个目的基因,对高效快速检测具有重要意义,已经成为近几年来的研究热点。作者对近来多重PCR技术在食品... 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术在微生物检测中具有快速、灵敏、操作简单等优点,而多重PCR检测还可以同时扩增多个目的基因,对高效快速检测具有重要意义,已经成为近几年来的研究热点。作者对近来多重PCR技术在食品病原微生物、食品非致病微生物及相关环境食品微生物中应用的研究现状,以及未来在食品检测中的应用展望进行了综述。 展开更多
关键词 多重PCR 食品 微生物检测
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花生牦牛肉酱配方技术的研究 被引量:22
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作者 唐善虎 王柳 +2 位作者 余小贞 胡廷武 游敬钱 《中国调味品》 CAS 北大核心 2011年第3期56-60,101,共6页
研究主要目的是探讨酱体、花生添加量、牦牛肉添加量和用油量对花生牦牛肉酱感官、质构和化学指标的影响,并筛选出色香味俱佳的花生牦牛肉酱配方。研究共进行了三个试验,分别探讨了酱体和花生添加量、花生和牦牛肉添加量及植物油添加量... 研究主要目的是探讨酱体、花生添加量、牦牛肉添加量和用油量对花生牦牛肉酱感官、质构和化学指标的影响,并筛选出色香味俱佳的花生牦牛肉酱配方。研究共进行了三个试验,分别探讨了酱体和花生添加量、花生和牦牛肉添加量及植物油添加量对花生牦牛肉酱感官、质构和化学成分的影响。研究结果发现:酱体用量为35%,花生添加量为25%时,牦牛肉酱感官最好,硬度、稠度、内部的粘着性最大;花生添加量为25%,牦牛肉添加量为5%时,花生牦牛肉酱感官指标得分最高;菜籽油用量为31%时,酱体流动性和口感较好。试验花生牦牛肉酱的最佳配方为酱体用量35%、花生25%、牦牛肉5%、辅料4%、菜油31%。酱体成分、花生、牦牛肉和植物油使用量均影响花生牦牛肉酱感官、质构和化学成分。 展开更多
关键词 牦牛肉 花生 感官评定 质构
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动物肠道乳酸菌的分离鉴定技术研究进展 被引量:15
4
作者 梁彦彦 兰道亮 +3 位作者 林宝山 黄偲 陈亚冰 李键 《动物医学进展》 北大核心 2015年第10期90-94,共5页
乳酸菌是可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称,是对人和畜禽有益的益生菌。动物肠道中的乳酸菌耐受胃酸有更好的适应性,更易于在肠道中定植抵抗病原微生物的黏附,并且耐酸性好易于生存。论文综述了动物肠道乳酸菌分离培养的几种方... 乳酸菌是可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称,是对人和畜禽有益的益生菌。动物肠道中的乳酸菌耐受胃酸有更好的适应性,更易于在肠道中定植抵抗病原微生物的黏附,并且耐酸性好易于生存。论文综述了动物肠道乳酸菌分离培养的几种方法,总结出更适合分离乳酸菌的培养基。归纳了动物肠道乳酸菌的鉴定方法,包括形态鉴定、生化鉴定以及分子生物学的鉴定,重点介绍了16SrDNA的分子生物学鉴定方法。这对建立动物肠道中乳酸菌分离鉴定的方法,研究动物肠道中的微生物菌群组成有重要意义。 展开更多
关键词 动物肠道 乳酸菌 分离 鉴定
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宏基因组学在食品科学领域的应用研究进展 被引量:11
5
作者 张维潇 李键 +1 位作者 骞宇 索化夷 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期309-314,共6页
宏基因组学是一种免培养,能够直接从环境中提取全部微生物基因组DNA,通过构建宏基因组文库并适当筛选,得到目的基因及生物活化物质的新型研究方法,它可以最大限度地挖掘微生物资源,现在愈渐成为微生物研究和开发最重要的课题之一。本文... 宏基因组学是一种免培养,能够直接从环境中提取全部微生物基因组DNA,通过构建宏基因组文库并适当筛选,得到目的基因及生物活化物质的新型研究方法,它可以最大限度地挖掘微生物资源,现在愈渐成为微生物研究和开发最重要的课题之一。本文综述了宏基因组学的研究方法及其近几年来在食品科学领域的应用,着重介绍其在酶制剂开发、食品安全卫生、食品发酵群落、生态演化,食品营养和发现新型物质等领域的应用。同时探讨宏基因组学在食品科学领域未来的应用前景。 展开更多
关键词 宏基因组学 食品科学 研究进展
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肉制品中生物胺的控制技术及其检测方法的研究进展 被引量:4
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作者 郝小倩 唐善虎 +1 位作者 李雪 岑璐伽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期148-152,共5页
生物胺是氨基酸在脱羧酶作用下脱羧后的产物,是植物和微生物体内具有生物活性的含氮化合物,参与机体正常的生理调节,少量的生物胺也有利于人体和动物生理活动。但是,当人体摄入量过多时会引起食物中毒。作者就肉制品中生物胺技术控制和... 生物胺是氨基酸在脱羧酶作用下脱羧后的产物,是植物和微生物体内具有生物活性的含氮化合物,参与机体正常的生理调节,少量的生物胺也有利于人体和动物生理活动。但是,当人体摄入量过多时会引起食物中毒。作者就肉制品中生物胺技术控制和干预及检测方法进行了综述。 展开更多
关键词 生物胺 危害 控制 检测 综述
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基于微量RNA高通量测序技术的牦牛MⅡ期卵母细胞转录组研究 被引量:2
7
作者 兰道亮 熊显荣 +4 位作者 林宝山 陈亚冰 胡敏 苏小珊 李键 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期722-732,共11页
旨在现有高通量测序的基础上,建立一种针对牦牛卵母细胞等微量样本的RNA高通量测序方法,为进一步研究牦牛卵母细胞的转录组学提供基础。以微量MII期牦牛卵母细胞RNA(10ng)作为研究样本,应用SMART cDNA PCR扩增技术对样本进行富集并构建... 旨在现有高通量测序的基础上,建立一种针对牦牛卵母细胞等微量样本的RNA高通量测序方法,为进一步研究牦牛卵母细胞的转录组学提供基础。以微量MII期牦牛卵母细胞RNA(10ng)作为研究样本,应用SMART cDNA PCR扩增技术对样本进行富集并构建测序文库,再应用改进的RNA高通量测序技术对其进行高通量测序分析。经Illumina-Solexa深度测序后,得到了一个包含47 619 254条测序序列,4Gb大小数据量的微量MII期牦牛卵母细胞测序文库。质量控制(Quality control,QC)及基本结果分析表明测序文库质量良好。基因组比对分析显示,共有15 626个牦牛基因被映射。此外,还获得了7 348个新的转录本。GO分类注释结果显示,共有13 795个比对上的基因参与了生物过程、细胞组分及分子功能3大主要类别。进一步富集分析显示,分别有333 134及113个GO类别在上述3大类中得到富集。KEGG通路分析结果显示,共有13 496个比对上的基因参与了258条通路,其中101条通路得到有效富集。本研究以牦牛卵母细胞为样本成功建立了一种起始RNA量可低至10ng的微量转录组测序方法。该研究结果为进一步研究牦牛基因组提供了基础,同时也为研究牦牛MII期卵母细胞的分子机理提供了新的视角。 展开更多
关键词 牦牛 卵母细胞 MII期 转录组 微量 高通量测序
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DGGE技术及其在食品微生物研究中应用 被引量:5
8
作者 岑璐伽 唐善虎 +1 位作者 郝小倩 李雪 《粮食与油脂》 北大核心 2012年第1期9-12,共4页
变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术是一种分析微生物区系分子指纹技术,具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点,已被广泛应用于微生物分子生态学领域研究。该文对DGGE技术基本原理及其在食品微生物中多样性分析、食品微生物动态监测、快速检... 变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术是一种分析微生物区系分子指纹技术,具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点,已被广泛应用于微生物分子生态学领域研究。该文对DGGE技术基本原理及其在食品微生物中多样性分析、食品微生物动态监测、快速检测等应用进行综述,并对该技术局限性和应用前景进行评述。 展开更多
关键词 变性梯度凝胶电泳 食品微生物 分子指纹技术
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新型可食性涂膜剂在鸡蛋保鲜技术中的应用 被引量:8
9
作者 李文娟 陈炼红 《安徽农业科学》 CAS 2014年第14期4432-4435,共4页
涂膜法是近年来国内外发展起来的较先进的鸡蛋保鲜方法之一,并且逐渐朝着天然、无毒、可食的方向发展,适合我国蛋业生产现状,应用前景十分广阔。综述了不同新型可食性材料在鸡蛋涂膜保鲜技术中的应用,并探讨了影响保鲜效果的因素。
关键词 鸡蛋 评价指标 保鲜 新型可食性涂膜剂
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大豆茎秆蛋白质双向电泳技术体系优化 被引量:1
10
作者 刘卫国 邹俊林 +3 位作者 杨晨雨 罗玲 蒋涛 杨文钰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期230-236,共7页
为建立一套完整、可行的适合大豆茎秆蛋白的双向电泳技术,对大豆茎秆蛋白的提取方法、双向电泳的固相化p H梯度凝胶(IPG)、上样量、SDS-PAGE胶浓度、染色方法等进行了优化。结果表明,将传统的TCA/丙酮法与酚法相结合,提取的大豆茎秆蛋... 为建立一套完整、可行的适合大豆茎秆蛋白的双向电泳技术,对大豆茎秆蛋白的提取方法、双向电泳的固相化p H梯度凝胶(IPG)、上样量、SDS-PAGE胶浓度、染色方法等进行了优化。结果表明,将传统的TCA/丙酮法与酚法相结合,提取的大豆茎秆蛋白经双向电泳分离后,可获得较多的蛋白点,且背景清晰,便以识别。双向电泳优化后的主要技术参数为p H3-10非线性IPG胶条、上样量800μg、12%SDS-PAGE胶、考马斯亮蓝染色。本研究形成的大豆茎秆蛋白提取方法和双向电泳技术方案,有利于进一步采用蛋白质组学分析大豆茎秆的生物学功能。 展开更多
关键词 大豆 茎秆 双向电泳 蛋白质组
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新时期大学生语文素养的偏废及匡正 被引量:2
11
作者 郑涛 李函玥 杨丽雪 《语文建设》 北大核心 2012年第09X期47-48,共2页
语言文字是一个国家、民族和个人传承历史文化及完善自我认识的重要途径和载体。在全球化进程日益加快的今天,在西方强势文化和功利主义的影响下,大学生的语文素养暴露出诸多偏废迹象,影响到高校人才培养的质量乃至民族的文化传承,应当... 语言文字是一个国家、民族和个人传承历史文化及完善自我认识的重要途径和载体。在全球化进程日益加快的今天,在西方强势文化和功利主义的影响下,大学生的语文素养暴露出诸多偏废迹象,影响到高校人才培养的质量乃至民族的文化传承,应当予以重视。 展开更多
关键词 大学生 语文素养 偏废 匡正
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采用实时定量PCR技术评价三种药物体外抗鸭瘟病毒效果 被引量:1
12
作者 杨发龙 汤承 +2 位作者 张焕容 谢青 岳华 《中国兽药杂志》 2008年第7期5-7,共3页
采用实时定量PCR技术,对阿昔洛韦、利巴韦林及禽重组干扰素等三种药物体外抗鸭瘟病毒的作用进行了评价。结果显示,阿昔洛韦能有效抑制鸭瘟病毒在鸭胚成纤维细胞中的增殖。研究结果为抗鸭瘟病毒药物筛选提供了一种有效的技术平台,同时提... 采用实时定量PCR技术,对阿昔洛韦、利巴韦林及禽重组干扰素等三种药物体外抗鸭瘟病毒的作用进行了评价。结果显示,阿昔洛韦能有效抑制鸭瘟病毒在鸭胚成纤维细胞中的增殖。研究结果为抗鸭瘟病毒药物筛选提供了一种有效的技术平台,同时提示阿昔洛韦制剂有可能作为一种有效的抗鸭瘟病毒药物用于其感染的防治。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 荧光定量PCR 药效评价
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饲料霉菌毒素残留检测与防控技术研究进展 被引量:4
13
作者 王蜀金 李嘉英 +1 位作者 方思敏 郭春华 《猪业科学》 2013年第11期78-80,共3页
就当前饲料中霉菌毒素残留严重,而相关检测与防控技术却不统一的问题,参考国内外对饲料中霉菌毒素残留的检测与防控先进技术,从而为饲料中霉菌毒素残留的检测与防控提供方法。
关键词 霉菌毒素 检测方法 防控方法
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民族院校兽医药理学教学改革及实践探讨 被引量:2
14
作者 陈朝喜 周珊 《现代农业科技》 2014年第20期309-311,共3页
针对民族院校动物医学专业人才的培养目标和要求,对兽医药理学课程内容、教学手段与方法、实习和课程考试等教学环节进行改革与实践,以期在教学和实践中着重培养学生的综合素质和创新思维,为民族地区培养更多更优秀的动物医学专业人才。
关键词 民族院校 兽医药理学 素质教育 创新思维
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采用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株
15
作者 唐俊妮 康铭松 +2 位作者 周锐 史贤明 陈焕春 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期698-702,共5页
针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物,PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列,克隆到穿梭载体pBT2中;两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接,作为筛选标记,从而构建同源重组穿梭质粒pBT2Δsae;将pBT2Δsae电转化... 针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物,PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列,克隆到穿梭载体pBT2中;两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接,作为筛选标记,从而构建同源重组穿梭质粒pBT2Δsae;将pBT2Δsae电转化到金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,40℃经过七轮培养,进行抗性培养基筛选和PCR验证,以及RT-PCR观察基因表达水平。获得一株金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株RNΔsae,为进一步研究sae基因的调控机制等提供有用的实验材料。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 sae基因 同源重组 突变株构建
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原生质体融合技术及其在果酒酵母育种上的应用
16
作者 陈娟 阚建全 +1 位作者 杨蓉生 杜木英 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2010年第9期163-166,共4页
对原生质体融合技术的研究进展进行概括,论述该技术的重要环节,包括遗传标记选择、原生质体制备、再生和融合以及融合子的鉴定等。通过分析其在降酸、增香、嗜杀活性和抗氧化性等优良性状整合上的研究结果,表明原生质体融合技术在优良... 对原生质体融合技术的研究进展进行概括,论述该技术的重要环节,包括遗传标记选择、原生质体制备、再生和融合以及融合子的鉴定等。通过分析其在降酸、增香、嗜杀活性和抗氧化性等优良性状整合上的研究结果,表明原生质体融合技术在优良果酒酵母育种上具有广泛的应用前景和重要的应用价值。 展开更多
关键词 原生质体融合 果酒酵母 选育
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应用SMART cDNA合成技术富集鸡脾脏微量RNA
17
作者 兰道亮 岳华 汤承 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期6-9,共4页
以鸡脾脏中提取的20ng微量RNA为起始样本,应用SMART cDNA合成技术合成cDNA第一链及扩增第二链,并在原有基础上做了适当的优化和改进。同时与传统cDNA合成方法进行了比较。最终,从20ng总RNA中成功扩增出双链cDNA6.03μg,而采用传统方法... 以鸡脾脏中提取的20ng微量RNA为起始样本,应用SMART cDNA合成技术合成cDNA第一链及扩增第二链,并在原有基础上做了适当的优化和改进。同时与传统cDNA合成方法进行了比较。最终,从20ng总RNA中成功扩增出双链cDNA6.03μg,而采用传统方法只合成出0.03μg cDNA,且前者cDNA的质量和纯度明显高于后者。结果表明,通过SMART cDNA合成技术,可使鸡脾脏微量RNA得到有效地富集。 展开更多
关键词 SMART cDNA合成技术 脾脏
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家畜主基因检测技术及其研究现状
18
作者 马正花 马志杰 +1 位作者 高光宇 郜勇 《中国草食动物》 2007年第2期55-58,共4页
主基因是指在染色体上占据一定区域的控制某一数量性状(或阈性状)的基因位点或基因簇(Gene Cluster),其检测与确定涉及到QTL定位、主基因效应分析等一系列问题。文章在对主基因的概念、检测方法以及牛、羊、猪各物种主基因和相关经济性... 主基因是指在染色体上占据一定区域的控制某一数量性状(或阈性状)的基因位点或基因簇(Gene Cluster),其检测与确定涉及到QTL定位、主基因效应分析等一系列问题。文章在对主基因的概念、检测方法以及牛、羊、猪各物种主基因和相关经济性状候选基因研究现状作了系统阐述的基础上,对其开发利用前景作了展望。 展开更多
关键词 主基因 QTL 候选基因鉴定法
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脂肪细胞膜免疫技术的研究进展
19
作者 吴润 严丹红 郝葆青 《动物科学与动物医学》 2005年第10期56-58,共3页
过多的脂肪沉积,不仅降低肉类的质量,也影响人的身体健康,因此人们一直在寻求降低肉品脂肪含量的方法,其中脂肪细胞膜免疫技术就是一种新的b可行的b有效的方法。文章就对脂肪细胞膜免疫作用机理、对动物生产性能、屠宰率、胴体品质等方... 过多的脂肪沉积,不仅降低肉类的质量,也影响人的身体健康,因此人们一直在寻求降低肉品脂肪含量的方法,其中脂肪细胞膜免疫技术就是一种新的b可行的b有效的方法。文章就对脂肪细胞膜免疫作用机理、对动物生产性能、屠宰率、胴体品质等方面的影响以及脂肪细胞膜免疫中存在的问题进行了综述,并展望了脂肪细胞膜免疫的发展方向及应用前景。 展开更多
关键词 脂肪细胞膜 免疫 动物脂肪 脂肪细胞膜免疫 免疫技术 动物生产性能 脂肪沉积 身体健康 脂肪含量 免疫作用 胴体品质 屠宰率
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多组学技术联用在传统发酵乳品风味代谢调控中的应用研究进展 被引量:6
20
作者 周钺 李键 +4 位作者 张玉 王洪伟 赵欣 刘士健 索化夷 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期238-243,共6页
传统发酵乳制品具有独特的风味品质、营养价值和丰富的菌种资源。由于发酵微生物的区系复杂多样,传统发酵乳制品的风味品质形成机理不清,质量安全无法保证,阻碍了传统发酵乳制品的规模化生产。基于高通量组学技术的发展,多组学技术联用... 传统发酵乳制品具有独特的风味品质、营养价值和丰富的菌种资源。由于发酵微生物的区系复杂多样,传统发酵乳制品的风味品质形成机理不清,质量安全无法保证,阻碍了传统发酵乳制品的规模化生产。基于高通量组学技术的发展,多组学技术联用为分析传统发酵乳品的风味形成条件与菌种代谢通路提供了有利手段。该文综述了国内外多组学技术联用在传统发酵乳品的风味代谢调控中的研究应用并对此展望,为传统发酵乳品的品质调控和生产研发提供新思路。 展开更多
关键词 传统发酵乳品 多组学技术联用 特征风味成分 代谢通路 功能基因
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