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酵母双杂交系统在蛋白质相互作用研究中的应用
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作者 马崇 丁畅 +4 位作者 张芝瑜 颜福均 李云龙 马勋 谯正林 《农业与技术》 2025年第19期128-132,共5页
酵母双杂交技术(Yeast Two-Hybrid,Y2H)是一种经典的分子生物学方法,主要用于研究蛋白质之间的相互作用,其研究平台基于酵母菌,广泛应用于相关领域。通过将有兴趣的蛋白结合域和激活域分别表达出来,借助酵母菌细胞中的报告基因系统,利用... 酵母双杂交技术(Yeast Two-Hybrid,Y2H)是一种经典的分子生物学方法,主要用于研究蛋白质之间的相互作用,其研究平台基于酵母菌,广泛应用于相关领域。通过将有兴趣的蛋白结合域和激活域分别表达出来,借助酵母菌细胞中的报告基因系统,利用Y2H技术高效筛选和验证蛋白间直接或间接的相互作用。酵母双杂交技术被广泛应用于植物研究,特别是在解析植物抗逆机制、调控次生代谢,以及生长发育的分子调控网络中发挥了重要作用。本文从酵母双杂交技术的原理、操作过程、技术特点及其在植物研究中的具体应用展开论述,为植物分子机制研究提供理论指导。 展开更多
关键词 基因 蛋白互作 酵母双杂交技术 园林植物
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金鱼草花中光照强度和MeJA介导的AmbHLHs表达对花香成分的影响
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作者 孔玉来 石森堡 +5 位作者 宋晓惠 董绍榕 马崇 杨楠 陈龙清 谯正林 《西南农业学报》 北大核心 2025年第7期1404-1424,共21页
【目的】解析金鱼草b HLH(Basic helix-loop-helix)基因家族的信息,筛选可能参与调控金鱼草花香物质的Amb HLHs。【方法】基于金鱼草全基因组数据分析鉴定Amb HLHs家族成员,对其进行蛋白理化性质、基因结构、蛋白保守基序、系统进化关... 【目的】解析金鱼草b HLH(Basic helix-loop-helix)基因家族的信息,筛选可能参与调控金鱼草花香物质的Amb HLHs。【方法】基于金鱼草全基因组数据分析鉴定Amb HLHs家族成员,对其进行蛋白理化性质、基因结构、蛋白保守基序、系统进化关系和顺式作用元件等分析;此外,对金鱼草进行不同光照强度和不同浓度Me JA处理,通过GC-MS和qRT-PCR对其进行花香成分的测定和部分Amb HLHs表达模式的探究。【结果】共鉴定出122个Amb HLHs成员,基因结构和保守基序分析表明,外显子数量为1~11个,共15个保守基序。系统发育关系显示,122个金鱼草Amb HLHs分布在25个亚族中,其中XII亚族成员最多。种内共线性分析表明,驱动金鱼草Amb HLHs基因家族扩增的主要方式是片段重复。金鱼草Amb HLHs基因启动子区域具有大量光响应、生长发育、抗逆胁迫和激素响应元件,其中光响应元件数量最多。在光胁迫下,当光照强度为600μmol/(m^(2)·s)时,花香挥发性有机化合物(Floral volatile organic compounds,FVOCs)的总量达到峰值,并随着光照强度的增加,其释放量均呈先增后减趋势;部分花香相关Amb HLHs的表达模式也呈现一致的趋势。当Me JA浓度为200μmol/L时,FVOCs的总量达到最高,随着Me JA浓度升高,其释放量大致呈先增后减趋势;部分花香相关Amb HLHs的相对表达量也基本呈现先升后降趋势。【结论】筛选出Amb HLH10、Amb HLH41、Amb HLH54、Amb HLH55、Amb HLH56、Amb HLH68、Amb HLH71和Amb HLH103 8个基因可能与β-罗勒烯的释放相关;其中Amb HLH41还可能与苯甲酸甲酯的释放相关。本研究结果为金鱼草Amb HLHs的研究奠定基础,同时也为FVOCs合成的调控提供新见解。 展开更多
关键词 金鱼草 bHLH基因家族 光照强度 茉莉酸甲酯胁迫 基因表达 花香挥发性有机化合物
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