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尖吻鲈dnajb1和dnd1基因克隆及细胞表达定位分析
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作者 唐娜 田佳明 +4 位作者 徐建飞 张若冰 陈凯利 冯科 徐红艳 《西南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第9期53-67,共15页
通过分子克隆技术获得尖吻鲈热休克蛋白基因dnajb1(Lcdnajb1)和dnd1(Lcdnd1)的cDNA序列,并探究这两个基因在性腺细胞中的表达定位。结果显示:Lcdnajb1 cDNA长度为1 287bp,包含1 047bp的完整开放阅读框,编码348个氨基酸;Lcdnd1 cDNA长度... 通过分子克隆技术获得尖吻鲈热休克蛋白基因dnajb1(Lcdnajb1)和dnd1(Lcdnd1)的cDNA序列,并探究这两个基因在性腺细胞中的表达定位。结果显示:Lcdnajb1 cDNA长度为1 287bp,包含1 047bp的完整开放阅读框,编码348个氨基酸;Lcdnd1 cDNA长度为1 185bp,包含1 128bp的完整开放阅读框,编码375个氨基酸。氨基酸序列多重比对和系统发育进化树分析结果显示:LcDnajb1蛋白序列与大口黑鲈的Dnajb1相似性最高(94.1%);LcDnd1与鳜的Dnd1相似性最高(85.5%)。半定量RT-PCR结果显示:Lcdnajb1 mRNA在各组织中均有表达,其中肝脏中表达量最高,而Lcdnd1 mRNA仅在性腺组织中表达;进一步通过实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)确证了Lcdnajb1 mRNA在尖吻鲈各组织中的相对表达量。原位杂交结果显示:Lcdnajb1和Lcdnd1mRNA在精巢和卵巢早期生殖细胞中表达量较高,随着生殖细胞的发育成熟,表达量均呈逐渐下降趋势。综上表明,Lcdnajb1和Lcdnd1基因可能参与了调控尖吻鲈性腺的发育过程。 展开更多
关键词 尖吻鲈 热休克蛋白 基因表达
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