新型碱性低分子量β-葡萄糖苷酶基因的分离与酶学性质研究 被引量：4

1

作者 马振刚 唐婧 +4 位作者 马淑华 张时恒 贾俊杰 李田 周泽扬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期108-113,共6页

目的:获得新型β-葡萄糖苷酶编码基因,并对其表达产物进行酶学性质研究。方法:采用宏基因组学方法提取兔盲肠内微生物总DNA,构建DNA文库,通过筛选培养基获得产β-葡萄糖苷酶的克隆,测序获得其插入基因序列,氨基酸多重序列比对分析其序... 目的:获得新型β-葡萄糖苷酶编码基因,并对其表达产物进行酶学性质研究。方法:采用宏基因组学方法提取兔盲肠内微生物总DNA,构建DNA文库,通过筛选培养基获得产β-葡萄糖苷酶的克隆,测序获得其插入基因序列,氨基酸多重序列比对分析其序列特征,并用DNS显色法测定表达产物在不同条件下的酶活力。结果:在文库中获得一个基因片段nglu07,能编码一个低分子量的β-葡萄糖苷酶。nglu07基因片段长180bp,编码60个氨基酸残基。与已提交的糖苷水解酶Ⅰ家族成员进行氨基酸多重序列比对表明nglu07具有预测的活性位点Glu4与底物结合位点Tyr47,其最适反应温度为50℃,最适pH为10.0,粗酶活为8.12U/mL。结论:成功获得一新型低分子量的碱性β-葡萄糖苷酶编码基因,其蛋白温度稳定性高,在pH4.0～11.0的环境中均能保持较高的酶活力,具有作为食品工业用酶以及碱性酶的潜力,尤其在食品饮料加工、棉织品生物整理、洗涤及废纸脱墨等工业方面具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 宏基因组 文库 新型β-葡萄糖苷酶 低分子量 酶学性质

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从形态学不同到基因水平差异:家蚕与果蝇早期胚胎发育比较 被引量：5

2

作者 柴春利 鲁成 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1173-1179,共7页

昆虫的分化多样性一直是研究的一个热点,对家蚕胚胎发育调控机制的研究将有助于加深人们对其他昆虫早期胚胎发育机制的了解。文章综述了鳞翅目昆虫家蚕和双翅目昆虫果蝇的早期胚胎发育在形态学及基因水平的研究结果。通过比较,发现二者... 昆虫的分化多样性一直是研究的一个热点,对家蚕胚胎发育调控机制的研究将有助于加深人们对其他昆虫早期胚胎发育机制的了解。文章综述了鳞翅目昆虫家蚕和双翅目昆虫果蝇的早期胚胎发育在形态学及基因水平的研究结果。通过比较,发现二者的早期胚胎发育存在较大差异。这一结果不但可以为家蚕胚胎发育调控机制的分子水平研究提供重要参考,也可为昆虫分化多样性的分子机制研究提供线索。 展开更多

关键词 家蚕 果蝇 胚胎发育 形态学 基因 差异

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家蚕微孢子虫几丁质酶基因的比较基因组学分析 被引量：1

3

作者 刘铁 胡军华 +1 位作者 潘国庆 周泽扬 《蚕学通讯》 2008年第1期9-11,18,共4页

几丁质是构成家蚕微孢子虫细胞壁的主要成分,广泛分布于原生生物、真菌、节肢动物和甲壳类生物之中,能够被几丁质酶(EC 3.2.1.14)水解。本文基于家蚕微孢子全基因组数据,采用生物信息学方法,鉴定获得家蚕微孢子虫几丁质酶基因,命名为Nb_... 几丁质是构成家蚕微孢子虫细胞壁的主要成分,广泛分布于原生生物、真菌、节肢动物和甲壳类生物之中,能够被几丁质酶(EC 3.2.1.14)水解。本文基于家蚕微孢子全基因组数据,采用生物信息学方法,鉴定获得家蚕微孢子虫几丁质酶基因,命名为Nb_chi。该基因有2个拷贝,其中一个Nb_chi_1长度为2 286bp,编码761aa,pI为6.35。含有一个信号肽以及一个Glyco_hydro_19结构域。另一个拷贝Nb_chi_2仅含552bp,183aa,仅含Glyco_hydro_19结构域部分,可能为一不完整的拷贝。系统进化分析显示,家蚕微孢子虫与其他种类的微孢子虫聚在同一个进化枝,均属几丁质酶第19族。本文为深入进行家蚕微孢子虫几丁质酶的功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 几丁质酶 复制 进化

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一株烟草青枯菌拮抗细菌的筛选及鉴定 被引量：17

4

作者 张伏军 林立鹏 +3 位作者 唐婧 马淑华 谢洁 周泽扬 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期91-94,共4页

利用不同地点采集发病烟苗根围土样的方法,从重庆黔江烟草地共采集了土样31份,经分离纯化获得一株对供试致病烟草青枯菌有较强抑制作用的拮抗菌株swu31-2,通过其形态特征,生理生化试验和16S rDNA序列的测定,初步判定属于铜绿假单胞菌.

关键词 烟草 青枯病 拮抗菌 筛选 鉴定

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果蝇蜕皮激素诱导程序性细胞死亡的遗传调控因子 被引量：7

5

作者 李庆荣 邓小娟 +4 位作者 杨婉莹 黄志君 钟仰进 曹阳 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期118-125,共8页

近年来关于果蝇程序性细胞死亡(programmedcelldeath,PCD)的研究结果表明,在果蝇的变态发育过程中,蜕皮激素与受体结合后诱导转录因子的表达。这些转录因子作为程序性细胞死亡调控网络中的初、次级应答信号,激活凋亡诱导因子Reaper、Hid... 近年来关于果蝇程序性细胞死亡(programmedcelldeath,PCD)的研究结果表明,在果蝇的变态发育过程中,蜕皮激素与受体结合后诱导转录因子的表达。这些转录因子作为程序性细胞死亡调控网络中的初、次级应答信号,激活凋亡诱导因子Reaper、Hid和Grim的表达。Reaper、Hid和Grim进而阻止凋亡蛋白抑制因子的活性,从而启动半胱氨酸蛋白酶caspase途径,引起细胞凋亡(apoptosis)。该文综述了蜕皮激素诱导的果蝇程序性细胞死亡中各遗传调控因子之间的关系。 展开更多

关键词 果蝇 蜕皮激素 蜕皮酮 程序性细胞死亡 细胞凋亡 遗传调控因子

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玉米黄素提取及应用研究进展 被引量：21

6

作者 邱涛涛 黄明发 +1 位作者 陈颜虹 王华 《中国调味品》 CAS 北大核心 2008年第11期18-23,共6页

玉米黄素是一种天然类胡萝卜素。大量研究表明,它具有预防老年性黄斑病变、白内障、心血管疾病以及抗癌等功效,和人类健康密切相关。文章综述了玉米黄素的性质、提取方法、生理功能以及在食品方面的应用,并对其应用前景进行了展望。

关键词 玉米黄素 提取 生理功能 应用

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应用DGGE技术分析自然免耕土与普通耕作土细菌群落的多样性 被引量：3

7

作者 马振刚 马淑华 +4 位作者 张时恒 贾俊杰 李田 潘国庆 周泽扬 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1273-1278,共6页

为探明免耕土壤与普通耕作土壤环境中细菌群落的多样性,获取相关优势菌落信息,该研究利用宏基因组学方法获得免耕土和普通耕作土样品总DNA,利用PCR获得16S rDNA V3片段,并进行变性梯度凝胶电泳(Denaturation gradient gel electrophores... 为探明免耕土壤与普通耕作土壤环境中细菌群落的多样性,获取相关优势菌落信息,该研究利用宏基因组学方法获得免耕土和普通耕作土样品总DNA,利用PCR获得16S rDNA V3片段,并进行变性梯度凝胶电泳(Denaturation gradient gel electrophoresis),通过微生物种群丰富度比较两样品中群落的丰富性,同时选取相关DNA条带进行克隆、测序和生物信息学分析。结果显示:免耕土壤中细菌群落多样性更加丰富;两类型土壤样品间细菌群落组成具有显著差异,证明耕作制度影响了土壤细菌群落结构。BLAST分析与系统发生分析结果表明,免耕土壤中特异存在的细菌群落与具有生物固氮、降解甲苯和倍硫磷等特性的细菌序列相似性较高或进化关系较近,推测其在免耕土壤肥力、有毒物质降解及有机质转变等过程中起作用。 展开更多

关键词 免耕土 DGGE 16SrDNA 细菌群落 自净能力

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Pseudomonas sp.20#-5防治烟草黑胫病田间试验初报 被引量：2

8

作者 杨廷 张伏军 +4 位作者 袁志辉 胡军华 肖杰 蓝希钳 周泽扬 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期130-132,共3页

20#-5菌株是本实验室从土壤中分离保存的1株假单胞菌,2006年对其发酵液防治烟草黑胫病进行了田间防效试验。结果显示，不同发病时期20#-5菌发酵液的防治效果在64.39％～79.70％，高于对照药剂。防治效果较好。不同施药时期调查结果表明... 20#-5菌株是本实验室从土壤中分离保存的1株假单胞菌,2006年对其发酵液防治烟草黑胫病进行了田间防效试验。结果显示，不同发病时期20#-5菌发酵液的防治效果在64.39％～79.70％，高于对照药剂。防治效果较好。不同施药时期调查结果表明，发病前施用20#-5菌发酵液的防治效果要好于发病后施用。说明20#-5菌发酵液对烟草黑胫病具有有效的预防作用。 展开更多

关键词 PSEUDOMONAS sp.20#-5 烟草黑胫病 防治效果

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黑腹果蝇抗真菌肽Drosomycin同系物的免疫原性和抗真菌活性 被引量：1

9

作者 杨婉莹 刘文权 +5 位作者 邓小娟 段云 黄亚东 温硕洋 夏庆友 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期887-894,共8页

通过黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin(Drs)及其同系物Drs-lC和Drs-lE的抗体制备及Western blotting结果,分析了Drs同系物的免疫原性与其抗真菌活性的关系。研究采用了2种技术路线,分别将Drs、Drs-lC和Drs-lE基因构... 通过黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin(Drs)及其同系物Drs-lC和Drs-lE的抗体制备及Western blotting结果,分析了Drs同系物的免疫原性与其抗真菌活性的关系。研究采用了2种技术路线,分别将Drs、Drs-lC和Drs-lE基因构建成与细胞生长因子基因afgf融合的重组表达质粒pET-afgf-Drs、pET-afgf-C和pET-afgf-E,以及通过基因同向串连获得重组表达质粒pRSET-2Drs、-4Drs、-6Drs和pRSET-2E、-4E、-6E,并将这些重组表达质粒转化到BL21(DE3)plysS受体菌进行诱导表达。分离纯化后的融合蛋白afgf-Drs、afgf-C和afgf-E以及串连蛋白4Drs、4Drs-lE分别免疫小白鼠获得相应的抗血清。Western blotting免疫原性检测结果表明,Drs及其同系物与各自的抗血清具有强的免疫反应,同时相互间也有交叉免疫反应,提示它们具有相似的主要抗原决定簇,这些抗原决定簇可能与抗真菌活性无关。同系物之间抗真菌活性的差异可能来源于某些细微结构上的差异。 展开更多

关键词 黑腹果蝇 抗真菌肽 Drosomycin 同系物 免疫原性 抗真菌活性

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几丁质酶抑制化合物研究进展 被引量：3

10

作者 谢洁 周泽扬 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期705-708,共4页

几丁质酶抑制化合物作为一种可开发成具有新型作用靶标的生物农药早已引起国内外生物学家地广泛关注。近年发现几丁质酶抑制剂a llosam idin对哮喘病具有一定疗效,为几丁质酶抑制化合物在医学领域的应用奠定了一定的基础。本文就几丁质... 几丁质酶抑制化合物作为一种可开发成具有新型作用靶标的生物农药早已引起国内外生物学家地广泛关注。近年发现几丁质酶抑制剂a llosam idin对哮喘病具有一定疗效,为几丁质酶抑制化合物在医学领域的应用奠定了一定的基础。本文就几丁质酶抑制化合物的种类、抑制机制,几丁质酶抑制化合物活性测定方法以及相关研究领域的发展前景等做一综述。 展开更多

关键词 几丁质酶 抑制化合物 抑制机制

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印度丝绸标志推广及其对我国的启示 被引量：2

11

作者 李龙 向仲怀 《丝绸》 CAS 北大核心 2007年第8期1-4,10,共5页

通过对印度"丝绸标志"和中国"高档丝绸标志"在组织形式、推广内容、方式、方法等方面的比较研究,提出了改进我国"高档丝绸标志"推介的建议,强调为了提高我国"高档丝绸标志"在国际丝绸市场上的... 通过对印度"丝绸标志"和中国"高档丝绸标志"在组织形式、推广内容、方式、方法等方面的比较研究,提出了改进我国"高档丝绸标志"推介的建议,强调为了提高我国"高档丝绸标志"在国际丝绸市场上的公信度,必须加强在"高档丝绸标志"推广工作中经费、人才等方面的投入,加强丝绸界与蚕桑界的合作,共同促进"高档丝绸标志"的使用。 展开更多

关键词 印度 中国 丝绸标志

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新疆引进桑种质资源的综合评价及筛选利用进展 被引量：6

12

作者 买买提依明 余茂德 +2 位作者 刘燕林 郭洪荣 吴丽莉 《蚕学通讯》 2006年第4期14-17,共4页

对296份引进桑种质资源的产叶量、饲料品质和抗逆性等数量遗传性状及影响主成分表达的18种微效多基因遗传性状进行了系统鉴定评价,对遗传性状相对稳定、优良基因环境表现性较好的资源进行了筛选利用研究。筛选出果用资源32份、叶片大资... 对296份引进桑种质资源的产叶量、饲料品质和抗逆性等数量遗传性状及影响主成分表达的18种微效多基因遗传性状进行了系统鉴定评价,对遗传性状相对稳定、优良基因环境表现性较好的资源进行了筛选利用研究。筛选出果用资源32份、叶片大资源48份、叶肉厚资源32份、高产桑叶资源26份、叶质优资源19份、抗干旱耐寒资源28份。 展开更多

关键词 新疆 引进桑资源 评价 利用

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蚕类抗菌肽异源表达与应用研究进展 被引量：1

13

作者 马振刚 蓝希钳 周泽扬 《蚕学通讯》 2010年第2期8-16,共9页

蚕类抗菌肽作为昆虫抗菌肽之一,具有分子量小、热稳定性好、抗菌谱广等优点,是新世纪抗生素最理想的替代药物。目前已经成功鉴定40个家蚕抗菌肽基因,包括Cecropins、Enbo-cins、Attacins、Moricins、Gloverins、Lebocins和Defensins。... 蚕类抗菌肽作为昆虫抗菌肽之一,具有分子量小、热稳定性好、抗菌谱广等优点,是新世纪抗生素最理想的替代药物。目前已经成功鉴定40个家蚕抗菌肽基因,包括Cecropins、Enbo-cins、Attacins、Moricins、Gloverins、Lebocins和Defensins。本文综述了蚕类抗菌肽的家族分类、抗菌肽应用等内容,着重阐述了蚕类抗菌肽异源表达研究。 展开更多

关键词 抗菌肽 异源表达 活性 应用

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柞蚕核型多角体病毒ptp-2基因克隆及表达

14

作者 石生林 潘敏慧 鲁成 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期125-128,共4页

为研究柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus,ApNPV)ptp-2基因特性,根据ApNPV PstⅠ-C片段核酸序列,设计引物克隆了ApNPV ptp-2基因;将ptp-2基因亚克隆至原核表达载体pQE-30,构建重组质粒pQE-ptp-2,并在大肠杆菌M1... 为研究柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus,ApNPV)ptp-2基因特性,根据ApNPV PstⅠ-C片段核酸序列,设计引物克隆了ApNPV ptp-2基因;将ptp-2基因亚克隆至原核表达载体pQE-30,构建重组质粒pQE-ptp-2,并在大肠杆菌M15中进行诱导表达,表达量达菌体总蛋白的38.7%,经His标签杂交鉴定证明表达产物为His融合蛋白.以原核表达的His-PTP-2蛋白作为抗原,制作兔多克隆抗血清,Western blot分析表明PTP-2蛋白不参与ApNPV包涵体的结构组成. 展开更多

关键词 核型多角体病毒 基因表达 基因克隆 柞蚕 ptp-2基因

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基于小波分析的线粒体基因组分形维数提取

15

作者 武伟 刘洪斌 +2 位作者 郑昆 鲁成 谢德体 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期873-876,共4页

结合DNA游走方法和小波分析研究了不同物种的线粒体基因组序列的自相似分形结构,提取了线粒体基因组序列的ATW alk,AG W alk和AC W alk分维数指标。研究结果表明3种游走序列的分维数均大于1,并且在同类物种中的AG W alk的分维数间有一... 结合DNA游走方法和小波分析研究了不同物种的线粒体基因组序列的自相似分形结构,提取了线粒体基因组序列的ATW alk,AG W alk和AC W alk分维数指标。研究结果表明3种游走序列的分维数均大于1,并且在同类物种中的AG W alk的分维数间有一定的关系。证明线粒体基因组序列存在自相似分形结构,这种结构受到ATGC碱基在基因组中的排列结构影响。 展开更多

关键词 小波分析 DNA游走 线粒体基因组 分形维数

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温度、pH对泥鳅肠道消化酶活性的影响

16

作者 丁茜 田宝军 +1 位作者 耿丽娜 李英文 《河北渔业》 2009年第5期5-7,共3页

以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为研究材料,测定不同温度及不同pH条件下肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明,随温度、pH值的升高,三种酶活性的变化均表现为先增高后降低。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的最适温度分别为50℃... 以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为研究材料,测定不同温度及不同pH条件下肠道中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明,随温度、pH值的升高,三种酶活性的变化均表现为先增高后降低。蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的最适温度分别为50℃、50℃、40℃,最适pH值分别为7.0、7.0、7.5。 展开更多

关键词 泥鳅 消化酶活性 温度 PH

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家蚕拟抗微生物肽Gloverins基因(Bmglv)的原核表达及抗菌活性鉴定 被引量：4

17

作者 韩冬 邓小娟 +6 位作者 杨婉莹 叶明强 曹方 黄亚东 温硕洋 曹阳 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期561-568,共8页

家蚕Bombyx mori基因组全测序于2004年完成后,由家蚕基因组注释发现了35条拟抗微生物肽基因序列。本研究选取其中的5条Gloverins同系物(isoforms)基因(BmglvB,BmglvA2,BmglvA3,BmglvA5和BmglvA6),克隆至pET-21d载体,转化Escherichia col... 家蚕Bombyx mori基因组全测序于2004年完成后,由家蚕基因组注释发现了35条拟抗微生物肽基因序列。本研究选取其中的5条Gloverins同系物(isoforms)基因(BmglvB,BmglvA2,BmglvA3,BmglvA5和BmglvA6),克隆至pET-21d载体,转化Escherichia coli RosettaTM(DE3)宿主菌进行表达;克隆表达的5个家蚕Gloverins同系物基因大部分以可溶形式表达,经Ni-NTA亲和层析纯化和Sephadex G-10脱盐处理后,采用平板孔穴抑菌法测定其抗菌活性。结果表明:注释发现的5条家蚕拟抗微生物肽Gloverins同系物基因,具有与在其他昆虫中已鉴定报道的Gloverin相似的抗革兰氏阴性细菌的功能,实验确认了它们就是家蚕Gloverins抗微生物肽基因。 展开更多

关键词 家蚕 抗微生物肽 Gloverin 原核表达 抗菌活性

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一种家蚕卵巢原代细胞制作方法探索 被引量：2

18

作者 关国平 潘敏慧 鲁成 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第2期326-328,共3页

以中国家蚕卵巢组织为材料制作原代细胞,探索并获得了一种快速有效的方法。该方法在原代细胞的解离、收集过程中,省略了传统的胰蛋白酶解离方法,只经过一步剪碎过程,原代培养取得了良好的结果:当细胞培养至1个月的时候,即可见大量游离... 以中国家蚕卵巢组织为材料制作原代细胞,探索并获得了一种快速有效的方法。该方法在原代细胞的解离、收集过程中,省略了传统的胰蛋白酶解离方法,只经过一步剪碎过程,原代培养取得了良好的结果:当细胞培养至1个月的时候,即可见大量游离细胞贴壁,旺盛生长。 展开更多

关键词 家蚕 卵巢 原代培养

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N.b和SCM_6交叉感染对家蚕中肠碱性磷酸酶活性的影响 被引量：3

19

作者 孙毅 李娜 潘敏慧 《蚕学通讯》 2007年第4期12-15,共4页

以家蚕病原性微孢子虫Nosema Bombyx和SCM6交叉感染家蚕,每种交叉感染设不同病原浓度下的同时攻毒和先后攻毒处理,每2d取样测定中肠碱性磷酸酶活性。试验结果表明,当家蚕受到不同浓度的N.b、SCM6感染及不同组合的交叉感染后,受到感染的... 以家蚕病原性微孢子虫Nosema Bombyx和SCM6交叉感染家蚕,每种交叉感染设不同病原浓度下的同时攻毒和先后攻毒处理,每2d取样测定中肠碱性磷酸酶活性。试验结果表明,当家蚕受到不同浓度的N.b、SCM6感染及不同组合的交叉感染后,受到感染的家蚕中肠AKP活性均出现一定程度的降低,被SCM6/N.b组合感染的家蚕中肠AKP活性高于N.b/SCM6及N.b-SCM6组合。 展开更多

关键词 家蚕微粒子 SCM6 碱性磷酸酶

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家蚕先天免疫基因Bmimd的克隆、表达及序列分析

20

作者 张雨丽 程廷才 +2 位作者 许平震 黄璐琳 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期459-465,共7页

昆虫的先天免疫应答由一组基因通过级联网络调控实现。果蝇Drosophila免疫缺陷(immune deficiency,imd)基因在体液免疫信号传递途径中起着重要的作用。我们利用生物信息学方法进行电子克隆,成功地找到了imd基因在家蚕Bombyx mori中的同... 昆虫的先天免疫应答由一组基因通过级联网络调控实现。果蝇Drosophila免疫缺陷(immune deficiency,imd)基因在体液免疫信号传递途径中起着重要的作用。我们利用生物信息学方法进行电子克隆,成功地找到了imd基因在家蚕Bombyx mori中的同源体,命名为Bmimd。该基因全长1092bp,由4个外显子和3个内含子组成,开放阅读框(openreadingframe,ORF)长750bp,编码250个氨基酸,预测蛋白质分子量为28.6kD。Bmimd序列中含有一个致死结构域,经聚类分析表明该结构域与哺乳动物的受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)相似。将该基因亚克隆到PET-50b载体进行原核表达,表达出了带有2个6×His tag和1个Nus.Tag标签的重组蛋白。Western blotting结果表明Bmimd蛋白在5龄4天家蚕的头、脂肪体、生殖腺、表皮和中肠中都有表达,但丝腺中没有检测到表达。 展开更多

关键词 家蚕 imd基因 克隆 表达 先天免疫

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