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circRNA_103809对结肠癌SW480细胞线粒体功能和炎症因子水平的调节作用 被引量:4
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作者 李毅 李文忠 +2 位作者 师路 高志勇 王聆宇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期969-974,共6页
目的:探究环状RNA(circRNA)_103809对结肠癌SW480细胞作用。方法:qRT-PCR检测结肠癌组织及细胞、正常组织及细胞中circRNA_103809表达。将SW480细胞分为对照组(Control),过表达circRNA_103809组(LV-circRNA_103809)及其阴性对照组(LV-sc... 目的:探究环状RNA(circRNA)_103809对结肠癌SW480细胞作用。方法:qRT-PCR检测结肠癌组织及细胞、正常组织及细胞中circRNA_103809表达。将SW480细胞分为对照组(Control),过表达circRNA_103809组(LV-circRNA_103809)及其阴性对照组(LV-scramble)。除对照组外,按分组分别转染LV-circRNA_103809和LV-scramble质粒。qRT-PCR检测各转染组SW480细胞中circRNA_103809、Ki67和p21表达;CCK8检测各组细胞增殖倍数;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;线粒体膜电位的变化;试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测各组细胞上清液中IL-1β、IL-6和IL-4炎症因子水平,免疫荧光检测p65的核转移;Western blot检测Bax/Bcl-2,活化胱天蛋白酶(cleaved cas)-9/cas-9,cleaved cas-3/cas-3相对表达量及细胞核中p65蛋白的表达。结果:结肠癌组织及细胞中circRNA_103809表达显著下调,p21的表达显著上调(P<0.05)。与对照组相比,过表达circRNA_103809组SW480细胞中circRNA_103809的表达显著上调,Ki67的表达显著下调(P<0.05),细胞增殖倍数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),线粒体膜电位降低,Bax/Bcl-2、cleaved cas-9/cas-9和cleaved cas-3/cas-3显著升高(P<0.05),SOD含量减少,MDA含量增加(P<0.05),促炎因子IL-1β和IL-6水平显著降低,抗炎因子IL-4水平显著升高(P<0.05),细胞核中p65蛋白表达显著下调,核定位显著减少(P<0.05)。结论:circRNA_103809在结肠癌SW480细胞中发挥抑癌作用,抑制细胞增殖,通过增强氧化应激促进细胞凋亡,抑制炎症反应阻止癌细胞发展进程。 展开更多
关键词 结肠癌 circRNA_103809 活化胱天蛋白酶3 超氧化物歧化酶 P65
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过表达环状RNA La相关蛋白4(circ_LARP4)抑制MCF-7人乳腺癌细胞的增殖和迁移及机制 被引量:1
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作者 王聆宇 李文忠 +2 位作者 罗仕云 杜镇鸿 李毅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期244-250,共7页
目的探讨过表达环状RNA La相关蛋白4(circ_LARP4)对MCF-7乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法采用pcDNA-circ_LARP4质粒转染MCF-7细胞,实时荧光定量PCR检测circ_LARP4表达水平。过表达circ_LARP4后,采用CCK-8法检测细胞增殖,实时荧光... 目的探讨过表达环状RNA La相关蛋白4(circ_LARP4)对MCF-7乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法采用pcDNA-circ_LARP4质粒转染MCF-7细胞,实时荧光定量PCR检测circ_LARP4表达水平。过表达circ_LARP4后,采用CCK-8法检测细胞增殖,实时荧光定量PCR检测KI-67抗原(ki67)、p21、一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达,显微镜下观测肿瘤细胞成球体积,Transwell^(TM)检测侵袭细胞数,Western blot法检测八聚体结合转录因子(OCT4)、性别决定区Y框高迁移率族蛋白2(SOX2)、血管内皮生长因子(VEGF)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和神经钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达,ELISA检测MCF-7细胞上清液iNOS和IL-1β水平。结果与对照组相比,circ_LARP4过表达组circ_LARP4表达上调,细胞增殖倍数降低,ki67表达下调,p21表达上调,肿瘤细胞成球体积较小,OCT4和SOX2表达降低,侵袭细胞数减少,VEGF和N-cadherin表达降低,E-cadherin表达增高,iNOS和IL-1β水平降低。结论过表达circ_LARP4抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖、侵袭、干细胞样特性,并下调iNOS和IL-1β水平。 展开更多
关键词 环状RNA La相关蛋白4(circ_LARP4) MCF-7细胞 恶性增殖 侵袭能力
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