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温肾通络止痛方经AMPK/mTOR信号通路调控自噬改善BMSCs细胞衰老
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作者 张天驰 田霖坤 +7 位作者 李沐哲 郭杨 王礼宁 吾米提·塔西 牛园园 高天乐 关钛元 马勇 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第10期1428-1434,1465,共8页
目的探讨温肾通络止痛方(Wenshen Tongluo Zhitong Recipe,WTZR)经AMP依赖的蛋白激酶[Adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]/哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路调控... 目的探讨温肾通络止痛方(Wenshen Tongluo Zhitong Recipe,WTZR)经AMP依赖的蛋白激酶[Adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]/哺乳动物雷帕霉菌靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路调控自噬改善骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老的机制研究。方法利用D-半乳糖制备衰老BMSCs模型并随机分为对照组、模型组、WTZR低剂量组、WTZR中剂量组、WTZR高剂量组。β-半乳糖苷酶染色检测WTZR干预后衰老BMSCs的衰老情况、Western blot与q PCR检测WTZR干预后衰老BMSCs中p16、p21和p53等衰老标志物的变化。ALP染色、茜素红染色及油红O染色观察WTZR干预后BMSCs成骨成脂分化的变化。Western blot及免疫荧光检测自噬相关指标微管相关蛋白1A/1B-轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3B)和Beclin1的蛋白表达,评估WTZR对BMSCs自噬的改变。Western blot检测m TOR、p-mTOR、AMPK及p-AMPK的蛋白表达,检验WTZR对AMPK/m TOR信号通路的影响。结果与模型组相比,WTZR干预后,BMSCs衰老细胞数量降低,BMSCs中p16、p21和p53蛋白及mRNA含量显著减少(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001),WTZR干预后ALP阳性细胞数、茜素红阳性面积增加,油红O染色镜下脂滴数量减少。此外,WTZR可显著增加衰老BMSCs中自噬相关蛋白的含量(P<0.01,P<0.0001),同时温肾通络止痛方可显著提高p-AMPK/AMPK比值(P<0.05),并降低p-mTOR/m TOR的比值(P<0.0001)。结论WTZR可能通过AMPK/m TOR促进自噬从而发挥缓解BMSCs衰老的效果。 展开更多
关键词 骨质疏松 温肾通络止痛方 骨髓间充质干细胞 自噬 衰老
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黄精多糖通过TGF-β3/Smad2信号通路诱导肌腱干细胞向软骨细胞分化的机制研究
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作者 陈俊杰 杨杜江 +6 位作者 何佳洋 袁欣彤 刘映岐 杨杰翔 汪国友 彭腾 沈骅睿 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第10期1374-1382,共9页
目的:验证黄精多糖(polygonatum polysaccharide,PSP)联合TGF-β3通过激活TGF-β3/Smad2通路诱导大鼠肌腱干细胞(TDSCs)向软骨细胞分化的作用。方法:通过酶消化法从大鼠尾腱提取TDSCs,纯化、传代及流式细胞术鉴定;不同浓度PSP干预TDSCs... 目的:验证黄精多糖(polygonatum polysaccharide,PSP)联合TGF-β3通过激活TGF-β3/Smad2通路诱导大鼠肌腱干细胞(TDSCs)向软骨细胞分化的作用。方法:通过酶消化法从大鼠尾腱提取TDSCs,纯化、传代及流式细胞术鉴定;不同浓度PSP干预TDSCs,通过CCK-8法筛选出最佳生长浓度;将TDSCs分为PSP组、TGF-β3组、PSP+TGF-β3组、Control组诱导分化,通过形态学观察、甲苯胺蓝细胞染色、免疫荧光染色、Western blot检测Ⅱ型胶原(COLⅡ)、SOX9、聚集蛋白聚糖(AGG)观察软骨分化情况;Western blot法检测诱导成软骨分化后TGF-β3/Smad2信号通路相关因子Smad2、p-Smad2的表达水平。结果:流式细胞术检测证实TDSCs高表达CD90和CD29,低表达CD11b和CD45;CCK-8实验筛选确定5μmol/L PSP为最佳干预剂量。甲苯胺蓝染色结果显示,PSP组、TGF-β3组及PSP+TGF-β3组的蓝染面积均显著大于Control组。进一步通过细胞免疫荧光观察到,PSP组、TGF-β3组及PSP+TGF-β3组的COLⅡ荧光表达强度显著增强,其中PSP+TGF-β3组表达最高(P<0.05)。Western blot分析表明,PSP组、TGF-β3组及PSP+TGF-β3组均能显著提升p-Smad2/Smad2比值及软骨标志物COLⅡ、SOX9、AGG的表达水平(P<0.05),且PSP+TGF-β3组表达量最高(P<0.05)。结论:PSP能促进TDSCs增殖、成软骨分化,其可能通过激活TGF-β3/Smad2从而促进TDSCs成软骨细胞分化。 展开更多
关键词 软骨损伤 黄精多糖 TGF-β3/Smad2信号通路 肌腱干细胞 成软骨诱导
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自体胫骨带骨膜骨移植治疗距骨内侧骨软骨损伤 被引量:19
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作者 袁毅 王涛 +1 位作者 周兵华 唐康来 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期282-286,共5页
目的:探讨经内踝截骨、胫骨带骨膜骨移植治疗距骨内侧骨软骨损伤的临床疗效。方法:总结第三军医大学西南医院2014年1月至2015年8月,采用内踝截骨、病灶清理、胫骨带骨膜骨移植治疗距骨内侧骨软骨损伤28例。术中经内踝截骨,显露内侧距骨... 目的:探讨经内踝截骨、胫骨带骨膜骨移植治疗距骨内侧骨软骨损伤的临床疗效。方法:总结第三军医大学西南医院2014年1月至2015年8月,采用内踝截骨、病灶清理、胫骨带骨膜骨移植治疗距骨内侧骨软骨损伤28例。术中经内踝截骨,显露内侧距骨顶,清理碎裂软骨,去除病灶及囊肿,自同侧胫骨钻取带骨膜骨柱,采取打压固定技术将骨柱植入受区钻好的孔中,固定内踝截骨块。观察患者术前术后踝关节X线片、MRI,在PACS系统测量比较距骨骨软骨损伤水肿区域的左右径、前后径及深度变化,比较术前及术后末次随访时美国足踝外科协会(AOFAS)踝与后足评分。结果:本组共23例患者获最终随访,随访时间15个月(10~28月),X线片证实术后平均11周(9~14周)内踝截骨端愈合,MRI检查显示患者术后病灶骨髓水肿区域较术前明显减小,差异具有统计学意义(P<0.01),1例患者形成软骨组织稍高于周围关节软骨,2例患者软骨下骨囊肿未完全消失,6例取内固定时行关节镜检,其中5例移植物与周围关节软骨愈合良好,表面被软骨样组织覆盖,其色泽、光滑度等与周围软骨面差异较小,患者AOFAS踝与后足评分均较术前明显改善(P<0.05),随访期间未见供区疼痛、伤口感染、内固定失效等并发症。结论:对于Ⅲ~Ⅴ期距骨骨软骨损伤,经内踝截骨、病灶清理、胫骨带骨膜骨移植可修复软骨缺损,减轻疼痛,改善关节功能,是一种有效的治疗方法。 展开更多
关键词 自体 骨膜 骨移植 距骨 骨软骨损伤
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少阳主骨方介导p19^(Arf)-p53-p21^(Cip1)信号通路调控食蟹猴关节软骨退变的机制 被引量:8
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作者 周鑫 张磊 +5 位作者 扶世杰 刘刚 郭晓光 易刚 刘洋 汪国友 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期346-352,共7页
目的根据"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方介导p19Arf-p53-p21Cip1信号通路调控关节软骨退变的机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生... 目的根据"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方介导p19Arf-p53-p21Cip1信号通路调控关节软骨退变的机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生理盐水组,每组4只,连续灌胃8周后处死所有食蟹猴,取关节软骨进行病理学观察,RT-q PCR、Western blot检测关节软骨中p19Arf、p53、p21Cip1基因与蛋白的表达。结果老年食蟹猴KOA模型关节软骨符合KOA病理变化,3组食蟹猴Mankin评分少阳主骨方组7.38±0.52分、氨糖美辛组7.88±0.83分、生理盐水组8.38±0.74分,少阳主骨方组与生理盐水组间具有统计学差异(P<0.05);p19Arf、p53、p21Cip1基因与蛋白的表达少阳主骨方组<氨糖美辛组<生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05)。结论少阳主骨方可以延缓关节软骨退变,调控p19Arf-p53-p21Cip1表达。 展开更多
关键词 少阳主骨 食蟹猴KOA模型 细胞衰老 p19Arf-p53-p21Cip1信号通路
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颈椎前路术后吞咽困难危险因素的Meta分析 被引量:11
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作者 陈波 黄天宇 +2 位作者 杨林 杨杰翔 瞿霞 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1011-1022,共12页
目的:系统评价颈椎前路术后发生吞咽困难的危险因素,明确独立危险因素,为颈椎前路手术围术期并发症的防治提供指导。方法:检索万方数据库(WanFang)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、维普(VIP)、PubMed、Embase、Cochrane... 目的:系统评价颈椎前路术后发生吞咽困难的危险因素,明确独立危险因素,为颈椎前路手术围术期并发症的防治提供指导。方法:检索万方数据库(WanFang)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)、维普(VIP)、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science共8个数据库,检索时限从建库至2023年7月15日,搜索关于颈椎前路术后吞咽困难的危险因素的病例对照研究和队列研究,采用纽卡斯尔-渥太华质量评定量表(Newcastle-Ottawa Scale,NOS)对纳入研究进行质量评价和数据提取(包括第一作者、发表年份、研究类型、样本量、评估方式、评估时间及危险因素),通过Stata12软件进行Meta分析。结果:共纳入29篇文献,其中队列研究4篇,病例对照研究25篇,所有文献均为高质量研究,包括颈椎前路术后吞咽困难患者89571例,对照组3092967例。年龄[优势比(odds ratio,OR)=1.093,95%置信区间(confidential interval,CI):1.067~1.120]、女性(OR=2.419,95%CI:1.654~3.539)、糖尿病(OR=2.733,95%CI:2.240~3.333)、病程(OR=4.259,95%CI:2.458~7.381)、手术节段数量(OR=1.791,95%CI:1.718~1.868)、手术节段位置(OR=2.332,95%CI:1.812~3.003)、手术时间(OR=1.434,95%CI:1.110~1.852)、钢板内置物(OR=2.188,95%CI:1.413~3.175)及翻修手术(OR=2.687,95%CI:2.316-3.119)与颈椎前路术后发生吞咽困难相关,而吸烟(OR=1.323,95%CI:0.852~2.056)、高血压(OR=1.006,95%CI:0.591~1.713)、体重指数(body mass index,BMI)(OR=1.037,95%CI:0.929~1.159)、颈椎间盘置换(OR=0.577,95%CI:0.085~3.943)、C2-7角度变化(difference between postoperative and preoperative C2-C7 angle,dC2-7)>5°(OR=1.716,95%CI:0.925~3.183)等因素与其不相关。结论:女性、高龄、术前病程长、合并糖尿病、双节段或多节段手术、高位颈椎手术、手术时间长、使用钢板及翻修手术的患者颈椎前路术后更易发生吞咽困难。 展开更多
关键词 颈椎前路手术 吞咽困难 危险因素 META分析
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少阳主骨方对食蟹猴自然退变膝关节骨性关节炎模型p16/Rb信号通路的影响 被引量:7
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作者 周鑫 张磊 +3 位作者 扶世杰 刘刚 郭晓光 汪国友 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期655-660,共6页
目的根据中医"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方延缓关节软骨细胞衰老和退变的作用机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴作为动物模型,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生... 目的根据中医"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方延缓关节软骨细胞衰老和退变的作用机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴作为动物模型,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生理盐水组,每组4只,连续灌胃8周后处死所有食蟹猴,对关节软骨进行病理学观察,RT-q PCR、Western-blot检测关节软骨中p16、Rb基因与蛋白的表达。结果老年食蟹猴KOA模型关节软骨病理改变符合KOA病理变化特点,三组食蟹猴Mankin评分少阳主骨方组(7.5±0.53)分、氨糖美辛组(7.75±0.71)分、生理盐水组(8.25±0.46)分,少阳主骨方组与生理盐水组间具有统计学差异(P<0.05);p16基因与蛋白的表达少阳主骨方组<氨糖美辛组<生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05);Rb基因与蛋白的表达少阳主骨方组>氨糖美辛组>生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05)。结论少阳主骨方可以通过p16/Rb途径延缓关节软骨细胞衰老,从而延缓关节软骨退变。 展开更多
关键词 少阳主骨 食蟹猴膝关节骨性关节炎模型 细胞衰老 p16/Rb信号通路
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金天格胶囊联合阿法骨化醇对四肢骨折患者的临床疗效 被引量:6
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作者 王丽彬 辜智岗 +6 位作者 喻林 刘锐锋 刘念 罗容 熊正容 林小燕 扶世杰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3179-3183,共5页
目的 探讨金天格胶囊联合阿法骨化醇对四肢骨折患者的临床疗效。方法 96例患者随机分为对照组(47例)和观察组(49例),均行手术复位,对照组给予阿法骨化醇,观察组在对照组基础上加用金天格胶囊,疗程8周。检测2组临床疗效、骨折愈合进程指... 目的 探讨金天格胶囊联合阿法骨化醇对四肢骨折患者的临床疗效。方法 96例患者随机分为对照组(47例)和观察组(49例),均行手术复位,对照组给予阿法骨化醇,观察组在对照组基础上加用金天格胶囊,疗程8周。检测2组临床疗效、骨折愈合进程指标(骨痂生长评分、骨折愈合时间)、骨再生相关因子(TGF-β1、BMP-2、VEGF)、骨代谢指标(BALP、BGP、TRACP-5b、CTX-Ⅰ)、并发症发生率变化。结果 观察组总有效率高于对照组(P<0.05),骨折愈合时间更短(P<0.05),并发症发生率更低(P<0.05)。治疗后,2组骨痂生长评分、骨再生相关因子、BALP、BGP升高(P<0.05),TRACP-5b、CTX-Ⅰ降低(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论 金天格胶囊联合阿法骨化醇可安全有效地提高四肢骨折患者TGF-β1、BMP-2、VEGF水平,有利于骨再生,从而可促进骨折愈合进程。 展开更多
关键词 金天格胶囊 阿法骨化醇 四肢骨折
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武汉地区94例普通型与重型、危重型COVID-19患者临床特征比较 被引量:2
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作者 林玲 袁雨来 +6 位作者 敖素华 张韬 梁敏 王俊峰 杨峰 杨思进 王饶琼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期929-936,共8页
目的:分析新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)重型及危重型患者临床特征,为早期识别及干预此类患者提供可用临床依据。方法:回顾性分析2020年1月24日至3月10日在武汉市红十字会医院确诊为COVID-19的出院患者临床资料... 目的:分析新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)重型及危重型患者临床特征,为早期识别及干预此类患者提供可用临床依据。方法:回顾性分析2020年1月24日至3月10日在武汉市红十字会医院确诊为COVID-19的出院患者临床资料,根据病情严重程度,分为普通型、重型及危重型,比较重型及危重型患者与普通型患者人口学特征、临床特征、治疗及转归情况。结果:共纳入COVID-19确诊患者94例,其中男性46例,女性48例,中位年龄54岁,重型及危重型患者25例,普通型患者69例,治愈56例,好转32例,死亡6例。高血压、糖尿病、冠心病为COVID-19患者最常见的合并症,咳嗽、发热、乏力为其主要临床表现,磨玻璃影为胸部影像学特征。与普通型患者相比,重型及危重型患者年龄更大;高热、干咳及呼吸困难比例更高;淋巴细胞绝对计数及比值、白蛋白水平均明显下降[(0.80±0.11)×10^9个/L vs.(1.34±0.10)×10^9个/L,P<0.001;(15.510±1.913)%vs.(25.590±1.503)%,P<0.001;33.85(28.28~38.33)g/L vs.38.70(36.03~41.43)g/L,P=0.003],但中性粒细胞比值及C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)明显增高[74.70(64.65~88.40)%vs.62.25(53.53~72.60)%,P=0.002;65.15(11.23~123.49)mg/L vs.4.51(1.54~15.39)mg/L,P<0.001]。重型及危重型患者胸部CT以双肺磨玻璃病变为主。治疗方面,重型及危重型患者使用3种及以上抗病毒药物比例和抗炎药物使用较普通型更高,但治愈率较普通型患者更低且死亡率更高。此外,治愈患者使用中药的比例高于死亡患者[23(41.07)vs.1(16.67),P=0.082]。结论:重型及危重型COVID-19患者死亡率高,年龄更大,以老年患者居多,发热、干咳、呼吸困难为主要临床表现,实验室检查提示淋巴细胞绝对值及比值、白蛋白均明显降低,CRP及中性粒细胞比值增加,影像学以双肺磨玻璃病变为主,预后较差,死亡率高。目前针对COVID-19尚无疗效确切的治疗手段,中药及中成药的临床疗效需要更大样本、设计严格的临床研究进一步证实。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 重型及危重型 普通型 临床特征 中医
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