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柴黄益肾颗粒对单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化的作用及其机制 被引量:4
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作者 谢柯欢 张浩军 +4 位作者 谭睿陟 粟宏伟 刘鹏 李平 王丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期804-813,共10页
目的探讨柴黄益肾颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的作用及其机制。方法将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组及柴黄益肾颗粒低、高剂量组(n=6)。对照组仅暴露且游离右侧肾输尿管;模型组行UUO建立UUO动物模型;柴黄... 目的探讨柴黄益肾颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的作用及其机制。方法将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组及柴黄益肾颗粒低、高剂量组(n=6)。对照组仅暴露且游离右侧肾输尿管;模型组行UUO建立UUO动物模型;柴黄益肾颗粒低、高剂量组按模型组方法建立UUO小鼠模型并分别予以3.8、7.6 g/kg柴黄益肾颗粒灌胃,7 d后麻醉处死小鼠收集肾标本。采用HE、Masson染色观察肾脏病理变化及纤维化程度,天狼星红染色观察胶原沉积情况。采用Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)相关蛋白的表达水平。采用RT-PCR检测A33及GSK-3β、β-catenin mRNA水平的变化。同时,以正常小鼠肾小管上皮细胞(TCMK1)作为正常组,并利用转化生长因子-β(TGF-β)刺激TCMK1建立体外纤维化模型,柴黄益肾颗粒含药血清处理建立体外用药模型;并通过转染A33过表达质粒在TCMK1细胞内过表达A33,观察纤维化相关指标及A33及GSK-3β、β-catenin mRNA的表达变化。结果RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组A33水平明显升高,而柴黄益肾颗粒高、低剂量组明显降低(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,模型组α-SMA、FN、Col-Ⅰ等纤维化相关因子的表达水平明显高于对照组(P<0.05);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组α-SMA、FN、Col-Ⅰ的表达水平明显降低(P<0.05)。HE、Masson、免疫组化染色结果显示,与对照组比较,模型组肾脏结构损伤严重,胶原沉积明显增加,且GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组肾脏结构良好,肾脏损伤及纤维化均明显好转,GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。体外实验结果证实,与正常组比较,A33过表达可促进TCMK1细胞纤维化相关因子的上调,明显增加Wnt/β-catenin信号通路下游靶点GSK-3β和β-catenin mRNA的表达(P<0.05),且A33过表达可逆转柴黄益肾颗粒含药血清下调的细胞纤维化改变(P<0.01)。结论柴黄益肾颗粒可通过下调A33/Wnt/β-catenin信号通路明显减缓UUO小鼠肾纤维化,且A33可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标。 展开更多
关键词 柴黄益肾颗粒 肾纤维化 WNT/Β-CATENIN信号通路
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黄芪三七合剂抑制lncRNA Gm51500/Adam12轴改善CKD肾脏纤维化
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作者 林婧怡 韩壤乐 +3 位作者 徐玲慧 谭睿陟 粟宏伟 王丽 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第6期750-762,共13页
目的:通过对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠组及黄芪三七合剂干预组的肾脏进行转录组测序,利用生物信息学验证差异显著的lncRNA,探究黄芪三七合剂对改善肾脏纤维化的潜在机制。方法:将24只C57小鼠分为假手术组、肾脏纤维化组、黄芪三七合剂干... 目的:通过对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠组及黄芪三七合剂干预组的肾脏进行转录组测序,利用生物信息学验证差异显著的lncRNA,探究黄芪三七合剂对改善肾脏纤维化的潜在机制。方法:将24只C57小鼠分为假手术组、肾脏纤维化组、黄芪三七合剂干预组(3.944 g/kg)及厄贝沙坦阳性对照干预组,每组6只小鼠。采用单侧输尿管结扎建立肾纤维化小鼠模型。术后予以灌胃给药,连续给药7 d后处死动物并采集标本。通过HE、Masson染色分析黄芪三七合剂对肾纤维化病理损伤的改变,同时通过Western blot、免疫组化检测各组肾脏组织Fn、α-SMA的蛋白水平,评估黄芪三七合剂对肾纤维化的缓解作用。随后通过转录组测序,获取了lncRNA的表达信息,在分析数据质量、GO富集和差异lncRNA后进行Quantitative Real-time PCR(qPCR)验证,根据测序所获得的差异lncRNA及靶点分析结果,在体外过表达lncRNA Gm51500/Adam12,用免疫组化及免疫荧光染色和qPCR验证的方式,研究其在黄芪三七合剂保护肾脏纤维化中的作用机制。结果:与模型组比较,黄芪三七合剂干预组小鼠的肾脏纤维化明显减轻,其肾脏组织中α-SMA、Fn的蛋白水平及lncRNA的表达量均显著下调(P<0.0001)。筛选并验证3个lncRNA在模型组增加且黄芪三七合剂干预后显著降低,分别为lncRNA Gm29994、Gm51500及Gm35391。靶点分析显示lncRNA Gm51500与Adam12的关系最显著。动物实验结果表明,Adam12在UUO小鼠肾脏中高表达,黄芪三七合剂干预后被显著抑制。随后的细胞实验证实,过表达lncRNA Gm51500可上调TGF-β诱导的肾小管细胞纤维化以及Adam12的表达。细胞回复实验明确了过表达Adam12逆转了黄芪三七合剂对肾小管细胞损伤和纤维化的抑制作用。结论:黄芪三七合剂可以改善肾脏纤维化,基于转录组测序发现lncRNA Gm51500/Adam12轴可能是黄芪三七合剂改善肾脏纤维化的潜在靶点。 展开更多
关键词 黄芪三七合剂 肾脏纤维化 lncRNA 高通量测序
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肾纤康调控Emp3/Tgf-β/Smad3信号通路改善肾纤维化的研究
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作者 倪玉芳 张璐娜 +6 位作者 晏姝涵 李倩倩 粟宏伟 胡琼丹 张琼 王丽 李健春 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第4期501-511,共11页
目的评估中药复方肾纤康对肾损伤和纤维化的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)建立慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)小鼠模型,并随机分为假手术组、模型组及肾纤康... 目的评估中药复方肾纤康对肾损伤和纤维化的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)建立慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)小鼠模型,并随机分为假手术组、模型组及肾纤康低、高剂量组(1500、4500 mg/(kg·d)),每组8只。肾纤康各组每天灌胃不同剂量的肾纤康,其余小鼠灌胃等量的生理盐水,持续7 d。实验结束后,收集肾组织,通过苏本素-伊红(HE)和Masson染色评估肾损伤和纤维化。用Real-time PCR、免疫组化和Western Blot检测纤维化标志物、上皮膜蛋白3(epithelial membrane protein 3,Emp3)及Tgf-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。细胞实验中,通过Emp3回复实验和Co-IP分析肾纤康对Emp3/Tgf-β/Smad3通路及其与转化生长因子β受体2(TGF-beta receptor R2,Tgfβ2)相互作用的影响。结果肾纤康干预显著改善了UUO模型组中的免疫细胞浸润和肾小管萎缩,降低了肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,Kim1)和脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Lcn2)的表达,验证了其在减轻肾损伤方面的效果。Masson染色及纤维化标志物纤连蛋白(fibronectin,Fn)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的检测结果显示,肾纤康能有效抑制UUO诱导的纤维化进程。机制研究发现,肾纤康通过特异性下调Emp3/Tgf-β/Smad3信号通路的异常活化发挥作用,细胞实验进一步证实了肾纤康通过调节Emp3来影响Tgf-β/Smad3信号传导。Co-IP实验结果显示,肾纤康通过调控Emp3与Tgfβ2的相互作用来发挥作用。结论肾纤康对慢性肾病小鼠模型表现出显著的保护作用,能够有效减轻肾损伤和纤维化。其机制可能与下调Emp3/Tgf-β/Smad3信号通路的活化有关,提示肾纤康在肾保护方面具有潜在的治疗价值。 展开更多
关键词 肾纤康 慢性肾病 肾纤维化 Emp3 Tgf-β/Smad3
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常春藤素皂苷元介导Axin2/AREG轴抑制炎症缓解小鼠急性肾损伤
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作者 徐玲慧 梁颖兰 +4 位作者 粟宏伟 李健春 李贵平 王丽 邹远霞 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第2期157-168,共12页
目的 探讨常春藤素皂苷元(hederagenin, HDG)对顺铂(cisplatin, Cis)诱导的急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)小鼠的保护作用及潜在机制。方法 将24只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、AKI模型组、HDG低剂量组HDG高剂量组,每组各6... 目的 探讨常春藤素皂苷元(hederagenin, HDG)对顺铂(cisplatin, Cis)诱导的急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)小鼠的保护作用及潜在机制。方法 将24只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、AKI模型组、HDG低剂量组HDG高剂量组,每组各6只。通过腹腔注射Cis 20 mg/kg建立小鼠AKI模型,HDG低剂量组及HDG高剂量组分别给予20、40 mg/kg灌胃HDG,3 d后进行取材。收集小鼠肾进行苏木素-伊红(HE)及糖原(periodic acid-schiff, PAS)染色评估肾病理情况,收集血清检测肌酐、尿素氮的变化,Western Blot检测p-P65、P65、IL-6、TNF-α、IL-1β等炎症相关蛋白的表达。体外使用Cis 200 ng/mL刺激肾小管上皮细胞(TCMK1)建立炎症细胞模型,设置空白组、Cis模型组、HDG低剂量组、HDG高剂量组、Axin2过表达组、HDG+Axin2过表达组,收取细胞蛋白后检测p-P65、P65、IL-6、TNF-α、IL-1β、Axin2、AREG的表达变化。结果与对照组相比,AKI模型组小鼠血清肌酐和尿素氮水平明显升高(P<0.05),并伴随肾小管空泡变性、炎细胞浸润及糖原沉积等病理改变,炎症相关蛋白p-P65、TNF-α、IL-6、IL-1β及Axin2表达均显著上调(P<0.05)。HDG干预后,血清肌酐和尿素氮水平呈剂量依赖性下降(高剂量组降幅>低剂量组降幅,P<0.05),肾组织病理损伤明显减轻,上述炎症因子及Axin2表达同步降低(P<0.05)。体外实验证实HDG可剂量依赖性抑制Gis诱导的TCMK1细胞中Axin2及相关炎症因子表达。转录组测序显示Axin2过表达显著上调双调蛋白(AREG)表达(P<0.05)。机制研究表明,HDG通过抑制Axin2/AREG轴降低p-P65磷酸化水平(P<0.05),而Axin2过表达可逆转HDG对Cis诱导肾小管细胞损伤的保护作用。结论 HDG通过抑制Axin2/AREG轴的激活减轻炎症,缓解AKI小鼠肾损伤。 展开更多
关键词 常春藤素皂苷元 急性肾损伤 Axin2 AREG 炎症
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骨髓间充质干细胞源外泌体miR-21-5p通过下调PHLPP2促进前列腺癌PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:6
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作者 柯井卫 沈宏春 +2 位作者 刘星 戟美英 唐义权 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期534-540,共7页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)来源的外泌体对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:采用q PCR检测miR-21-5p在前列腺癌细胞系中的表达水平。采用电子显微镜观察BMSC分离... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)来源的外泌体对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:采用q PCR检测miR-21-5p在前列腺癌细胞系中的表达水平。采用电子显微镜观察BMSC分离出的外泌体形态,Western blotting检测外泌体表面标志物的表达以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-21-5p和同源血小板富亮氨酸复重蛋白磷酸酶2(PH domain leucine-rich repeat protein phosphatase 2,PHLPP2)的靶向调控关系。向PC-3细胞培养液中加入10μl的BMSC外泌体悬液(Exo组)、转染sh-PHLPP2或antagomiR,CCK-8和Transwell实验检测PC-3细胞增殖和迁移能力。结果:miR-21-5p在前列腺癌PC-3细胞系中高表达。成功分离BMSC培养液上清中的外泌体,透射电子显微镜下观察到外泌体典型的囊泡状结构,且表达CD9、CD63和CD81等特异性蛋白。Exo组中PC-3细胞的增殖、侵袭[(421.34±22.45)vs(200.09±14.22)个,P<0.05]、迁移能力和N-cadherin、Vimentin和miR-21-5p的表达水平均显著高于对照组(均P<0.05)。证实PHLPP2是miR-21-5p的靶基因。与对照组相比,Exo组和sh-PHLPP2组PC-3细胞中PHLPP2的表达明显降低(0.66±0.09、0.42±0.05 vs 1.09±0.08,均P<0.01),细胞增殖、侵袭和迁移[(87.23±12.67)%、(82.45±10.13)%vs(66.46±9.13)%]能力均显著提高(均P<0.01),E-cadherin表达水平显著降低而N-cadherin和Vimentin表达水平显著升高(均P<0.05)。结论:miR-21-5p在前列腺癌PC-3细胞系中高表达,BMSC外泌体miR-21-5p通过靶向下调PHLPP2提高PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 miR-21-5p 同源血小板富亮氨酸复重蛋白磷酸酶2 前列腺癌 PC-3细胞 增殖 迁移
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“扶正清热通淋”方剂对产ESBLs大肠埃希菌所致复杂性尿路感染大鼠的作用研究 被引量:5
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作者 刘樊 粟宏伟 +2 位作者 贺天文 朱永生 刘鑫 《海南医学院学报》 CAS 2019年第19期1447-1450,1454,共5页
目的:观察“扶正清热通淋”方剂对产ESBLs大肠杆菌所致大鼠复杂性尿路感染的作用及其可能机制。方法:建立复杂性尿路感染大鼠模型,大鼠随机分为模型组,左氧氟沙星组,扶正清热通淋低、高剂量组,左氧氟沙星+扶正清热通淋组,另设空白组,造... 目的:观察“扶正清热通淋”方剂对产ESBLs大肠杆菌所致大鼠复杂性尿路感染的作用及其可能机制。方法:建立复杂性尿路感染大鼠模型,大鼠随机分为模型组,左氧氟沙星组,扶正清热通淋低、高剂量组,左氧氟沙星+扶正清热通淋组,另设空白组,造模后2 d开始灌胃给药,连续14 d。观察大鼠一般情况,大鼠尿液做细菌培养,HE染色光镜下观察肾脏病理改变,检测血液白细胞(WBC)及中性粒百分比(NEUT%),ELISA法检测血液C反应蛋白(CRP)、CD4+、CD8+分子及尿液中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)分子的浓度。结果:模型组和左氧氟沙星组肾脏可见大量炎症细胞,余治疗组炎性细胞明显减少;除左氧氟沙星组,余各治疗组大鼠血液中NEUT%和CRP以及尿液中NAG明显低于模型组(P<0.05);与模型组相比,除左氧氟沙星外,余治疗组血清CD4分子浓度以及CD4/CD8比值明显降低,CD8分子明显升高(P<0.05)。结论:“扶正清热通淋”方能减轻复杂性尿路感染大鼠全身和局部的炎症,并且可能有使不敏感抗菌药重新对细菌敏感的作用,也可能有调节大鼠免疫功能及保护肾功能的作用。 展开更多
关键词 中药 扶正清热通淋 复杂性尿路感染 ESBLS
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经尿道留置膀胱异物并注射产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌建立尿路感染大鼠模型 被引量:4
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作者 贺天文 粟宏伟 +3 位作者 邱玉环 朱永生 罗松涛 刘鑫 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1262-1266,共5页
目的目前传统尿路感染模型操作过程复杂、易于感染,而单纯经尿道注射细菌模型又不够稳定。文章探究采用经尿道留置膀胱异物加注射产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的方法建立尿路感染大鼠模型的可行性。方法SD大鼠随机数字表法分... 目的目前传统尿路感染模型操作过程复杂、易于感染,而单纯经尿道注射细菌模型又不够稳定。文章探究采用经尿道留置膀胱异物加注射产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的方法建立尿路感染大鼠模型的可行性。方法SD大鼠随机数字表法分为空白组,无异物7、14 d组,异物7、14 d组。异物组经尿道置入异物加注射产ESBLs大肠埃希菌菌液,无异物和空白组分别注入等量菌液和无菌等渗盐水。检测双侧肾重指数、血液白细胞及中性粒计数、尿液及肾细菌学和病理学变化。结果与空白组左、右肾重指数[(32.13±1.10)×10^(-2),(32.18±0.90)×10^(-2)]比较,异物7 d组左、右肾重指数[(42.83±1.43)×10^(-2),(41.28±1.55)×10^(-2)]增加(P<0.01),异物14 d组左、右肾重指数[(38.15±1.40)×10^(-2),(39.10±3.01)×10^(-2)]增加(P<0.01);与无异物7d组比较,异物7d组左、右肾重指数增加[(31.08±0.91)×10^(-2)vs (42.83±1.43)×10^(-2),(31.62±0.81)×10^(-2)vs (41.28±1.55)×10^(-2),P<0.01];与无异物14 d组比较,异物14 d组左、右肾重指数均增加[(32.97±0.64)×10^(-2)vs(38.15±1.40)×10^(-2),(33.17±0.27)×10^(-2)vs (39.10±3.01)×10^(-2),P<0.01]。空白组、无异物14d组肾及尿液均未培养出细菌;无异物7 d组尿液细菌培养(阳性率33.3%)、肾未培养出细菌;异物7、14 d组肾及尿液细菌培养,阳性率100%。异物组肾及尿液细菌培养计数结果:肾和尿液7 d培养计数分为106CFU/g、107CFU/mL,14 d培养计数分为103CFU/g、106CFU/mL。与空白组比较,异物7 d组白细胞总数升高(P<0.05),异物7 d组、异物14 d组中性粒百分率升高(P<0.01)。与无异物7 d组比较,异物7 d组白细胞总数、中性粒百分率升高(P<0.05);与无异物14 d组比较,异物14 d组中性粒百分率升高(P<0.01)。异物7 d组上皮细胞有严重的水肿和大量炎症细胞浸润、黏膜下细菌菌落、少许上皮细胞脱落,异物14 d组上皮细胞连续性完全中断、大量的上皮细胞脱落及炎症细胞浸润,黏膜下成团的细菌菌落。镜下肾HE染色:异物7 d组广泛的肾盏黏膜充血、水肿,黏膜下小脓肿、出血,大量炎症细胞浸润,肾小管部分上皮细胞坏死脱落;异物14 d组肾盏有炎症改变,肾小管萎缩、扩张、坏死脱落等管型改变,部分肾小球形态改变及周围少许纤维组织形成。结论经尿道留置膀胱异物加注射产ESBLS大肠埃希菌可建立高成功率、稳定的尿路感染大鼠模型。 展开更多
关键词 大鼠模型 尿路感染 膀胱异物 产超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌
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“扶正清热通淋”汤通过调节NLRP3炎症小体通路对大鼠复杂性尿路感染作用的研究 被引量:1
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作者 钟禹文 粟宏伟 +3 位作者 罗小全 赖俊谕 朱永生 刘鑫 《海南医学院学报》 CAS 2023年第6期415-421,共7页
目的:探讨“扶正清热通淋”汤能否通过调节NOD样受体蛋白3(Nod‑like receptor pyrin domain3,NLRP3)炎症小体改善耐药大肠杆菌所致大鼠复杂性尿路感染对泌尿系的损害,并探讨该汤剂联合左氧氟沙星治疗耐药菌所致复杂尿路感染的可行性。方... 目的:探讨“扶正清热通淋”汤能否通过调节NOD样受体蛋白3(Nod‑like receptor pyrin domain3,NLRP3)炎症小体改善耐药大肠杆菌所致大鼠复杂性尿路感染对泌尿系的损害,并探讨该汤剂联合左氧氟沙星治疗耐药菌所致复杂尿路感染的可行性。方法:将SD大鼠分为5组:空白对照组、模型组、左氧氟沙星组(西药组)、左氧氟沙星+扶正清热通淋汤组(中西组)、扶正清热通淋汤组(中药组)。实验完成后,取尿液做细菌培养以判断各组大鼠尿路感染情况;HE染色观察大鼠肾脏及膀胱组织病理改变情况;免疫组化检测NLRP3在肾脏及膀胱组织中表达情况;ELISA检测大鼠血清中IL‑1β及IL‑18表达情况;Western blotting检测NLRP3、ASC、Caspase‑1表达情况。结果:空白组尿液细菌培养阳性率为0%,模型组尿液细菌培养阳性率为100%;中西组尿液细菌培养阳性率为37.50%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组肾脏及膀胱组织HE染色可见大量炎症细胞,西药组及中药组肾脏及膀胱组织与模型组比较炎症细胞数量明显减少;中西组中肾脏及膀胱组织中炎症细胞数量及组织结构变化与空白组接近。中西组和中药组的肾脏及膀胱组织的NLRP3免疫组化与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。ELISA检测西药组、中药组和中西组血清中的IL‑1β和IL‑18水平较模型组明显降低(P<0.001)。其中中西组的IL‑1β和IL‑18较西药组和中药组明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting检测西药组、中药组和中西组的NLRP3、ASC、Caspase‑1蛋白表达较模型组明显降低(P<0.001)。中西组的NLRP3、ASC、Caspase‑1蛋白表达较西药组和中药组明显降低,且与两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:“扶正清热通淋”汤可能通过抑制NLRP3炎症小体的活化对耐药大肠杆菌所致复杂性尿路感染大鼠的肾脏和膀胱起保护作用,中药联合左氧氟沙星比单独使用中药或左氧氟沙星治疗疗效更佳。 展开更多
关键词 复杂性尿路感染 耐药大肠杆菌 中药 清热通淋 NLRP3炎症小体
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异鼠李素通过抑制LncRNA-gm33782减轻AKI肾小管炎性细胞凋亡 被引量:2
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作者 贾建 谭睿陟 +2 位作者 钟霞 粟宏伟 王丽 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期762-771,共10页
目的探讨长链非编码RNA-gm33782(LncRNA-gm33782)在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)肾小管损伤中的功能以及异鼠李素改善肾小管炎性细胞凋亡的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组(AKI模型构建后... 目的探讨长链非编码RNA-gm33782(LncRNA-gm33782)在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)肾小管损伤中的功能以及异鼠李素改善肾小管炎性细胞凋亡的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组(AKI模型构建后灌胃给予30 mg/kg异鼠李素)、空载质粒电转染组、LncRNA-gm33782敲低组、LncRNA-gm33782过表达组、LncRNA-gm33782敲低组+模型组、LncRNA-gm33782过表达+治疗组8组,通过腹腔一次性注射20 mg/kg顺铂诱导小鼠AKI,原位电转染技术用于介导肾LncRNA-gm33782的敲低和过表达。采用Chirp实验捕获AKI肾LncRNA-gm33782结合蛋白进行质谱分析,挖掘LncRNA-gm33782直接作用靶蛋白;通过观察电转染敲低LncRNA-gm33782和异鼠李素(isorhamnetin,ISO)治疗干预后小鼠肾功能、病理结构改变、肾炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达,评价LncRNA-gm33782在AKI中的作用;NF-κB被作为介导炎症的关键信号通路,Bax、Bcl-2蛋白表达量以及流式凋亡检测结果被用于评价异鼠李素对AKI肾小管炎性细胞凋亡的治疗作用。结果AKI小鼠肾表现出严重的肾小管损伤以及巨噬细胞浸润和炎症,异鼠李素的治疗干预和LncRNA-gm33782电转染敲低均能够减轻AKI肾损伤。LncRNA-gm33782主要表达于AKI损伤的肾小管细胞,质谱检测发现补体因子-H(complement factor-H,CFH)与其有直接结合关系。体外过表达LncRNA-gm33782后,CFH表达量随即升高,而异鼠李素对AKI细胞炎性凋亡的治疗作用受到抑制。结论异鼠李素是通过抑制LncRNA-gm33782对CFH的调控作用减轻AKI肾小管细胞炎性凋亡。 展开更多
关键词 急性肾损伤 LncRNA-gm33782 肾原位电转染 异鼠李素 炎性凋亡
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汉防己甲素通过抑制Mincle/Syk信号介导的巨噬细胞炎性活化减轻小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤 被引量:1
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作者 彭泽 王洪连 +1 位作者 粟宏伟 王丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期670-678,共9页
目的:探讨汉防己甲素(Tet)对小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤(IRI-AKI)的作用及其机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、IRI-AKI组、低剂量(20 mg/kg)Tet组、高剂量(40 mg/kg)Tet组和槲皮素(50 mg/kg)阳性对照组,每组6只... 目的:探讨汉防己甲素(Tet)对小鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤(IRI-AKI)的作用及其机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、IRI-AKI组、低剂量(20 mg/kg)Tet组、高剂量(40 mg/kg)Tet组和槲皮素(50 mg/kg)阳性对照组,每组6只。采用双侧肾动静脉夹闭45 min后恢复血供的方法建立IRI-AKI模型,Tet和槲皮素组的IRI-AKI小鼠于术前1 h及术后连续3 d给予相应剂量药物腹腔注射,假手术和IRI-AKI组小鼠给予同等体积溶剂注射。实验终点处死动物,收集血清及肾脏组织样本,进行肾功能、病理、mRNA及蛋白等指标检测。在体外,采用脂多糖(LPS;300μg/L)刺激的原代小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)进行Tet(1、2和4 mg/L)的抗炎活性研究。结果:(1)与IRI-AKI组相比,低和高剂量Tet干预均能显著降低血清肌酐和血尿素氮水平(P<0.05),并减轻肾小管病理损伤(P<0.05)。(2)Tet干预可以显著抑制IRI-AKI小鼠肾组织中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的mRNA和蛋白表达及NF-κB信号的活化,减少肾组织巨噬细胞浸润(P<0.05)。(3)在LPS刺激的BMDM中,Tet同样抑制IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达及NF-κB信号的活化(P<0.05)。(4)进一步实验显示,Tet可以显著降低LPS刺激的BMDM和IRI-AKI小鼠肾组织中Mincle、Syk和p-Syk的表达水平(P<0.05)。结论:Tet可以显著减轻IRI-AKI小鼠肾损伤,减轻肾组织炎症反应,其可能的机制为抑制巨噬细胞Mincle/Syk/NF-κB促炎信号通路。 展开更多
关键词 汉防己甲素 急性肾损伤 缺血再灌注 巨噬细胞 Mincle/Syk/NF-κB信号通路
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棱术排石颗粒对肾草酸钙结石作用机制的研究 被引量:10
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作者 柯井卫 朱永生 +3 位作者 唐海 刘鑫 赖俊谕 刘星 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期82-87,共6页
目的探讨棱术排石颗粒对肾草酸钙结石作用及对蛋白激酶C(PKC)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响。方法将32只SPF级SD大鼠随机分为4组(n=8):对照组、模型组、治疗组和抑制剂组。除对照组外,所有大鼠28 d内连... 目的探讨棱术排石颗粒对肾草酸钙结石作用及对蛋白激酶C(PKC)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响。方法将32只SPF级SD大鼠随机分为4组(n=8):对照组、模型组、治疗组和抑制剂组。除对照组外,所有大鼠28 d内连续给予乙二醇及氯化铵诱导大鼠泌尿系草酸钙结石形成,造模同时,治疗组灌胃给予10.0 g/kg的棱术排石颗粒,抑制剂组在此基础上腹腔注射30 mg/kg R031-8220,每天1次,连续28 d。实验结束后,检测各组大鼠24 h尿量、尿pH值、尿草酸(Ox)分泌量、血和24 h尿中Ca^(2+)、Mg^(2+)含量、血液中血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。Vonkossa染色、Western blot检测各组大鼠肾组织病理改变和PKC、Keap1、Nrf2、ARE蛋白的表。结果与对照组相比,模型组大鼠24 h尿量、尿pH及血、尿中Mg^(2+)明显降低,肾中SOD酶活性明显下降,Ox、血、尿中Ca^(2+)、肾MDA水平、ROS荧光强度水平与PKC、Keap1、Nrf2、ARE蛋白表达量明显升高(P<0.05);经棱术排石颗粒治疗后,上述指标均明显逆转,差异均具有统计学意义(P<0.05);抑制剂组与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论棱术排石颗粒可有效改善肾草酸钙结石大鼠的病理状态,可能与激活PKC-Nrf2/ARE抗氧化信号通路降低氧化应激水有关。 展开更多
关键词 棱术排石颗粒 草酸钙 泌尿系结石 氧化应激
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Tamm-Horsfall蛋白对肾结石形成的作用机制 被引量:8
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作者 刘鑫 粟宏伟 +5 位作者 陈洁 朱永生 罗松涛 戢美英 陈开发 唐义权 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第9期922-925,共4页
目的 Tamm-Horsfall蛋白(THP)在肾结石形成过程中可能起一定作用。文中旨在通过建立钙化性纳米微粒(CNPs)大鼠肾结石模型,测定大鼠尿液中THP的变化、肾组织病理改变及钙盐晶体形成情况,对THP在肾结石形成过程中的作用机制进行初步研究... 目的 Tamm-Horsfall蛋白(THP)在肾结石形成过程中可能起一定作用。文中旨在通过建立钙化性纳米微粒(CNPs)大鼠肾结石模型,测定大鼠尿液中THP的变化、肾组织病理改变及钙盐晶体形成情况,对THP在肾结石形成过程中的作用机制进行初步研究。方法取泌尿系患者的结石标本,建立CNPs致大鼠肾结石模型,制成CNPs混悬液。将48只SD大鼠随机分为实验组(注射CNPs混悬液)和对照组(注射等渗盐水),于注射后3 h、6 h、12 h、24 h、1 w、2 w、4 w和8 w收集大鼠尿液,ELISA检测尿液中THP的含量,取肾组织行HE染色观察细胞的病理改变和对钙盐晶体形成情况进行评分。结果实验组24h、1w、2w、4w、8w THP含量[(166.03±3.02)、(173.50±1.78)、(174.55±2.05)、(176.54±2.45)、(177.11±1.76)pg/mL]较3 h[(165.89±2.23)pg/mL]明显增加(P<0.05);亦较对照组24 h、1 w、2 w、4 w、8 w[(157.65±2.22)、(156.54±1.43)、(159.45±3.21)、(158.63±2.98)、(157.33±2.05)pg/mL]明显升高(P<0.05)。与实验组6 h钙盐晶体评分(1.0分)比较,3、6、12、24 h的钙盐晶体评分(均为2.0分)增加,2w后钙盐晶体评分增加显著(3.0分),8w评分最高(6.7分),差异有统计学意义(P<0.05)。钙盐晶体的评分与THP含量呈正相关(r=0.843,P<0.05)。结论尿液中的THP可以促进钙盐晶体的聚集成核,有利于肾结石的形成。 展开更多
关键词 钙化性纳米微粒 肾结石 TAMM-HORSFALL蛋白
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经直肠超声引导下微型可视肾镜在顽固性血精诊疗中的应用 被引量:5
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作者 刘星 赖俊谕 +6 位作者 柯井卫 葛曼青 祝青 粟宏伟 朱永生 罗松涛 刘鑫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1456-1461,共6页
目的探讨经直肠超声(transrectal of ultrasound,TRUS)引导下微型可视肾镜在诊疗顽固性血精中的有效性及安全性。方法收集本院2018年1月至2019年6月收治的14例顽固性血精患者临床资料,术中检查发现难以寻找射精管开口,进入前列腺小囊内... 目的探讨经直肠超声(transrectal of ultrasound,TRUS)引导下微型可视肾镜在诊疗顽固性血精中的有效性及安全性。方法收集本院2018年1月至2019年6月收治的14例顽固性血精患者临床资料,术中检查发现难以寻找射精管开口,进入前列腺小囊内见侧后壁5点或7点钟方向半透明的膜性区域不明显,不适合行经射精管自然通道检查,从而在TRUS引导下采用可视肾镜行小囊侧后壁穿刺进镜,分析经超声引导下微型可视肾镜诊疗效果。结果14例患者均完成精囊镜检,精囊进镜成功率为100%。手术时间35(18~95)min,住院时间3.6(3~5)d,其中精囊内陈旧性血凝块10例,合并精囊结石4例,精囊囊肿2例,精囊内炎性息肉1例,未见明显异常者1例,采用冲洗、扩张、钬激光囊肿去顶减压、碎石取石、息肉切除等治疗。随访6~24个月,术后2~4周血精消失,其中6例射精痛、盆底不适症状患者明显缓解。1例术后6个月血精复发,保守治疗后痊愈。术后1例出现精液稀薄、量多。无直肠损伤、附睾炎、逆行射精等并发症。结论TRUS引导下微型可视肾镜用于诊疗顽固性血精,可精准穿刺进镜,提高手术成功率,避免反复穿刺,降低手术损伤,安全有效,值得临床推广。 展开更多
关键词 顽固性血精 微型可视肾镜 经直肠彩超
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自噬对钙化性纳米微粒致肾结石形成的作用机制 被引量:3
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作者 刘鑫 陈洁 +4 位作者 朱永生 戢美英 陈春梅 陈开发 粟宏伟 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第1期44-49,共6页
目的钙化性纳米微粒(CNPs)与泌尿系结石形成的关系已成为研究的热点,但其致肾结石形成的具体机制尚未明确。文中旨在对CNPs致肾结石形成机制进行研究。方法将48只大鼠随机分为CNPs组(每只大鼠经尾静脉注射2mL CNPs,建立CNPs的大鼠肾结... 目的钙化性纳米微粒(CNPs)与泌尿系结石形成的关系已成为研究的热点,但其致肾结石形成的具体机制尚未明确。文中旨在对CNPs致肾结石形成机制进行研究。方法将48只大鼠随机分为CNPs组(每只大鼠经尾静脉注射2mL CNPs,建立CNPs的大鼠肾结石模型)、对照组(注射等量的无菌等渗盐水),每组24只。比较2组3 h、6 h、12 h、24 h、1周、2周、4周、8周时间点肾组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC-3蛋白的相对表达量、自噬体的形成和钙盐晶体形成情况。结果CNPs组3 h、6 h、12 h、24 h、1周、2周、4周、8周Beclin-1、LC-3蛋白的相对表达量及阳性细胞数较对照组明显增高(P<0.05),24 h达到最高值(P<0.05)。CNPs组24 h、1周、2周、4周、8周自噬体数量[(2.83±0.32)、(3.00±0.26)、(3.70±0.44)、(3.90±0.98)、(4.70±0.51)个/HP]较对照组[(0.73±0.15)个/HP]明显增加(P<0.05)。CNPs组2周、4周、8周钙盐晶体评分较对照组显著增加(P<0.05)。钙盐晶体的形成评分[(0.92±0.98)分]与Beclin-1、LC-3的表达强度[(6.78±4.25)、(2.61±2.57)]呈正相关(r=0.843、0.628,P<0.05),和自噬体数量[(2.53±1.41)个]呈正相关(r=0.923,P<0.001)。结论CNPs可能会损伤肾小管上皮细胞,诱导细胞即刻自噬活动,自噬相关蛋白表达及自噬体形成增加,在一定程度上促进肾小管中钙盐晶体的形成和聚集。 展开更多
关键词 钙化性纳米微粒 肾结石 自噬 自噬相关蛋白 自噬体
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