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糖尿病前期患者循环miR-103b表达、临床意义及靶基因功能研究
被引量：
3
1
作者
罗宇霖
方丹
+3 位作者
刘钰熙
贺朝晖
吴剑波
罗茂
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期663-670,共8页
目的:探讨2型糖尿病前期患者循环血清中微小RNA(miR)-103b的表达变化与临床意义,并分析其靶基因生物信息学功能。方法:收集糖尿病前期患者(n=48)、糖尿病无并发症患者(n=47)及正常健康人群(n=50)的血清标本,用real-time PCR检测各血清...
目的:探讨2型糖尿病前期患者循环血清中微小RNA(miR)-103b的表达变化与临床意义,并分析其靶基因生物信息学功能。方法:收集糖尿病前期患者(n=48)、糖尿病无并发症患者(n=47)及正常健康人群(n=50)的血清标本,用real-time PCR检测各血清样本中miR-103b的表达水平,并比较3组miR-103b表达水平的差异与临床病理特征之间的相关性,运用受试者工作特征(ROC)曲线评估诊断效率及特异性。利用生物信息学技术,对hsa-miR-103b的特征、进化保守性、靶基因功能以及GO信号通路等进行深入分析。结果:Real-time PCR结果显示,与健康人群相比,循环血清中miR-103b在糖尿病前期及糖尿病无并发症患者的表达显著降低(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,糖尿病前期患者血清中miR-103b的ROC曲线下面积(AUC)达到0.877,提示miR-103b是糖尿病前期具有较高灵敏性和特异性的临床诊断标志物。生物信息学分析结果表明,hsa-miR-103b定位于人染色体5q34,并在10个物种间具有高度的保守性。靶基因预测共获得53个潜在的功能性靶向基因。进一步应用DAVID数据库和GO数据库进行靶基因功能富集分类,结果显示miR-103b靶基因功能主要涉及蛋白质氨基酸的磷酸化、RNA聚合酶II启动子转录调控和DNA依赖的转录调节,参与细胞周期、细胞生长增殖和细胞凋亡,调节功能蛋白结合并与PIP3结合激活下游信号通路。这些功能因子主要富集于MAPK、Wnt、胰岛素和Ras等信号通路,少量因子参与调节细胞周期和脂肪酸代谢等生理过程。结论:2型糖尿病前期患者血清中低水平miR-103b可能是潜在的2型糖尿病早期超前诊断标志物和治疗靶点。
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关键词
微小RNA-103b
糖尿病前期
受试者工作特征曲线
生物信息学分析
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职称材料
抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定
被引量：
1
2
作者
李春
吴桐
+4 位作者
秦大莲
于红
谢翔
李雪
袁青
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1100-1104,共5页
目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-HL)单链抗体。方法:IPTG低温诱导α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗α-HL全人源单链抗体(sc Fv)。将筛选并测序鉴定正确的15...
目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-HL)单链抗体。方法:IPTG低温诱导α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗α-HL全人源单链抗体(sc Fv)。将筛选并测序鉴定正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体进行表达验证和ELISA鉴定。结果:表达纯化的α-HL融合蛋白为可溶性蛋白,大小约为90 k D。采用表达的α-HL融合蛋白作为抗原,经过4轮噬菌体展示筛选,ELISA结果显示大约有34%的sc Fvs与α-HL具有结合特性。将与α-HL结合良好且序列正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体中进行可溶性表达后,经Western blot验证正确; ELISA鉴定结果显示:sc Fvs与购买的α-HL(Sigma,USA)、金黄色葡萄球菌都具有较高的结合活性且对金黄色葡萄球菌特异,与白色葡萄球菌无交叉反应。结论:成功筛选到抗α-HL全人源单链抗体。
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关键词
α-HL
全人源单链抗体
噬菌体展示
筛选
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职称材料
题名
糖尿病前期患者循环miR-103b表达、临床意义及靶基因功能研究
被引量：
3
1
作者
罗宇霖
方丹
刘钰熙
贺朝晖
吴剑波
罗茂
机构
西南
医科
大学
药物研究中心
西南医科大学药学院药理学系
心血管
药理
实验室
西南
医科
大学
临床医学
系
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期663-670,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81172050
No.81570263)
+5 种基金
国家级大学生创新创业训练计划项目(No.201710632043)
四川省教育厅重点项目(No.16ZA0178)
泸州市科技局资助项目[No.2017LZXNYD-T05
No.2016LZXNYDJ24
No.2016-R-70(11/24
8/24)]
文摘
目的:探讨2型糖尿病前期患者循环血清中微小RNA(miR)-103b的表达变化与临床意义,并分析其靶基因生物信息学功能。方法:收集糖尿病前期患者(n=48)、糖尿病无并发症患者(n=47)及正常健康人群(n=50)的血清标本,用real-time PCR检测各血清样本中miR-103b的表达水平,并比较3组miR-103b表达水平的差异与临床病理特征之间的相关性,运用受试者工作特征(ROC)曲线评估诊断效率及特异性。利用生物信息学技术,对hsa-miR-103b的特征、进化保守性、靶基因功能以及GO信号通路等进行深入分析。结果:Real-time PCR结果显示,与健康人群相比,循环血清中miR-103b在糖尿病前期及糖尿病无并发症患者的表达显著降低(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,糖尿病前期患者血清中miR-103b的ROC曲线下面积(AUC)达到0.877,提示miR-103b是糖尿病前期具有较高灵敏性和特异性的临床诊断标志物。生物信息学分析结果表明,hsa-miR-103b定位于人染色体5q34,并在10个物种间具有高度的保守性。靶基因预测共获得53个潜在的功能性靶向基因。进一步应用DAVID数据库和GO数据库进行靶基因功能富集分类,结果显示miR-103b靶基因功能主要涉及蛋白质氨基酸的磷酸化、RNA聚合酶II启动子转录调控和DNA依赖的转录调节,参与细胞周期、细胞生长增殖和细胞凋亡,调节功能蛋白结合并与PIP3结合激活下游信号通路。这些功能因子主要富集于MAPK、Wnt、胰岛素和Ras等信号通路,少量因子参与调节细胞周期和脂肪酸代谢等生理过程。结论:2型糖尿病前期患者血清中低水平miR-103b可能是潜在的2型糖尿病早期超前诊断标志物和治疗靶点。
关键词
微小RNA-103b
糖尿病前期
受试者工作特征曲线
生物信息学分析
Keywords
miRNA-103b
Pre-diabetes mellitus
Receiver-operating characteristic curve
Bioinformatic ana-lysis
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定
被引量：
1
2
作者
李春
吴桐
秦大莲
于红
谢翔
李雪
袁青
机构
西南医科大学药学院药理学系
西南
医科
大学
基础医
学院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1100-1104,共5页
基金
四川省科技厅-西南医科大联合项目(14ZC0021)
泸州市-西南医科大学联合项目(2017LZXNYD-T06)
四川省教育厅创新团队项目(16TD0022)
文摘
目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-HL)单链抗体。方法:IPTG低温诱导α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗α-HL全人源单链抗体(sc Fv)。将筛选并测序鉴定正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体进行表达验证和ELISA鉴定。结果:表达纯化的α-HL融合蛋白为可溶性蛋白,大小约为90 k D。采用表达的α-HL融合蛋白作为抗原,经过4轮噬菌体展示筛选,ELISA结果显示大约有34%的sc Fvs与α-HL具有结合特性。将与α-HL结合良好且序列正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体中进行可溶性表达后,经Western blot验证正确; ELISA鉴定结果显示:sc Fvs与购买的α-HL(Sigma,USA)、金黄色葡萄球菌都具有较高的结合活性且对金黄色葡萄球菌特异,与白色葡萄球菌无交叉反应。结论:成功筛选到抗α-HL全人源单链抗体。
关键词
α-HL
全人源单链抗体
噬菌体展示
筛选
Keywords
α-HL
Human scFvs
Phage display
Selection
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
糖尿病前期患者循环miR-103b表达、临床意义及靶基因功能研究
罗宇霖
方丹
刘钰熙
贺朝晖
吴剑波
罗茂
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定
李春
吴桐
秦大莲
于红
谢翔
李雪
袁青
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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