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A型钾离子通道对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 张晓艳 程俊 +2 位作者 许华丽 毛亮 聂敏海 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第4期440-443,共4页
目的:探究A型钾离子(Potassium,K^+)通道抑制后对舌鳞状细胞癌株(Tca8113)细胞的影响。方法:全细胞膜片钳技术记录和分析A型K^+通道阻滞剂4-氨基吡啶(4-AP)对Tca8113细胞K^+电流的影响;MTT检测A型K^+通道对细胞增殖的作用。结果:在终浓... 目的:探究A型钾离子(Potassium,K^+)通道抑制后对舌鳞状细胞癌株(Tca8113)细胞的影响。方法:全细胞膜片钳技术记录和分析A型K^+通道阻滞剂4-氨基吡啶(4-AP)对Tca8113细胞K^+电流的影响;MTT检测A型K^+通道对细胞增殖的作用。结果:在终浓度为2 mmol/L 4-AP作用下,A型K^+电流的峰值从(267.04±13.84)pA降到(124.81±5.24)pA。在一定范围内,不同浓度4-AP能抑制Tca8113细胞在体外的增殖,且抑制程度随药物浓度和作用时间的增加而增强。结论:A型K^+通道参与Tca8113细胞增殖的过程,且A型K^+通道阻滞剂能抑制Tca8113细胞的增殖。 展开更多
关键词 舌肿瘤 鳞状细胞 4-氨基吡啶 钾通道 电压门控 细胞增殖
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银杏内酯A对老年大鼠心肌细胞收缩功能的影响 被引量:4
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作者 郝艳玲 薛敏 +1 位作者 孙红 曾晓荣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1674-1678,共5页
目的探讨银杏内酯A后处理对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤的老年大鼠单个心肌细胞收缩功能的影响及其机制。方法将SD老年大鼠离体心脏用酶分离获得单个心肌细胞,并制备细胞水平I/R损伤模型,分别用0.1、1、10、30、100μmo... 目的探讨银杏内酯A后处理对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤的老年大鼠单个心肌细胞收缩功能的影响及其机制。方法将SD老年大鼠离体心脏用酶分离获得单个心肌细胞,并制备细胞水平I/R损伤模型,分别用0.1、1、10、30、100μmol·L^(-1)的银杏内酯A在模拟复灌注时进行后处理,并检测细胞存活率、单个心肌细胞收缩幅度、收缩时间(TTP)、舒张50%时间(R_(50))和舒张100%时间(R_(100));检测培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)和超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)的含量;测定细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达。在银杏内酯A最佳浓度组中加入PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002,检测细胞中p-Akt蛋白表达变化。结果银杏内酯A浓度在10、30μmol·L^(-1)时,增加心肌细胞存活率,明显增强心肌细胞的收缩幅度(P<0.01),并缩短缺血造成TTP的延长,降低LDH含量,提高SOD活性,并能降低Bax与Bcl-2的比值,减少凋亡,增加p-Akt蛋白的表达。结论银杏内酯A后处理能够增强老年大鼠心肌细胞的收缩力,降低心肌I/R的损伤程度。 展开更多
关键词 银杏内酯A 缺血/再灌注 老年大鼠 心肌细胞 收缩功能 PI3K/AKT信号通路
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T型钙通道对人牙囊细胞成骨分化的影响 被引量:2
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作者 杨晶晶 左东川 +3 位作者 谢沂航 蔡欣 袁小平 曾锦 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期900-905,共6页
目的:探讨Ca^(2+)对人牙囊细胞(hDFCs)成骨分化的影响及其分子机制。方法:分离培养hDFCs,免疫荧光染色及流式细胞术检测hDFCs的来源。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测L型钙通道、T型钙通道、三磷酸肌醇受体以及雷诺定受体在hDFCs的表达... 目的:探讨Ca^(2+)对人牙囊细胞(hDFCs)成骨分化的影响及其分子机制。方法:分离培养hDFCs,免疫荧光染色及流式细胞术检测hDFCs的来源。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测L型钙通道、T型钙通道、三磷酸肌醇受体以及雷诺定受体在hDFCs的表达及-成骨分化相关基因RUNX相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达。茜素红染色分别检测移除细胞外Ca^(2+)、细胞内Ca^(2+)以及应用电压门控钙通道及Ca^(2+)/CaMKⅡ信号通路特异阻断剂后,hDFCs的成骨水平。结果:移除细胞外Ca^(2+)或细胞内Ca^(2+)后,hDFCs成骨能力显著降低。RT-PCR结果显示,hDFCs表达L型钙通道、T型钙通道、三磷酸肌醇受体以及雷诺定受体。L型钙通道阻断剂Nifedipine对细胞成骨能力没有影响,而T型钙通道阻断剂Amlioride能够明显抑制细胞的成骨水平。提高细胞外Ca^(2+)的浓度(5 mmol/L)能够促进hDFCs成骨分化,应用CaMKⅡ特异性阻断剂KN-93(10μmol/L)后,Ca^(2+)对hDFCs成骨分化的促进作用明显受到抑制。结论:T型钙通道介导的钙离子内流参与调控hDFCs的成骨分化。 展开更多
关键词 人牙囊细胞 钙离子 T型钙通道 成骨分化
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内向整流钾2.1通道蛋白对人牙囊细胞成骨分化的影响及其机制研究 被引量:1
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作者 张鹏 左东川 +3 位作者 牟思宇 钟宇彤 袁小平 曾锦 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期139-147,共9页
目的探讨内向整流钾(Kir)2.1通道蛋白对人牙囊细胞(hDFC)成骨分化的影响及其机制。方法组织块结合酶消化法分离、培养hDFC,流式细胞术鉴定细胞来源,成骨诱导鉴定hDFC成骨分化能力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Kir2.1编码基因KCNJ2在h... 目的探讨内向整流钾(Kir)2.1通道蛋白对人牙囊细胞(hDFC)成骨分化的影响及其机制。方法组织块结合酶消化法分离、培养hDFC,流式细胞术鉴定细胞来源,成骨诱导鉴定hDFC成骨分化能力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Kir2.1编码基因KCNJ2在hDFC中的表达,定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Kir2.1在hDFC成骨诱导前和诱导后KCNJ2基因表达量的变化;膜片钳技术检测hDFC在成骨诱导前和诱导后的细胞膜电位变化;提高细胞外钾离子的浓度(50 mmol·L^(-1))观察膜电位去极化对hDFC成骨分化能力的影响,应用Kir2.1钾通道阻断剂氯化铯(CsCl)和4-甲氧基苄基-1-萘基甲基-胺盐(ML133)观察阻断Kir2.1通道对hDFC成骨分化能力的影响,同时行RT-qPCR检测观察2种干预措施前后成骨分化相关基因[RUNX相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)]的表达变化情况。降低细胞外钾离子的浓度(2 mmol·L^(-1)),钙离子成像检测膜电位超极化对细胞内钙离子浓度的变化。结果RT-PCR结果显示,hDFC表达Kir2.1通道基因KCNJ2;RT-qPCR结果显示,成骨诱导7 d后,KCNJ2在hDFC中的表达量上调;膜片钳结果显示,成骨诱导7 d后,hDFC膜电位由(-12±3.2)mV超极化为(-47±5.2)mV;茜素红和碱性磷酸酶染色结果显示,提高细胞外钾离子的浓度或阻断Kir2.1通道蛋白的功能,能够明显抑制hDFC的成骨矿化能力;钙离子成像结果显示,膜电位超极化能够引起细胞内钙离子浓度的增高。结论Kir2.1通道蛋白介导的膜电位超极化在hDFC成骨分化的过程中起重要的作用。 展开更多
关键词 人牙囊细胞 内向整流钾2.1通道蛋白 成骨分化 膜电位超极化
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